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Exposição bacteriana do peptide para a seleção de enzimas Biotinylating novas
JoVE Journal
Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Bacterial Peptide Display for the Selection of Novel Biotinylating Enzymes
DOI:

10:43 min

October 03, 2019

, ,

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:29Insertion of Peptide Coding Sequencing Sequence in pBAD BirA-eCPX-AP
  • 01:32Generation of a BirA Library
  • 03:16Selection of Bacteria Expressing Biotinylated Peptide
  • 07:18Quantification of Enrichment
  • 08:26Results: Model Selection with pBAD-BirA-eCPX-AP and pBAD-BirA-eCPX-AP(K10A)
  • 10:00Conclusion

Summary

Automatic Translation

Aqui nós apresentamos um método para selecionar para variantes novas do ligase BirA da biotina-proteína de E. coli que biotinylates um peptide específico do alvo. O protocolo descreve a construção de um plasmídeo para a exposição bacteriana do peptídeo alvo, geração de uma biblioteca BirA, seleção e caracterização de variantes de BirA.

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