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一次元薄層クロマトグラフィーを実行します。
 

一次元薄層クロマトグラフィーを実行します。

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薄層クロマトグラフィーや TLC はガスクロマト グラフ法有機化学でよく使用される非揮発性化合物の混合物を分離するために使用します。

TLC は、ガラスまたはプラスチック バックアップ プレートで実行されます。ベースラインは、ラベルと共に、プレートで顕著です。検討されている混合物および参照化合物は、適当な溶剤に溶解し、小さな斑点で tlc 薄層板の下端近く適用。プレートは、瓶の中に配置し、溶剤 (移動相) は各コンポーネントの物理的性質に基づいて混合物を分離します。

楽器重い分離技術が TLC より解像力を持つにもかかわらず、それは速度と低コスト、TLC その場で定性分析のための魅力的な技術なります。このビデオは準備、操作、および薄層クロマトグラフィーの分析を示します。

ガスクロマト グラフのテクニックには、固定とモバイルのフェーズが含まれます。TLC、静止した段階は、プレートに固定材料の薄い層で構成されています。素材は、シリカゲルなどの極性物質です。移動相は、毛管作用によって吸着剤層を移動する非極性液体です。移動相がプレートを移動すると、各スポットの後に分離されている極性に基づくコンポーネント引きずる。

あまり極性化合物プレート プルアップとして携帯電話の段階でより多くの時間過ごすことになります。より極性化合物固定相に関心を持っている、したがって限りプレートを移動しません。

分離では、発展途上のコンテナーで行われます。これらは、瓶の蓋やアルミ箔で覆われたビーカーをすることができます。分離をスピードアップする tlc 薄層板を収容する利用可能な最小のコンテナーを使用します。

移動相または展開溶媒として良い分離可能な無極性はずです。ここではシリカゲルの eluotropic シリーズに示すように、一般的な携帯電話のリスト相抽出能力を高めることの順序。

移動相の数を同時にテストすることができます。きれいなプレート上試料を複数回、少なくとも 2 cm 離れてスポットします。円を形成する各スポットに十分な移動相を適用直径 1-2 cm。

移動相が移動する距離をマークします。移動相は十分な極地で、サンプルは初期のスポットの近くに残ります。移動相の極性も場合サンプルのすべては、溶媒フロントに移行されます。適切な移動相溶媒フロントまでの距離の約 50% の一番外側の輪と、良く分離のリングが表示されます。

必要に応じて、2 つの混和性移動相に必要なプロパティを取得するさまざまな割合で混在できます。ここでは、酢酸エチル、ヘキサンの 1:1 混合物だったあまりにも極、1:20 の混合物は適切に分離しますが、。

選択した移動相とプレートの開発を開始する準備が整いました。

手順を開始するには、目的のサイズに市販の TLC 板をカットします。プレートにガラスのバックアップがある場合は、ガラス カッター、慎重にラインに沿う壊れ目のスコアします。

鉛筆で基準プレートの下から約 1 cm をマークします。線に沿ってサンプルが発見されます場所をマークします。スポットは、端から 3 mm 間隔 1 cm 以上を必ず。適切にラベルを付けます。

固体試料は適当な溶剤で溶解する必要があります。一般的な溶媒には、ヘキサン、酢酸エチル、またはジクロロ メタンが含まれます。試料を溶かす少なくとも極性の溶媒を使用します。

ガラス管とサンプル/溶剤の混合物を作成します。優しく TLC プレート上の目的の場所に先端に触れるし、すぐに削除します。固定相を邪魔しないように重要です。

場を保つためこれよりよい分離につながるよう、可能な限り小さくします。多くのサンプルが必要な点はそれぞれの場所で連続して適用可能性があります。アプリケーション間乾燥する溶媒を許可します。空気の流れより揮発性の溶剤を乾燥する使用できます。

TLC プレートは、開発する準備が整いました。蒸気圧力を高めるため瓶の底にろ紙片を配置します。ベースラインが届かない深さに移動相を追加します。溶剤蒸気が逃げないので使用しないときは瓶をキャップします。

慎重に発展途上の jar に斑点を付けられた TLC プレートを配置します。移動相はベースラインの下を確認します。溶媒前線の進行状況を見て-移動相のリーディング エッジ-ようにプレートをすばやく移動します。

サンプル バンドの拡散を介して展開する開始されますように、板の上端に到達する移動相を許さない。溶媒フロント上部が近づいたら、一度開発室からプレートを削除し、溶剤が乾く前に、溶媒フロント鉛筆で印をつけます。

化合物は、色ではない場合は、スポットを視覚化する UV ランプを使用できます。化合物は、プレートのバック グラウンド蛍光がブロックされます。短波長設定にランプをセットし、乾燥プレートを照らします。鉛筆を使用すると、任意のスポットのランプの下で目に見えるの概要を説明します。鉛筆を使用すると、任意のスポットのランプの下で目に見えるの概要を説明します。

別の可能な可視化手法は、過マンガン酸カリウム、酸化剤を使用することです。過マンガン酸染色にプレートを浸してピンセットを使用します。

削除し、距離をペーパー タオルで余分なソリューションを軽くたたきます。発煙のフード スポットを視覚化するヒートガンでプレートを慎重に加熱します。鉛筆を使用して、表示されるスポットをマークします。

スポットを可視化されている、ここで示すように、規格と、その関心のある物質を比較することができます。この例では、未知の世界は、1, 3-diphenylpropynone、有機合成のビルディング ブロックです。既知の標準と塩化ベンゾイル開始材料の 1 つにバンドを比較することにより、製品を識別できます。

遅延係数または Rfは、未知の化合物を識別するために使用されます。Rfは、化合物は、移動相が移動する距離を TLC プレートを移動する距離の比率です。要因はベースラインからスポットまでの距離を測定し、ベースラインから溶媒フロントまでの距離で割ることによって決定されます。

特定化合物の Rfは溶媒選択、厚さ、吸着剤、温度、およびサンプル サイズのアクティビティなど、実験で使用される条件に依存します。これらの要因の実験の間の一貫性を保つために注意する必要があります。

ゼウスの薄層クロマトグラフィー入門を見てきただけ。今分離の基礎となる理論、テストの適切な移動相を選択する方法および設定や tlc 薄層板を操作する方法を理解する必要があります。見てくれてありがとう!

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