Denne protokol beskriver de skridt, omkostninger og nødvendige udstyr til at skabe E. coli-baseret celle ekstrakter og gennemføre in vitro- protein syntese reaktioner inden for 4 dage eller derunder. For at udnytte de fleksible karakter af denne platform for brede programmer, diskuterer vi reaktionsbetingelser, der kan tilpasses og optimeret.