Medicine
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モルモット モデルにおける心筋傷害の後 - 心筋パッチのこと由来の注入
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ここでモルモット モデルにおける心筋細胞ヒト iPS 細胞由来心筋パッチの注入後、左心室 cryoinjury の誘導のためのプロトコルを提案する.
Transcript
この方法の目的は、小動物の凍結梗塞モデルにおける人工心臓組織移植の機能的影響を評価することである。この方法の利点は、安定した梗塞サイズを有する比較的再現性のある心筋梗塞の誘導を可能にすることである。つま先ピンチへの応答の欠如を確認した後、麻酔モルモットを40〜42°Cの温暖化プラットフォームに置きます。
目の軟膏を塗布し、胸郭を剃り、デキレートします。露出した皮膚に25度の超音波トランスデューサーゲルを塗布し、心エコーシステムからのトランスデューサを胸郭に置き、左心室の頂点を同時に視覚化して左心室の頂点を同時に視覚化して、右首から左脚に向かってBモードの2次元寄角座間長軸図を取得し、術前の左心室機能を調査します。次に、トランスデューサを90度回転させて、短軸Bモードビューを中乳頭レベルで取得します。
最後の画像が得られた後、モルモットを手術台に移し、手足を広げワシの位置にテープで貼ります。露出した皮膚を2つの順次ヨウ素ベースおよび80%エタノールスクラブで消毒し、気管領域に垂直切開1.5センチメートルを作る。気管を覆う筋肉をぶっきらぼうに解剖する。
気管が観察されると、空気管を18ゲージIVカニューレで穿刺し、カニューレの可撓性部分を気管管として挿入する。手順中に連続的な換気のために動物の呼吸器に気管管を接続し、第5肋間空間を見つけるために最初の肋間空間から始まる肋骨のスペースを数えます。モルモットの左側の5番目の肋間空間に2センチメートルの水平切開を行い、肋間筋が到達するまで電気焼灼で筋肉を解剖する前に皮下組織を取り除きます。
胸膜と小さいはさみで肋間筋を穏やかに解剖し、胸腔に達し、左肺を視覚化できる。肋骨の間にリトラクターを挿入し、心臓の良い眺めが得られるまで慎重にリトラクタを開きます。心膜を左心室前壁の領域に約1センチ開き、左心室の凍結傷害を誘発する際に肺を損傷から守るために、左肺に圧縮を置く。
次に、浸食した金属スタンプの先端を液体窒素で0.5センチメートルの断面直径0.5センチメートルで冷却してから、プローブを心臓の左前壁に30秒間押し付けます。その後、スタンプの中に200°Cの電気はんだ付け鉄を入れて、金属をティッシュから取り除くことができるようにスタンプを温めます。3番目のスタンプアプリケーションの後、肋間空間からレトラクタを取り出し、人工呼吸器の流出管を2秒間クランプして肺の呼吸を避けるために最大圧力で肺を膨らまします。
その後、2つの4-0縫合糸で肋骨を閉じ、5-0ランニング縫合糸で肋骨の上の筋肉、5-0縫合糸シングルステッチで皮膚を閉じます。気管管を取り外した後、単一の8-0を使用する気管の穿刺部位を閉じ、3つの単一ステッチ5-0縫合糸で創傷を閉じる縫合糸。凍結傷害の7日後、縫合糸を取り除き、左側側の瘢痕領域に2センチの水平皮膚切開を行い、電気焼灼を使用して余分な胸膜接着を穏やかに解剖する。
胸膜のスペースをはさみで慎重に開き、肋骨の拡散機を挿入して心臓を露出させます。健康な周囲の心筋と比較して、その淡い色で梗塞の領域を視覚的に識別し、梗塞領域上に設計された心臓組織パッチを置きます。2つの8-0でパッチを保護する心臓の非梗塞領域の両側の縫合糸と肺のアテクサシスを避けるために圧力で肺を膨らませる。
次に、肋間空間からリトラクタを取り出し、実証したように動物を閉じます。心臓組織移植を操作した4週間後に、左心室機能の残業の変化を評価するために実証されるように胸部心エコー検査を行う。凍結傷害の4週間後にメイソントリクローム染色は、平均して左心室心筋の25%以上の大きな経壁瘢痕を明らかにする。
ジストロフィン染色は、新たに形成された心筋の起源を確認するヒトKu80の瘢痕および染色に部分的に再筋肉化した大きな心筋移植片を示す。移植された人工心臓組織の経胸部心エコー検査モニタリングは、左心室放出分率の改善、分画領域短縮、および左心室および拡張期直径の減少を明らかにする。胸壁と左心室の間の癒着が存在し、左心室心筋を傷つける一定のリスクがあるので、この種の再行操作で胸膜腔を慎重に開くことが不可欠です。
ヒトの人工心臓組織の移植後、左心室駆出率の変化を監視するためにいくつかの方法を使用することができる。心エコー検査以外にも、圧力量ループの侵襲的な測定を使用して、これらの変化を監視することができます。この方法は、ヒトの工学的組織移植のすべての側面を調査することを可能にする。
機能的な結果だけでなく、不整脈のような潜在的なリスクは、この小さな動物モデルで評価することができます。
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医学、問題 145、改変心臓組織、心筋細胞、cryoinjury、モルモット、心筋パッチ、iPS 細胞Related Videos
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