A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Kaekal Patch Kesin Lokalizasyonu ile Kronik Kolit İlişkili Kolorektal Kanser Murine Apendektomi Modeli
Chapters
Summary August 24th, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Sunulan protokol, inflamatuar barsak hastalığı ile ilişkili kolorektal kanserin indüksiyonu takip eden bir farede apandisin (kaekal yama) kolay bir cerrahi olarak çıkarılmasını açıklar. Bu murine apendektomi modeli insan gastrointestinal hastalığın patogenezinde apandisin biyolojik rolünün araştırılmasını sağlar.
Transcript
Genel protokol farelerde kaekal yama olarak bilinen apandisçıkarma kolayca uygulanan cerrahi prosedürleri açıklar. Murine apendektomi modeli, apendiksin insan gastrointestinal hastalığının patogenezindeki biyolojik rollerini incelemek için kullanılabilir. İnsan apandisiti tartışılmaz bir organdır.
Son çalışmalar apandisin bağırsak sağlığının korunmasında önemli bir rol oynadığını ileri sürmüşlerdir. Apandisin biyolojik işlevini incelemek için hastalıkla ilişkili apendektomi hayvan modeli nin üretilmesi çok önemlidir. Bu protokolde, farelerde kaekal yama olarak bilinen apandisi çıkarmanın basit ve güvenli bir cerrahi adımını açıklayacağız.
Bu modelin başarısını sağlamak için, aşağıdaki videoda göreceğiniz gibi üç önemli adım vardır. İlk olarak, ameliyattan önce farelerin kaecum bulmak. İkincisi, karın küçük bir kesi yapmak.
Üçüncüsü, caecum kütüğünün dezenfekte edin ve kapatın. İlk bölüm, fareler apendektomi. Ameliyat öncesi steril cerrahi aletler ve temizlik solüsyonları hazırlayın.
Ameliyat sırasında postural hareketi önlemek için ekstremiteler boyunca tıbbi yapışkan bant dört şeritler yerleştirerek bir supine pozisyonda bir platform üzerinde fare anestezi ve güvenli. Yavaşça yumru hissi bulmak için farenin tüm karın dokunun. Örtünün üzerini örtün ve fare karnının tıraş lı bölgesini iki kez entoyodin kullanarak mümkün olduğunca geniş bir şekilde dezenfekte edin.
Karın orta hattında 0,5 santimetre ile bir santimetre arasında değişen uzunlamasına bir kesi yapın. Kaecum önceden belirlenmiş konumuna göre, caecum aramak ve yavaşça yaklaşık bir santimetre uzunluğunda kaecal yama tanımlamak için dışa. Bağırsak nemlendirmek için önceden ısıtılmış ve steril fizyolojik salin kullanın.
Postoperatif kanama ve enfeksiyon olası komplikasyonları önlemek için, 8-0 kullanarak kaecum mezenterik kan damarları ligate Dikiş. Caecum'u tuzlu suyla nemlendirin. Proksimal kolonda caecum apeks yakın açık döngü ile 4-0 sütür kullanarak rezeksiyon bölgesi işaretleyin.
Mikro makas kullanarak işaretli rezeksiyonun altındaki kaekal yamasını kesin ve tıbbi pamuklu bezlerle kalan kaecal içeriğini silin. Kaecum kütüğünün entoiyomu ile dezenfekte edin. 8-0'ı kullanarak kütüğü çalıştırarak kapatın Dikiş.
Daha önce kaecum kütüğünde rezeksiyon işaretleme için kullanılan 4-0 iplik döngü, dikkatle çıkarın. Entoiyot kullanarak dikişli konumu sterilize. Kesme alanını tuzlu su ile yeniden nemlendirin.
8-0 kullanarak çalışan dikiş ile kas tabakasını kapatın dikiş iplik. 4-0 dikiş ipliği ile kesilen dikişleri kullanarak cilt tabakalarını kapatın. Cerrahi kesiği entoiyom ile iki kez dezenfekte edin.
Sonra, % 75 tıbbi alkol kullanarak iyot çıkarın. Fareyi yavaşça geri çevirin. Subkutan buprenorfin kilogram vücut ağırlığı başına 0.1 miligram enjekte, ve fizyolojik tuzlu 0.4 mililitre.
Ve fareyi ısı yastığında dinlendirin, ta ki bilinçliliğe dönene kadar. Fareyi steril kafese geri koyun ve iyileşmesini sağlamak için ameliyattan sonra üç gün boyunca ağrı belirtileri için fareyi yakından izleyin. İkinci bölüm: Azoksimetan ile Kolit İlişkili Kolorektal Kanser indüksiyonu, AOM, ve Dekstran Sodyum Sülfat, DSS, yedi gün post-apendektomi.
AOM bir aliquot eritin ve% 0.9 normal tuzlu kullanarak mililitre başına 1 miligram seyreltin. Tüm hazırlık süreci duman kaputunda gerçekleştirilir. % 2 DSS hazırlamak için 200 mililitre otoklavlı su çözeltisi dört gram DSS tozu çözünür.
Her kafeste beş fare var. Ağırlığına göre fare başına gram başına 0,01 mililitre ile Intraperitoneal AOM enjeksiyonu yapın. Otoklavlı suyu beş gün boyunca %2 DSS ile değiştirin.
Fareler ek iki döngü için otoklavlı su ile beslenir. Üçüncü bölüm:Sonuçlar. Akış ve ELISA sonuçları kaecal yamanın başarılı bir şekilde kaldırıldığını gösterir.
Bu işlem IgA özgü plazma hücrelerinin önemli azalma katkıda bulunabilir, kalın bağırsakta salgı IgA bariz bir değişiklik, karşılaştırıldığında 3%DSS, şiddetli kanlı dışkı nedeniyle yüksek mortalite oranı ve önemli kilo değişikliği vardır, anüs prolapsus, ve abdominal abcess. %2'lik DSS, yüksek sağkalım oranının yaklaşık %80'e kadar olması ve hem sham hem de apendektomi gruplarında makul kilo değişimi için tüm süreç için uygundur. Bu görüntülerde gösterildiği gibi kolitle ilişkili kolorektal tümörleri başarıyla indükledik.
H & E boyama görüntülerde, siyah ok mukozal ülser gösterir, ok ucu adenokarsinom gösterir, ve beyaz bir ok bezleri arasında nötrofil infiltrasyon gösterir. Adenokarsinomun farklı evreleri hem sham hem de apendektomi gruplarında görülebilir. Bu uygun maliyetli Murine Apendektomi Modeli gibi bazı önemli soruları cevaplamak için kullanılabilir: bağırsak bakterilerinin düzenlenmesinde apandis rolü nedir ve nasıl bağırsak ilişkili lenfoid dokuda bağışıklık yanıtı katılır.
Unutmayın, bağırsak yapışmasında hasar görmesini önlemek için, kaecum ve küçük deri kesisi ön konumu önemlidir. Buna ek olarak, kolit indüklemek için% 2 DSS kullanılır. Ancak diğer fare suşları için daha yüksek bir DSS konsantrasyonu kullanılabilir.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
