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70% आंशिक हेपेटेक्टोमी और एसीटामिनोफेन के संयोजन से तीव्र यकृत विफलता के चूहे मॉडल की पीढ़ी
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Summary November 27th, 2019
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वर्तमान अध्ययन में विकसित तीव्र जिगर विफलता पशु मॉडल संभावित उपचारों के अध्ययन के लिए एक व्यवहार्य विकल्प प्रस्तुत करता है । वर्तमान मॉडल शारीरिक और नशीली दवाओं से प्रेरित हेपेटिक चोट के संयुक्त प्रभाव को रोजगार और उपन्यास चिकित्सा की क्षमता का अध्ययन करने के लिए एक उपयुक्त समय खिड़की प्रदान करता है ।
Transcript
तीव्र जिगर की विफलता या ALF आम तौर पर एक स्वस्थ जिगर में जिगर की चोट के तेजी से विकास के रूप में परिभाषित किया गया है और इसके प्रमुख कार्यों की गंभीर हानि के साथ है । ऑर्थोटोपिक लिवर प्रत्यारोपण अधिकांश मामलों में एकमात्र उपलब्ध इलाज है। लेकिन लिवर डोनर्स की कमी के कारण एएलएफ के मरीजों में मृत्यु दर बहुत ज्यादा है।
वैकल्पिक चिकित्सीय दृष्टिकोणों की क्षमता का अध्ययन करने और एएलएफ के रोगविज्ञान को बेहतर ढंग से समझने के लिए, रोग के पशु मॉडल नियोजित किए जाते हैं। एएलएफ के कई मॉडल एसिटामिनोफेन, कार्बन टेट्राक्लोराइड, कॉनकानवेलियन ए, लिपोपोलिसाकराइड, डी-गैलेक्टोसामाइन और थिओएस्टामामाइड के हेपेटोटॉक्सिक प्रभावों पर आधारित हैं। हालांकि, इनमें खराब प्रजनन क्षमता और रिवर्सिबिलिटी, अन्य महत्वपूर्ण अंगों के लिए विषाक्तता, मानव रोग विकृति और प्रजातियों में भिन्नता का खराब प्रतिबिंब जैसी कई कमियां हैं।
इसलिए, एक बेहतर मॉडल प्रणाली की आवश्यकता है जो प्रजनन योग्य है और चिकित्सीय हस्तक्षेप के प्रभावों का अध्ययन करने के लिए पर्याप्त समय अंतराल की अनुमति देता है। वर्तमान अध्ययन में, आंशिक हेपेटेक्टॉमी और एसीटामिनोफेन हेपेटोटॉक्सिकिटी के प्रभावों के संयोजन से चूहों में एक एएलएफ मॉडल बनाया गया है। जिगर के औसत और बाएं पार्श्व पालि को उत्पाद शुल्क 70% यकृत द्रव्यमान में हटा दिया जाता है, और इसके अलावा, एसिटामिनोफेन को एएलएफ का कारण बनने के लिए दिया जाता है।
मॉडल में एएलएफ के विकास को जैव रासायनिक और हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण की विशेषता है और यकृत क्षति की रिवर्सिबिलिटी सिनेजेनिक स्वस्थ चूहे हेपेटोसाइट्स के प्रत्यारोपण द्वारा पुष्टि की गई है। वर्तमान अध्ययन में 180 से 250 ग्राम की सीमा के भीतर शरीर का वजन होने वाले विस्टार चूहों का उपयोग किया गया था। निम्नलिखित चरण चूहे में एएलएफ को शामिल करने के लिए शल्य चिकित्सा प्रक्रिया का वर्णन करते हैं।
जानवर को केटामाइन-जाइलाज़ीन मिश्रण को इंट्रापेरिटेली इंजेक्शन देकर एनेस्थेटाइज्ड किया जाता है। जानवर के पैर के पैर की अंगुली को पिंच करके पूर्ण एनेस्थेटाइजेशन की पुष्टि की जाती है, और आगे की प्रक्रियाएं तभी की जाती हैं जब कोई पेडल पलटा न हो। कॉर्नियल डेसीफिकेशन को रोकने के लिए, दोनों आंखों पर कार्बक्सी मिथाइल-सेल्यूलोज आधारित आई ड्रॉप लागू किया जाता है।
जानवर को सफेद टेप का उपयोग करके सर्जिकल बोर्ड पर रोका जाता है। बाल एक बिजली क्लिपर का उपयोग कर ऊपरी दाहिने पेट सर्जिकल क्षेत्र से हटा दिया जाता है। परिपत्र गति में निष्फल कपास पैड का उपयोग करके 70% इथेनॉल और पोविडोन आयोडीन के तीन बारी-बारी से स्क्रब द्वारा सर्जिकल साइट को कीटाणुरहित करें।
त्वचा को काटने के लिए xiphoid और रिबकेज के समानांतर के लिए स्टर्नम लंबवत के नीचे चिह्नित किया जाता है। एक बाँझ ड्रेप शीट जिसमें एक सेंटीमीटर द्वारा लगभग तीन सेंटीमीटर का उद्घाटन होता है, चिह्नित त्वचा पर रखा जाता है। स्केलपेल की मदद से चिह्नित रेखा के साथ लगभग दो से तीन सेंटीमीटर का एक ट्रांसवर्स चीरा बनाया जाता है।
चीर क्षेत्र के आसपास अंतर्निहित मांसपेशियों की परत के साथ त्वचा का लगाव धीरे बाँझ गीला कपास युक्तियों द्वारा हटा दिया जाता है। इसके बाद, एक ट्रांसवर्स चीरा सिर्फ xiphoid प्रक्रिया के नीचे पेरिटोनियल परत के माध्यम से किया जाता है । दो खारे गीले कॉटन टिप्स की मदद से छाती को कोमल दबाव देकर लिवर की बाईं पालि को उजागर किया जाता है।
एक बाँझ नायलॉन धागा पाश उजागर जिगर पालि के आसपास फिसल गया है । लूप को सावधानीपूर्वक माइक्रो विच्छेदन संदंश या कपास की कलियों की मदद से पालि के आधार पर ले जाया जाता है। माइक्रोसर्जरी सुई धारक और माइक्रो फोर्सप्स की मदद से, लूप के दो सिरों को बांधा जाता है, जो गाँठ को यथासंभव लोब के आधार के करीब रखते हैं।
यह रक्त वाहिकाओं को संकुचित करने और जिगर के पालि को हटाने के बाद रक्तस्राव को कम करने के लिए है। दूसरी तरफ दो अतिरिक्त गांठें बंधी हुई हैं। बंधे पालि को माइक्रोसर्जरी कैंची का उपयोग करके गाँठ के ठीक ऊपर काटा जाता है जो इस्कीमिक स्टंप को छोड़ देता है।
इसी तरह, कपास युक्तियों का उपयोग करके जिगर के औसत पालि को उठाया जाता है। जिगर के औसत पालि के अद्वितीय आकार को पहचानें। पालि के ऊपर एक नायलॉन धागा पाश रखें, मजबूती से अपने सिरों टाई ।
दो अतिरिक्त समुद्री मील दूसरी तरफ बंधे हुए हैं और पालि को फिर से काटते हैं। लोब्स को हटाने के बाद, पेरिटोनम को अवशोषित कैटगट क्रोमिक 4/0 अवशोषित सीवन का उपयोग करके निरंतर टांके के साथ टांके का उपयोग करके टांके लगाया जाता है जिसके बाद त्वचा को सरल बाधित सीवन के साथ टांके आता है। त्वचा बंद होने के बाद, शल्य चिकित्सा साइट के चारों ओर पोविडोन आयोडीन समाधान लागू किया जाता है।
ड्रेप शीट को हटा दिया जाता है और जानवर को सर्जरी बोर्ड से उतार लिया जाता है। 5% ग्लूकोज समाधान के एक मिलीलीटर में 12 मिलीग्राम सेफोटैक्सिम की एंटीबायोटिक खुराक जानवर को इंट्रापेरिटेली दी जाती है ताकि इसे पश्चात संक्रमण के जोखिम से बचाया जा सके। सर्जरी के बाद दर्द से राहत के लिए, एनाल्जेसिक मेलोक्सिकम, आमतौर पर 1 मिलीग्राम प्रति किलोग्राम शरीर का वजन जानवर को चमड़े के नीचे दिया जाता है, इसके बाद प्रत्येक दिन दो दिनों के लिए एक खुराक होती है।
जानवर को गर्म ठीक होने वाले पिंजरे में ले जाया जाता है। जानवर 30 से 40 मिनट के भीतर होश में आ जाता है और हिलना शुरू कर देता है। ऑपरेशन किए गए जानवर को तब तक अलग-थलग रखा जाता है जब तक सर्जिकल घाव पूरी तरह से ठीक नहीं हो जाते, जिसमें तीन से चार दिन लग सकते हैं।
एएलएफ को प्रेरित करने के लिए, एसिटामिनोफेन के 750 मिलीग्राम प्रति किलोग्राम शरीर का वजन और मेलोक्सीकम की दूसरी खुराक आंशिक हेपेटेक्टॉमी प्रक्रिया के 24 घंटे बाद इंट्रापेरिटोनली इंजेक्शन दी जाती है। यह खुराक आहार 24 घंटे के बाद दोहराया जाता है। एएलएफ के शामिल होने के बाद जानवरों में अस्तित्व में गंभीर रूप से कमी पाई गई ।
एएलएफ के विकास की विशेषता के लिए, एसीटामिनोफेन की दूसरी खुराक के बाद संचालित जानवरों को इच्छामृत्यु दी गई थी, और विभिन्न जैव रासायनिक और हिस्टोलॉजिकल अध्ययन किए गए थे। वीडियो में आगे के परिणाम बताए गए हैं । एएलएफ प्रेरित समूह में जीवित रहने के प्रतिशत में गंभीर रूप से कमी पाई गई और एसिटामिनोफेन की दूसरी खुराक के 24 घंटे के भीतर ८०% तक मृत्यु दर देखी गई ।
एएलएफ प्रेरित समूह में रूपात्मक स्तर पर यकृत क्षति स्पष्ट थी और केवल 70% आंशिक हेपेटेक्टॉमी समूह था। जबकि नियंत्रण समूह और केवल एसीटामिनोफेन उपचारित समूह में स्वस्थ उपस्थिति थी। अन्य समूहों की तुलना में एएलएफ प्रेरित समूह में एलेनिन अमीनो ट्रांसफरेज, एस्पार्टेट अमीनो ट्रांसफरेज और क्षारीय फॉस्फेटेस का एंजाइम स्तर अत्यधिक ऊंचा पाया गया।
क्यूपीसीआर द्वारा जीन अभिव्यक्ति प्रोफाइल के विश्लेषण से एपोप्टोसिस, सूजन और यकृत की चोट की प्रगति में शामिल जीन की ऊंचा अभिव्यक्ति दिखाई दी । लिवर टिश्यू सेक्शन के हेमेटॉक्सीलिन और इओसिन स्टेनिंग से कंट्रोल ग्रुप में ज्यादातर नॉर्मल हेपेटोसाइट्स का पता चला । एएलएफ समूह में, ज्यादातर मध्यम मैक्रो वेसिकुलर फैटी डिजनरेशन देखा गया।
प्रोथ्रोम्बिन समय और अंतर्राष्ट्रीय सामान्यीकृत अनुपात को एएलएफ प्रेरित समूह में ऊंचा पाया गया, जो रक्त जमाव प्रक्रिया में रुकावट का संकेत है । सर्वाइवल प्रतिशत को सिनेजेनिक स्वस्थ चूहा हेपेटोसाइट्स के प्रत्यारोपण के बाद एएलएफ प्रेरित समूह में बहाल पाया गया । कोशिका प्रत्यारोपण के बाद एएलएफ प्रेरित जानवरों में एंजाइमों के सीरम का स्तर एलेनिन अमीनो ट्रांसफरेज, एस्पार्टेट अमीनो ट्रांसफरेज और क्षारीय फॉस्फेटेस को बहाल किया गया ।
चूहों में एएलएफ को प्रेरित करने की यह विधि प्रजनन योग्य है, अच्छी रिवर्सिबिलिटी दिखाती है और नए उपचारों का परीक्षण करने के लिए एक उपयुक्त समय खिड़की प्रदान करती है। इसलिए, यह मॉडल एएलएफ के इलाज के लिए संभावित चिकित्सीय दृष्टिकोणों के मूल्यांकन के लिए एक कुशल रोग मॉडल के रूप में काम कर सकता है।
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