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Investigación del papel transcripcional de un silenciador intrónico RUNX1 por RIBonucleoprotein CRISPR/Cas9 en células de leucemia mieloide aguda
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Investigation of the Transcriptional Role of a RUNX1 Intronic Silencer by CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein in Acute Myeloid Leukemia Cells
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Investigación del papel transcripcional de un silenciador intrónico RUNX1 por RIBonucleoprotein CRISPR/Cas9 en células de leucemia mieloide aguda

DOI:
10.3791/60130-v

•

09:16 min

•

September 01, 2019

•

, , , ,
1Blood Cancer Cytogenetics and Genomics Laboratory, Department of Anatomical and Cellular Pathology, Prince of Wales Hospital,The Chinese University of Hong Kong, 2State Key Laboratory in Oncology in South China,The Chinese University of Hong Kong

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:16crRNA Design and Preparation of Cas9/gRNA RNP Complexes
  • 02:16Electroporation of RNP Complexes into OCI-AML3 Cells
  • 03:12Screening and Selection of Cell Clones with Biallelic Deletions
  • 05:51Functional Analyses of Silencer Deletions with Real-time Quantitative RT-PCR
  • 07:18Results: RUNX1 Intronic Silencer Deletion
  • 08:16Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

La entrega directa de complejos de ribonucleoproteínacas Cas9/ARN guía premontados es un medio rápido y eficiente para la edición del genoma en células hematopoyéticas. Aquí, utilizamos este enfoque para eliminar un silenciador intrónico RUNX1 y examinar las respuestas transcripcionales en las células leucémicas OCI-AML3.

Tags

Keyword Extraction:RUNX1Intronic SilencerCRISPR/Cas9 RibonucleoproteinAcute Myeloid LeukemiaCis-regulatory ElementsGene ExpressionTranscriptional RoleHematopoietic CellsElectroporationCas9 NucleaseGRNARNP ComplexFragment Analysis

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