Prueba de preferencia de la oscuridad claro: un método para estudiar el comportamiento relacionado con la ansiedad en el pez cebra

- En primer lugar, crear un recinto de tres lados alrededor del área de pruebas para minimizar los estímulos externos que pueden afectar el comportamiento de los peces.

Coloque la arena en el recinto. Mantenga el tanque de hábitat - que contiene peces para ser probados - fuera del recinto.

Ahora, net suavemente un pez del tanque de hábitat y colóquelo en el tanque de pruebas. Coloque el pez perpendicular a los lados largos de la arena para evitar el sesgo hacia cualquiera de las zonas.

Los peces cebra tienden a pasar más tiempo en la zona oscura cuando están ansiosos.

- Obtener una arena de oscuridad claro de 9 y 1/2 centímetros de ancho por 55 centímetros de largo y 9 y 1/2 centímetros de profundidad con un suelo impermeable blanco. Colocar papel impermeable blanco y negro, no reflectante a las paredes interiores de la arena utilizando Velcro, con la mitad de la arena cubierta de blanco y media cubierta de negro.

Minimalice los estímulos visuales externos mediante la construcción de un gabinete blanco de tres lados para la arena en la que se colocará. Asegúrese de que el área de prueba tenga iluminación aérea difusa que no cause reflejos en la superficie del agua, pero que sea lo suficientemente brillante para el software de seguimiento de movimiento o cuantificación manual post hoc a partir de imágenes de vídeo.

Transportar al grupo de peces a ser probados al área de investigación en el tanque de hábitat y colocarlos fuera del recinto de la arena.

Comience a registrar el comportamiento inmediatamente después de la liberación del animal. Esté atento a cualquier problema de software con el seguimiento de los peces o para saltos o congelaciones de peces. Después de que el ensayo haya terminado, abrocha suavemente y retire los peces de la arena a un tanque de retención o tanque de hábitat.

Comience el análisis examinando el tiempo que pasa en zonas claras contra oscuras. Para cada grupo y para cada pez, obtenga el tiempo relativo que pasa en las zonas claras y oscuras y analice utilizando una prueba t de muestra para determinar si los grupos prefieren significativamente un área sobre la otra. Para comparar preferencias, calcule un índice de preferencias restando el tiempo empleado en la zona de luz del tiempo empleado en la zona oscura y compare las diferencias entre grupos usando pruebas t. Compare varios grupos con un análisis unidireccional de la varianza, utilizando la honesta diferencia significativa de Tukey después de la prueba hoc cuando sea necesario.