6,419 Views
•
07:26 min
•
November 20, 2018
DOI:
Этот метод обеспечивает некоторый увлекательный синтез наночастиц, обрезаемых ядром галлия-68, для гибридной молекулярной визуализации ПЭТ/МРА. Основным преимуществом этой техники является то, что благодаря использованию микроволновой технологии синтез быстро и, что более важно, полностью воспроизводится. Во-первых, растворить 75 миллиграммов гексагидрата хлорида железа и 80 миллиграммов дигидрата трисавиевой соли лимонной кислоты в девяти миллилитров воды.
Перенесите смесь в микроволновую колбу. Затем загрузите динамический протокол в микроволновую печь. Установите температуру до 120 градусов по Цельсию, время до 10 минут, давление до 250 пси, и мощность до 240 Вт.
Добавьте один миллилитр гидрата гидразина в реакционной смеси. Затем запустите микроволновый протокол. В то же время, промыть гель фильтрации опреснивание колонки с 20 миллилитров дистиллированной воды.
Как только протокол закончен, а колба остынет до комнатной температуры, пипетка 2,5 миллилитров конечной смеси на колонку и отбросит прохождение. После этого добавьте в колонку три миллилитров дистиллированной воды и соберите наночастицы в пластиковой трубке. Добавьте 75 миллиграммов гексагидрата хлорида железа и 80 миллиграммов дигидрата лимонной кислоты трисодия в флакон.
Elute генератор галлия-68, используя рекомендуемый объем и концентрацию соляной кислоты в соответствии с поставщиком. После инъекции соляной кислоты в самозащите генератора получаются четыре миллилитра хлорида галлия-68, готовые к использованию без дальнейшей обработки. Добавьте четыре миллилитров хлорида галлия-68 в микроволновую колбу.
Затем пипетку пять миллилитров дистиллированной воды в колбу и хорошо перемешать. Теперь загрузите динамический протокол в микроволновую печь. Установите температуру до 120 градусов по Цельсию, время до 10 минут, давление до 250 пси, и мощность до 240 Вт.
Добавьте один миллилитр гидрата гидразина в реакционной смеси. Затем запустите микроволновый протокол. В то же время, промыть гель фильтрации опреснивание колонки с 20 миллилитров дистиллированной воды.
Как только протокол закончен и колба охлаждается до комнатной температуры, пипетка 2,5 миллилитров окончательной смеси на колонку и отбросить поток. Затем добавьте три миллилитров дистиллированной воды в колонку и соберите наночастицы в стеклянный флакон. Для измерения гидродинамического размера наночастиц галлия-68 пипетка 60 микролитров образца в кювет и выполнить три динамических измерения рассеяния света на образец.
Для оценки коллоидной устойчивости наночастиц галлия-68 инкубируют 500 микролитров образца в различных буферах при 37 градусах Цельсия в разное время, от нуля до 24 часов. В выбранное время перенесите 60 алицитов микролитров на кюветы и измерьте их гидродинамический размер. Чтобы получить гель фильтрации радиохроматограммы, фракционировать элюцию из столбца исключения размера в 500 микролитер aliquots во время шага фильтрации геля.
Затем измерьте радиоактивность, присутствуют в каждой алицита с помощью активиметра. Чтобы определить радиохимическую стабильность, инкубировать наночастицы галлия-68 в сыворотке мыши в течение 30 минут при 37 градусах Цельсия. После инкубации очистим наночастицы ультрафильтрацией.
Затем измерьте радиоактивность, присутствуют в наночастицах и фильтрата. Данные гидродинамических размеров наночастиц галлия-68 выявили узкое распределение размеров и средний гидродинамический размер 7,9 нанометров. Измерения пяти различных синтезов доказали метод воспроизводимости.
Гидродинамические размеры наночастиц галлия-68, инкубированных в различных средствах массовой информации от нуля до 24 часов, не показали существенных изменений, то есть образец стабилен в различных буферах и сыворотках. Из-за быстрого нагрева, достигнутого с помощью микроволновой технологии, наночастицы представляют ультра малых размеров ядра около четырех нанометров. Изображения электронной микроскопии выявили однородные размеры ядра и отсутствие агрегации.
Наночастицы геля галлия-68, фильтруемые хроматограммой, показывают основной пик радиоактивности, соответствующий наночаститам, и уменьшенный пик, соответствующий свободному галлию-68. Урожайность радиозабелки составила 92%, что приводит к определенной активности по сравнению с 7,1 гигабеккерелем на миллимол железа. Отличное продольное значение 11,9 и скромное значение релаксации 22,9 были получены для пяти наночастиц галлия-68, что дает среднее соотношение 1,9, то есть галлий-68 наночастицы идеально подходят для T1 взвешенных МРТ.
МРД фантомные изображения при различных концентрациях наночастиц галлия-68 показывают увеличение концентрации железа и положительный контраст. Увеличение концентрации железа предполагает увеличение концентрации галлия-68, а сигнал ПЭТ становится все более интенсивным. Использование микроволновой технологии позволяет воспроизводимый и быстрый синтез наночастиц оксида железа для мультимодальной визуализации.
После этой процедуры мы подготовили трассировщик, который может быть использован для целевой молекулярной визуализации с ПОМОЩЬю ПЭТ, T1 MRI или гибридных подходов. После его разработки, этот метод проложить путь для исследователей, чтобы изучить использование гибридных молекулярных изображений в таких областях, как онкология и сердечно-сосудистые заболевания. Не забывайте, что работа с радиоактивными соединениями может быть чрезвычайно опасной, и при выполнении этой процедуры всегда следует принимать меры радиозащиты.
Здесь мы представляем протокол для получения68легированный основной оксид железа наночастиц Ga через быстро Микроволновая печь driven синтеза. Методология предоставляет PET / (Т1) наночастицы МРТ с radiolabeling эффективность выше, чем 90% и радиохимических чистотой 99% в синтезе 20-мин.
09:06
Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging
Related Videos
9760 Views
11:41
In vitro Labeling of Human Embryonic Stem Cells for Magnetic Resonance Imaging
Related Videos
10087 Views
16:44
Born Normalization for Fluorescence Optical Projection Tomography for Whole Heart Imaging
Related Videos
10286 Views
11:51
Mesoscopic Fluorescence Tomography for In-vivo Imaging of Developing Drosophila
Related Videos
10628 Views
10:38
Synthesis and Calibration of Phosphorescent Nanoprobes for Oxygen Imaging in Biological Systems
Related Videos
13839 Views
09:40
Electron Spin Resonance Micro-imaging of Live Species for Oxygen Mapping
Related Videos
22285 Views
13:21
Preparation, Purification, and Characterization of Lanthanide Complexes for Use as Contrast Agents for Magnetic Resonance Imaging
Related Videos
14900 Views
07:33
Quantifying Mixing using Magnetic Resonance Imaging
Related Videos
10834 Views
08:16
Strategies for Optimization of Cryogenic Electron Tomography Data Acquisition
Related Videos
4335 Views
14:56
Imaging Replicative Domains in Ultrastructurally Preserved Chromatin by Electron Tomography
Related Videos
3627 Views
Read Article
Cite this Article
Fernández-Barahona, I., Ruiz-Cabello, J., Herranz, F., Pellico, J. Synthesis of 68Ga Core-doped Iron Oxide Nanoparticles for Dual Positron Emission Tomography /(T1)Magnetic Resonance Imaging. J. Vis. Exp. (141), e58269, doi:10.3791/58269 (2018).
Copy