Medicine
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Toepassing van Biochip Microfluidic technologie te detecteren Serum allergeen-specifieke Immunoglobulin E (sIgE)
Summary April 21st, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Dit document stelt een protocol voor het opsporen van serum specifieke immunoglobuline met een cartridge gebaseerde Chemoluminescentie-systeem van microfluidic en de evaluatie van het nut ervan in allergie diagnoses.
Transcript
De biochip microfluïde technologie systeem is een microfluïde cartridge gebaseerde sectie die gebruik maakt van de chemiluminescence principe voor assage van serum specif IGE. In vergelijking met andere detectiemethoden hebben de bioIC-systemen de voordelen van lage kosten en vereisen ze minder serum om serum IGE te detecteren. De implicaties van deze techniek is de neiging naar de diagnose van allergieziekten zoals rhinitis en astma, omdat veel van deze patiënten zijn gevoelig voor gemeenschappelijke detecteerbare allergenen.
Hoewel deze methode inzicht kan geven in aandoeningen van de ademhalingsallergie, kan het ook worden toegepast op andere situaties, zoals voedsel- en huidallergieën. Aangezien deze techniek is gemakkelijker te gebruiken, en heeft een verlaagde methode voor de exploitant opleiding, individuen die nieuw zijn in het systeem kan leren om het snel te gebruiken. Levendige demonstratie van deze kwestie is van cruciaal belang als de bepaalt of de test succesvol is en vereist bekwame handmatige werking.
Om serummonsters te testen op serumimmunline E-antilichamen tegen hele allergenen, selecteert u willekeurig drie monsters met ten minste 900 microliter serum en neemt u de chip uit de kit en nummert deze. Schakel vervolgens de computer en de analysekracht in. Start het Lab IT-programma op de computer.
Als het waarschuwingsvenster voor donker frame opduikt, klikt u op OK om een lektest uit te voeren en klikt u vervolgens op het middelste logo om de bewerkingsinterface in te voeren. Controleer de reactietemperatuur en de lading gekoppeld apparaat of CCD temperatuur, de reactie temperatuur moet stijgen tot 37 plus of min een graad celsius in ongeveer tien minuten en de CCD temperatuur moet dalen tot min 15 plus of min een graad Celsius. Wanneer de CCD-temperatuur is gedaald tot min 15 plus of min een graad Celsius, bevestigen dat er geen andere items links in het instrument, en sluit de deur.
Klik vervolgens op gereedschappen, systeemtest, lektest. Wanneer de test is voltooid, verschijnt het rapportvenster. Laad vervolgens 620 microliter wasbuffer, 120 microliter blokkeerbuffer, 60 microliter conjugaten van conjugaten A en B, 60 microliter substraten A en B en 100 microliter van elk serummonster in de overeenkomstige reagenstanks op de microfluïde cartridge.
Nadat u op cartridge-id hebt geklikt, gebruikt u de streepjescodescanner om het serienummer van de cartridge te scannen en de voorbeeld-ID in te voeren.Plaats vervolgens de cartridge in de analyzer, sluit de deur en klikt u op analyzer en voert deze uit om de analyse te starten. Aan het einde van de analyse exporteer je de resultaten naar een geschikt statistisch softwareprogramma en verwijder je de cartridge uit de analyzer. Veeg het interne verwarmingsijzer en de elektromagneet van de analyzer licht af met 75 procent alcohol en sluit het Lab IT-venster.
Het temperatuurbewakingsvenster verschijnt en sluit automatisch wanneer de CCD opwarmt tot de vijf graden celsius-beschermingsmodus, waarna het veilig is om de analyzer en de computer uit te schakelen. Het microfluïde systeem produceert herhaalbare resultaten, zoals blijkt uit deze gegevens voor kattenhuidschilfers, hondenhuidschilfers en kakkerlak na negen testrondes. Zoals waargenomen, alle gegevens zijn binnen het bereik van twee standaarddeviaties, die in overeenstemming is met de maximaal toegestane klinische fout.
Zoals verwacht van de positiviteitspercentages voor de allergenen, zijn alle evaluatieresultaten voor inhalante allergenen superieur aan de voedselallergenen. Aangezien het gebied onder de curvewaarden een bereik van 0,613 tot 0,984 aantoont en het gebied onder de curvewaarden voor de drie inhalerende allergenen groter is dan 0,950, kan worden geconcludeerd dat systeem twee een hoge nauwkeurigheid heeft met betrekking tot systeem één. Consistentieanalyse voor de twee systemen toont aan dat de kappa-waarden voor de drie inhalanten allemaal groter zijn dan de kappa-waarden voor de voedselallergenen die over het algemeen onder 0,4 vallen.
In deze strooipercelen die met systeem twee resultaten langs de x-as en systeem één langs de y-as worden geconstrueerd, kan de distributie van de concentratie van serumimmunline E van de twee systemen voor zes verschillende allergenen worden waargenomen. Controleer voor aanvang van de detectie altijd de reactie en CCD-temps, omdat deze gekoppeld zijn aan de nauwkeurigheid van de test. Na deze procedure kunnen andere methoden zoals een opgeloste diagnose van componenten worden uitgevoerd om aanvullende vragen over allergeenoverschrijdende standaardisatie en co-sensibilisatie te beantwoorden.
Microfluidic chip technologie is met succes toegepast op het gebied van allergie diagnose om problemen zoals onvoldoende serum aan te pakken, en hoge medische kosten Als werken met menselijk serum, symptomen kunnen worden bepalend gevaarlijk. Het dragen van de juiste persoonlijke beschermingsmiddelen en andere voorzorgsmaatregelen moet altijd worden genomen tijdens het uitvoeren van deze procedure.
Please enter your institutional email to check if you have access to this content
has access to
BackLogin to access JoVE
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
To receive a free trial, please fill out the form below.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You
Thank You
Thank You
