Journal
/
Biochemistry
/
Identifikation af roman CK2 Kinase substrater ved hjælp af en alsidig biokemiske tilgang
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Identification of Novel CK2 Kinase Substrates Using a Versatile Biochemical Approach

Identifikation af roman CK2 Kinase substrater ved hjælp af en alsidig biokemiske tilgang

DOI:
10.3791/59037-v

•

11:11 min

•

February 21, 2019

•

, ,
1Department of Biochemistry and Molecular Biology,Drexel University College of Medicine

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:35Preparation of the Tissue Samples
  • 01:20Kinase Assay: Thiophosphorylation and Alkylation
  • 02:34Preparation of the Desalting Columns
  • 03:40Removal of PNBM
  • 04:42Immunoprecipitation: Part I
  • 05:32Protein A/G Agarose Bead Preparation
  • 06:39Immunoprecipitation: Part II
  • 08:19Analysis/Validation of Results
  • 09:06Results: Analysis and Identification of Novel CK2 Kinase Substrates
  • 10:48Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Formålet med denne protokol er at mærke, berige og identificere substrater af protein kinase CK2 fra en kompleks biologisk prøve celle lysate f.eks væv homogenatet. Denne metode udnytter unikke aspekter af CK2 biologi til dette formål.

Tags

CK2Kinase SubstratesBiochemical ApproachEndogenous SubstratesCell LysateGTPgammaSPNBMSephadex G-25Affinity Purification

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

En Protein Forberedelse Metode til High-throughput Identifikation af proteiner Samspil med en Nuclear Cofactor Brug LC-MS / MS-analyse

Kvantificering af Bakteriel Histidin kinase Autophosphorylering Ved hjælp af en Nitrocellulose-bindingsassay

Analyse af proteinkinaseaktivitet med radiomærket ATP

Biokemiske og strukturel karakterisering af kulhydrat Transport substrat-bindende-protein SP0092

Identifikation af Cyclin-afhængig Kinase 1 specifikke fosforylering websteder ved en In Vitro -Kinase Assay

Identifikation af Havlampretten feromoner ved hjælp af Bioassay-styrede fraktionering

Forbedring af engraftment af humane inducerede pluripotente stamcelle afledte Kardiomyocytter via en forbigående hæmning af Rho Kinaseaktivitet

Karakterisering på molekyleniveau ved hjælp af robuste biokemiske tilgange af et nyt kinase protein

Kinasehæmmer screening i selv monterede humane protein mikrosystemer

Ikke-radioaktiv analyse til måling af polynukleotid phosphorylation af små nukleotid substrater

Read Article