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급성 골수성 백혈병 세포에서 CRISPR/Cas9 리보뉴클레오단백질에 의한 RUNX1 내성 소음기의 전사 적 역할 조사
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JoVE Journal Genetics
Investigation of the Transcriptional Role of a RUNX1 Intronic Silencer by CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein in Acute Myeloid Leukemia Cells
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급성 골수성 백혈병 세포에서 CRISPR/Cas9 리보뉴클레오단백질에 의한 RUNX1 내성 소음기의 전사 적 역할 조사

DOI:
10.3791/60130-v

•

09:16 min

•

September 01, 2019

•

, , , ,
1Blood Cancer Cytogenetics and Genomics Laboratory, Department of Anatomical and Cellular Pathology, Prince of Wales Hospital,The Chinese University of Hong Kong, 2State Key Laboratory in Oncology in South China,The Chinese University of Hong Kong

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:16crRNA Design and Preparation of Cas9/gRNA RNP Complexes
  • 02:16Electroporation of RNP Complexes into OCI-AML3 Cells
  • 03:12Screening and Selection of Cell Clones with Biallelic Deletions
  • 05:51Functional Analyses of Silencer Deletions with Real-time Quantitative RT-PCR
  • 07:18Results: RUNX1 Intronic Silencer Deletion
  • 08:16Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

미리 조립된 Cas9/가이드 RNA 리보뉴클레오단백질 복합체의 직접 전달은 조혈 세포에서 게놈 편집을 위한 빠르고 효율적인 수단입니다. 여기서, 우리는 RUNX1 인트로닉 소음기를 삭제하고 OCI-AML3 백혈병 세포에서 전사 반응을 검사하기 위해 이 접근법을 활용한다.

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Keyword Extraction: RUNX1Intronic SilencerCRISPR/Cas9 RibonucleoproteinAcute Myeloid LeukemiaCis-regulatory ElementsGene ExpressionTranscriptional RoleHematopoietic CellsElectroporationCas9 NucleaseGRNARNP ComplexFragment Analysis

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