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Scambio specifico di prolina da parte di analoghi della prolina in proteine fluorescenti: come la "chirurgia molecolare" della spina dorsale influisce sul ripiegamento e sulla stabilità
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Residue-Specific Exchange of Proline by Proline Analogs in Fluorescent Proteins: How “Molecular Surgery” of the Backbone Affects Folding and Stability
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Scambio specifico di prolina da parte di analoghi della prolina in proteine fluorescenti: come la "chirurgia molecolare" della spina dorsale influisce sul ripiegamento e sulla stabilità

DOI:
10.3791/63320-v

•

10:31 min

•

February 03, 2022

•

, , , ,
1Institute of Chemistry,Technische Universität Berlin, 2Department of Chemistry,University of Manitoba, 3Institute of Physics,Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:39Production of Recombinant Wild-Type Fluorescent Proteins and Selective Pressure Incorporation to Produce Fluorescent Proteins with Proline Analogs
  • 04:08Fluorescence Emission of Protein Variants
  • 05:00Denaturation and Refolding of EGFP Variants
  • 06:38Results: Effect of Atomic Substitutions in Variants of GFP
  • 09:17Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Per superare i limiti della mutagenesi classica sito-diretta, gli analoghi della prolina con modifiche specifiche sono stati incorporati in diverse proteine fluorescenti. Mostriamo come la sostituzione dell'idrogeno con il fluoro o dei singoli con doppi legami nei residui di prolina ("chirurgia molecolare") influenzi le proprietà fondamentali delle proteine, tra cui il loro ripiegamento e l'interazione con la luce.

Tags

Keywords: Proline AnalogNon-canonical Amino AcidProtein FoldingProtein StabilityMolecular SurgeryFluorescent ProteinSite-directed MutagenesisRibosomal Protein TranslationProtein EngineeringE. Coli CultureNMM MediumOptical DensityCell SuspensionCentrifugationAmino Acid DepletionAmpicillin

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