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Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans
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JoVE Science Education Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans
Drosophila Larval IHC
  • 00:00Overview
  • 00:41Principles of Larval Immunohistochemistry
  • 03:29Immunohistochemistry Procedure
  • 05:34Applications
  • 08:03Summary

Immunohistochimie des larves de drosophile

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Overview

L’immunohistochimie (IHC) est une technique utilisée pour observer la présence et la localisation de protéines dans les tissus. Les larves de drosophiles sont particulièrement propices à l’IHC en raison de la facilité de leurs procédures de marquage. Les larves sont de plus transparentes, de sorte que certains tissus peuvent être observés sans dissection.

En IHC, les protéines sont ultimement détectées grâces aux anticorps qui se lient spécifiquement aux « épitopes » contenus dans les protéines d’intérêt. Les tissus doivent être fixés avant le marquage pour préserver ces épitopes. De plus les cellules doivent être rendues perméables par l’addition de détergents afin de permettre aux anticorps de pénétrer les membranes. Cette vidéo donne une vision détaillée des réactifs, outils et procédures nécessaires au marquage de tissus larvaires disséqués, procédures comprenant les étapes de fixation, de blocage et de marquage. Cette vidéo présente également les techniques de montage de tissus pour la microscopie à fluorescence. Elle se termine en donnant quelques exemples de leur vaste domaine d’applications (ainsi que quelques variations).

Procedure

La Drosophila melanogaster est un organisme modèle faisant l’objet de nombreuses études en raison de sa polyvalence et de sa facilité d’utilisation. L’immunohistochimie effectuée sur les préparations de larves de drosophile est une méthode très utile pouvant fournir des informations sur la présence, l’emplacement et la co-localisation de protéines. Cette vidéo portera sur les méthodes essentielles de dissection, fixation, blocage et montage de tissus larvaires de drosop…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Drosophila Larval IHC. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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