Journal
/
Biochemistry
/
Identifikasjon av romanen CK2 Kinase underlag med en allsidig biokjemiske tilnærming
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Identification of Novel CK2 Kinase Substrates Using a Versatile Biochemical Approach

Identifikasjon av romanen CK2 Kinase underlag med en allsidig biokjemiske tilnærming

DOI:
10.3791/59037-v

•

11:11 min

•

February 21, 2019

•

, ,
1Department of Biochemistry and Molecular Biology,Drexel University College of Medicine

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:35Preparation of the Tissue Samples
  • 01:20Kinase Assay: Thiophosphorylation and Alkylation
  • 02:34Preparation of the Desalting Columns
  • 03:40Removal of PNBM
  • 04:42Immunoprecipitation: Part I
  • 05:32Protein A/G Agarose Bead Preparation
  • 06:39Immunoprecipitation: Part II
  • 08:19Analysis/Validation of Results
  • 09:06Results: Analysis and Identification of Novel CK2 Kinase Substrates
  • 10:48Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Målet med denne protokollen er etiketten, berike og identifisere underlag av protein kinase CK2 fra et komplekse biologiske utvalg som en celle lysate eller vev homogenate. Denne metoden bruker unike aspekter av CK2 biologi for dette formålet.

Tags

CK2Kinase SubstratesBiochemical ApproachEndogenous SubstratesCell LysateGTPgammaSPNBMSephadex G-25Affinity Purification

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

En Protein Forberedelse metode for High-throughput identifisering av proteiner samspill med et kjernefysisk kofaktor Bruke LC-MS / MS-analyse

Kvantifisering av bakteriell histidin kinase Autofosforylering Ved hjelp av en Nitrocellulose bindingsanalyse

Analysering av proteinkinaseaktivitet med radiomerket ATP

Biokjemiske og strukturelle karakteristikk av karbohydrater Transport substrat-binding-protein SP0092

Identifikasjon av Cyclin-avhengige Kinase 1 bestemt fosforylering områder av en In Vitro Kinase analysen

Identifikasjon av havet Lamprey feromoner bruker Bioassay-guidede fraksjoneres

Styrking av engraftment av humant indusert pluripotent Stem Cell-avledet Cardiomyocytes via en forbigående hemming av Rho kinase aktivitet

Karakterisering på Molecular Level bruker robust biokjemiske tilnærminger av en ny kinase protein

Kinase inhibitor screening i selv-monterte Human protein Microarrays

Ikke-radioaktiv analyse for å måle polynukleotidfosforylering av små nukleotids underlag

Read Article