小鼠小肠移植

Biology

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Summary

小鼠小肠移植模型已经认识到作为一个重要工具,以研究免疫排斥反应和屏幕上的新的免疫抑制药物的mechanismes。然而,这种模式是有限的使用,因为所涉及的技术是一个非常技术上的挑战。现在,我们引进的改性技术。

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Liu, F., Kang, S. Small Bowel Transplantation In Mice. J. Vis. Exp. (7), e258, doi:10.3791/258 (2007).

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Abstract

自1990年以来,他克莫司的免疫抑制和提高手术技巧,增加强有力的免疫抑制药物的阵列,预防感染,并选择适合病人的发展有助于提高精算移植和小肠移植的所有类型的病人的存活率。不可逆转的肠衰竭和肠外营养的并发症的患者现在应该经常考虑小肠移植。然而,小肠移植的存活率已缓慢改善比较有利,越来越多与肾脏,肝脏,心脏和肺。小肠移植与其他器官相比,仍然是不能令人满意。取得进一步的进展可能依赖于更好地了解移植物免疫学和生理学,动物模型,可大大促进。小鼠小肠移植模型的一个更广泛的使用是需要移植肠的免疫学和生理学研究以及在诊断早期急性排斥反应的有效方法。然而,这种模式是有限的使用,因为所涉及的技术是一个非常技术上具有挑战性。我们已经开发出一种改性技术。门静脉和下腔静脉吻合时,两呆缝线捐助的门户静脉的近端顶点与收件人小号下腔静脉远端心尖。左墙是封闭的下腔静脉和捐助者的门户静脉与下腔静脉内继续缝合后,一个结与近端顶点停留后缝合下腔静脉的右墙和捐助者的门户网站静脉下腔洞穴,用10-0缝线缝合继续关闭外。这种方法更容易执行,因为只是一方的下腔静脉和10-0缝线吻合,是正确的大小,以避免出血和血栓形成。在这篇文章中,我们提供的技术,以补充视频的细节。

Protocol

捐助方准备和小肠的收获:

  1. 鼠标ansetheized腹腔注射巴比妥和放置仰卧经营领域。
  2. 是一个长期的中线腹部切口。近端空肠标识,用6-0缝线结扎。 8-0缝合连接的远端空肠配合肠系膜血管结扎。
  3. 回肠远端用6-0缝线结扎。所附回肠远端的肠系膜血管结扎用8-0缝线。
  4. 该门户网站是从周围的脂肪和连接组织暴露,结扎和划分胰腺和脾静脉。
  5. 腹主动脉是暴露和暴露肠系膜上动脉周围组织。
  6. 1毫升肝素(10u/ml)注入下腔静脉肝素。
  7. 分为肝脐门静脉,肠系膜上动脉从主动脉,包括主动脉卡雷尔补丁。
  8. 空肠和回肠分为远端的关系。整个小肠被删除,然后保存在4 ° C的盐溶液。

收件人准备和移植:

  1. 鼠标ansetheized腹腔注射巴比妥和放置仰卧经营领域。
  2. 是一个长期的中线腹部切口。缩回腹腔内容物以外的腹部用纱布暴露腹主动脉和下腔静脉。
  3. 暴露腹主动脉和下腔静脉的分支,并用10-0缝线结扎。
  4. 周围放置主动脉和下腔静脉的近端和远端的结扎。
  5. venotomy是在用30号针头的收件人的下腔静脉。然后扩展到一个长度等于捐助的微型剪刀门静脉开放。
  6. aortotomy是在30号针头与腹主动脉的收件人。开幕式,然后扩展到一个长度等于捐赠者的肠系膜上动脉,用微型剪刀卡雷尔补丁
  7. 腹主动脉和下腔静脉切口用生理盐水灌注。
  8. 捐赠者的小肠是放在收件人的用纱布覆盖腹部的左侧。
  9. 留缝合线放置在近端顶点和受援捐助的肠系膜上动脉卡雷尔补丁,腹主动脉远端心尖。
  10. 收件人的腹主动脉和捐赠者的肠系膜上动脉卡雷尔补丁右侧吻合继续缝合首先完成。
  11. 两呆缝线先在近端顶点和捐赠者的捐赠者的门静脉和收件人的下腔静脉吻合的门户收件人的下腔静脉远端的顶点。
  12. 左墙的下腔静脉和捐赠者的门静脉与下腔静脉内继续缝合封闭。
  13. 后一个结先端留近端缝合,下腔静脉右墙和捐助者的门静脉以外的下腔静脉缝合关闭。
  14. 捐赠者的小肠是交给收件人的腹部右侧。收件人的腹主动脉和捐助的肠系膜上动脉吻合右墙封闭,继续缝合。
  15. 毕竟吻合,远端结扎拆除首先要检查吻合口出血。
  16. 如果有很少或没有出血,吻合口近端结扎被删除。捐赠者的小肠充满血液立即小肠的颜色变成红色。
  17. 移植回肠末端是收件人的空肠近端吻合到另一侧,用8-0缝线连续缝合。
  18. 捐赠人的近端空肠exteriorized作为右侧的四缝线8-0缝线两侧腹壁皮肤造口和担保。
  19. 肠子返回腹腔,用6-0继续缝合关闭。
  20. 收件人鼠标放在温暖的地方。一个小时后,收件人复苏。

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Discussion

独特的小肠移植后的免疫反应,已被广泛使用在小鼠小肠移植模型研究的课题。基本的免疫反应,如移植物抗反应,宿主抗移植物反应,这两种反应,慢性排斥反应和宽容的组合已经介入。几乎所有的证明或潜在的临床意义免疫抑制剂已经过测试,其在小肠移植模型的疗效。

我们修改的小鼠小肠移植技术在几个方面提高效率和成功率:

  1. 捐赠者的小肠内,应保持清晰,没有任何留下的粪便。
  2. 卡雷尔修补主动脉,肠系膜上动脉的边缘应划分与收件人的腹主动脉开幕式顺利,大小相等。
  3. 不要扭曲时吻合收件人的下腔静脉与门静脉与肠系膜上动脉,门静脉。因为门户是静脉肠系膜上动脉。
  4. 小肠应放在腹部中间,并保持适当的张力肠系膜上动脉,门静脉重建血液循环,避免血栓形成。
  5. 肠系膜上动脉,应保持适宜的张力,当宿主小肠进入腹部腔返回后关闭腹部,以避免血栓形成。
  6. 0.1毫升cefuroxine(20mg/kg)左腹部腔前关闭腹部,以避免感染。
  7. 可以肯定的是,不要让当执行到腹部活动的粪便流小肠吻合术,以避免术后感染。
  8. 收获,以避免手术后小肠坏死的小肠时,不要损伤肠系膜血管。

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Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
Sutures 10-0 and 11-0 MONOSOF
Microscope Unversal S3 Carl Zeiss, Inc.

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References

  1. SJ, M. iddleleton Is intestinal transplantation now an alternative to home parenteral nutrition. Proc Nutr Soc. 66, (3), 316-320 (2007).
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Comments

1 Comment

  1. Hi
    Dr Fengchun Liu
    Congratulations for excellent video.
    I am from Brazil and I fellow in University in São Paulo.
    I started my trainning small bowell transplantation in mice. Now it is third transplantation, your video it is much important for trainining.
    Thank´s

    Reply
    Posted by: Anonymous
    April 14, 2010 - 9:23 PM

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