Roman objekt anerkendelse og objekt placering adfærdsmæssige test i mus på en Budget

Denne metode kan hjælpe med at besvare vigtige spørgsmål om hukommelsesregulering. For eksempel bestemmer vi specifikke proteiners rolle i hukommelsen ved at teste transgene knockoutmus i disse opgaver. Den største fordel ved denne teknik er, at det er en hurtig og omkostningseffektiv måde at udføre hukommelse test i ethvert laboratorium.

Demonstration af arenakonstruktionen er afgørende, fordi opløsningsmiddelsvejsningen kun vil give stærke resultater, hvis den udføres med omhu. Begynd med at erhverve fem ark akryl, akryl cement, og en 16-gauge hypo applikator. Fjern den beskyttende papirbelægning fra akrylpladerne.

Tør derefter alle materialerne for at bekræfte, at størrelserne er korrekte. Dernæst samle og indlæse sprøjten med akryl cement. Juster den lange kant af en ydervæg med basens øverste kant, og sørg for, at de er vinkelret på hinanden ved hjælp af en kombination eller maskinarbejderplads.

Brug derefter sprøjten til at påføre en lille og stabil perle af cement direkte til hjørnet af de to stykker, der samles. Hold de to brikker på plads i fem minutter, indtil de er sat i første omgang. Gentag de samme trin for at fastgøre den anden ydervæg til basen.

Derefter vedhæfte to indre vægge, en ad gangen, basen med akryl cement. Endelig skal du bruge sprøjten til at anvende en lille og stabil perle af cement direkte til hjørnet nu dannes af ydervæggen og den indvendige væg. Begynd tilvænning session ved at opdele mus i grupper på fire, og hus dem i individuelle rene bedrift bure.

Dernæst bringe en gruppe af mus ind i testrummet og give dem mulighed for at akklimatisere i mindst 30 minutter. Efter akklimatisering, begynde at optage videoen. Placer hver mus i arenaen mod væggene i frigivelsehjørnet, og lad musene udforske arenaerne frit i seks minutter.

Stop derefter optagelsen af videoen, og vend musene tilbage til deres rene bure under intervallet mellem forsøg. Rengør alle arenaer med dyr facilitet anbefalede rengøringsmetoder, såsom aftørring med 70% ethanol for at minimere olfaktoriske signaler. Endelig, efter at have afsluttet i alt tre tilvænning sessioner, returnere alle mus til deres hjem bure.

Efter 24 timer, bringe den samme gruppe af mus ind i testrummet, og give dem mulighed for at akklimatisere sig til testrummet i mindst 30 minutter, som gjort før tilvænning sessioner på den foregående dag. Ud gennemføre træningsforsøget ved hjælp af to genstande placeret i arenaen. Anbringe objekter med dobbeltsidet tape seks gange seks centimeter væk fra to ikke-release hjørner, således at de er opvejes i arenaen.

Tillad mus at undersøge arenaen og objekter frit i 10 minutter. Stop derefter videooptagelsen. Placer mus tilbage i deres rene bedrift bure i 20 minutter, og rense områderne med ethanol.

Dernæst for at udføre objektet placering opgave OLT, flytte et af de objekter, der anvendes i træningsforsøget til en ny ikke-release hjørne, og anbringe objektet seks centimeter fra hver væg i dette hjørne med dobbeltsidet tape. Gentag den samme videooptagelse af musene i området i 10 minutter, som tidligere beskrevet. Endelig, at udføre den nye objekt anerkendelse opgave NORT, erstatte det objekt, der ikke blev flyttet under OLT med et nyt objekt, og anbringe det nye objekt seks centimeter fra de to vægge i hjørnet med dobbeltsidet tape.

Gentag den samme videooptagelse af musene i området i 10 minutter, som tidligere beskrevet. Under OLT afspejles hukommelsen for objektplacering af en gruppe mus, der i gennemsnit bruger betydeligt mere tid med et objekt, efter at det er flyttet. Dette kan også repræsenteres som en stigning i forskelsbehandlingsindekset.

I NORT afspejles hukommelsen for objektplacering af en gruppe mus, der i gennemsnit bruger betydeligt mere end 50 % af undersøgelsestiden med det nye objekt eller viser et diskriminationsindeks, der er betydeligt større end nul. Plukke objekter, som mus ikke har nogen iboende præference for, er nøglen. For eksempel viste mus i en pilottest med en stikprøvestørrelse på fire en tendens til at bruge mindre end 50 % af undersøgelsestiden med objekt A, når de blev parret med objekt B.Når objekt A derefter blev brugt som nyt objekt i en NORT med en større stikprøvestørrelse på 16, brugte mus betydeligt mindre end 50 % af undersøgelsestiden med objekt A.Disse data tyder på iboende aversion mod objekt A.Under denne procedure brugte mus betydeligt mindre end 50 % af undersøgelsestiden med objekt A.Disse data tyder på iboende aversion mod objekt A.Under denne procedure , er det vigtigt at huske at rengøre alle genstande og arenaer grundigt mellem brug.

I denne metode, objekt undersøgelse kan scores manuelt af forskere eller ved hjælp af kommerciel software. Software har højere startomkostninger, men kan, når den er kalibreret, spare tid og økonomiske ressourcer på lang sigt.