Тактильные кондиционирования и анализа движения усиков стратегии отбора проб в медоносных пчел (

Neuroscience

Your institution must subscribe to JoVE's Neuroscience section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

В этом протоколе мы покажем, как условие использованы медоносных пчел на тактильные раздражители и ввести 2D техники захвата движения для анализа кинематики мелкомасштабных усиков модель выборки.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Mujagić, S., Würth, S. M., Hellbach, S., Dürr, V. Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees (Apis mellifera L.). J. Vis. Exp. (70), e50179, doi:10.3791/50179 (2012).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Медоносные пчелы (Apis MELLIFERA L.) eusocial насекомых и хорошо известны своим сложным разделением труда и ассоциативных обучаемость 1, 2. Рабочие пчелы проводят первую половину своей жизни внутри темного улья, где они кормят личинок или создания правильной шестиугольной гребни для пищи (например, пыльцу или нектар) и выводок 3. Антенны являются внеочередными мультисенсорного щупальца и играют ключевую роль в различных тактильных опосредованное задач 4, в том числе улья здания 5 и распознавания 6. Позже в жизни, каждая отдельная пчела покидает улей, чтобы корм для пищи. Тогда пчелы должны научиться различать доходных источников пищи, запомните их расположение, и довести его до своих товарищей гнездо 7. Пчелы используют различные цветочные сигналы, такие как цвет или запах 7, 8, но и тактильные сигналы от поверхности лепестка 9 до образования мультисенсорного воспоминания источника пищи. В лабораторных сотрудничестваnditions, пчелы могут быть обучены аппетит парадигмы обучения к дискриминации тактильные особенности объекта, такие как ребра или канавки с их антеннами 10, 11, 12, 13. Эта парадигма обучения тесно связан с классическим обонятельные кондиционирования хоботка ответ расширение (PER) в запряженной пчел 14. Преимущество тактильные парадигму обучения в лаборатории является возможность совмещения поведенческих экспериментов по изучению различных физиологических измерений, в том числе анализ усиков картину движения.

Protocol

1. Подготовка пчел

  1. Нектара или пыльцы комбайны попали в поле либо из сахарозы подачи или непосредственно из улья входа при возвращении с пищей поездки. Каждая отдельная пчела захватили в стеклянный флакон, который закрыт с пеной вилку и приняты сразу в лабораторию для дальнейшей обработки.
  2. В лаборатории, захваченной пчел кратко охлаждают в холодильнике при температуре 4 ° C, пока они не показывают первые признаки неподвижности.
  3. Каждая отдельная пчела иммобилизованных установлен в небольшой металлической трубки с помощью клейкой ленты между головой и грудной клеткой и на животе. Следует проявлять осторожность, чтобы хоботок и усики свободно перемещаться.
  4. Краска сложные глаза и глазки фиксированной пчелы с белой краской (например, растворителей Tipp-Ex), чтобы закрывать видение.
  5. Добавить небольшую каплю расплавленного воска позади головы пчела, чтобы исправить это на ленте между головой и грудной клеткой для предотвращения движения головы во время записи.
  6. Отметить каждая отдельная пчела с номером на ленту для лучшей идентификации и поместить трубку с фиксированным пчел в влажной атмосферы, чтобы предотвратить обезвоживание.
  7. Поток каждой отдельной пчелы в течение 5 секунд с каплями 30% раствора сахарозы представлены с помощью шприца и пусть все пчелы восстановиться в течение 30 минут, прежде чем начать с тактильной протокол кондиционирования.

2. Тактильные принадлежности

  1. Перед кондиционирования, каждая отдельная пчела должна быть проверена на хоботок ответ расширение (PER) до 30% сахарозы стимулы применяются к антеннам. Тем самым кончиком хобота должен пересечь линию между виртуальными открыл челюстями. Отменить все пчелы, которые не реагируют с PER на сахарозу стимул.
  2. Для тактильных кондиционирования использовать латунный куб (например, 3 х 5 мм) с гладкой или гравированные картины, например, горизонтальные или вертикальные пазы формирования решетки с длиной волны 150 мкм, как на условный раздражитель (CS). Фаили безусловного раздражителя (США) используют 30% раствор сахарозы (бытовая сахара, разведенного в воде).
  3. Латунный куб (CS) помещают в держатель на микроманипулятора (например, Märzhäuser MM33), чтобы обеспечить точное позиционирование во время процедуры кондиционирования. США представлен пчела с шприц с 30% раствором сахарозы.
  4. Кондиционирование процедура состоит из пяти пар из тактильный раздражитель (CS) и раствор сахарозы (США) с между судом интервал (ITI) 5 мин. Поместите одну пчелу перед микроманипулятора с установленными тактильный раздражитель (CS). Установите CS медленно, так, что на поверхности тактильный стимул параллельно глава пчел (рис. 1, Б). Расстояние между животным и тактильные объект должен быть в диапазоне от усиков рабочий радиус испытания пчел, то есть пчелы должны быть в состоянии сканировать тактильных стимулов в удобное положение Wго обе антенны. В примере, показанном на рисунке 1, расстояние 3 мм. Пусть пчелы сканирование тактильный раздражитель (CS) в течение 5 сек. После первых 3 секунд, представляют собой капли 30% сахарозы (США) раствор с помощью шприца в соответствии с хоботком. Используйте кончик шприца аккуратно поднять хобот. Сахароза стимуляции под хоботок будет вызывать безусловный за 15. Разрешить пчелы лизать сахарозы награды. Используйте секундомер с сигналом тревоги для поддержания точных интервалов времени, в течение кондиционирования.
  5. Кондиционер PER используется как мера для обучения успехом пчелы. После первого вознаграждены пар, пчелы начинают реагировать на CS выступление расширение их хоботком, указывая, что они ожидают, что предстоящая награда. Полностью вытянутой хоботком наблюдается в любое время в течение 3 сек временном окне презентации тактильных стимулов и, прежде чем сахароза презентации оценивается как положительный ответ. Нет ответа считается отрицательным. ОККurrence из PER Следует отметить, экспериментатором. Процент пчел показывает PER во время презентации CS построена для каждого испытания.

3. Кинематическая Recordings

  1. Антеннальный движений одной пчелы использованы записанные с цифровой видеокамерой с подходящим макро-объектив (например, Basler A602f-2 оснащен TechSpec ВЗМ 200, работает на 50 кадров в секунду с помощью соединительного провода огня). Камера расположена над животными в вид сверху вниз (рис. 1). На рисунке 1, пространственное разрешение записи составляет 0,02 мм / пиксель.
  2. Калибровка камеры, запись одной фотографии 10 х 10 мм шахматной доски с длиной ребра 1 мм от различных ориентаций под объектив камеры. Калибровка может быть сделано с помощью инструмента калибровки камеры окна Matlab 16.
  3. Поместите одну фиксированную пчелы ниже объектива камеры. Представьте тактильных стимулов, прикрепленные к микроманипулятора, К животным. Действуйте так же, как описано для тактильного кондиционер и записывать движения усиков в то время как пчелы сканирования объекта. Важно, что полный усиков рабочий диапазон и тактильных стимулов видны. Выбор модели стимула испытания и пробные номера зависят от эксперимента.

4. Анализ данных

  1. Вычисление фоновое изображение делается в Matlab. Во-первых, медианное значение оттенках серого с течением времени должна быть рассчитана для каждого пикселя. Статические объекты, такие как фиксированный глава пчел и тактильных стимулов, будет представлять собой фоновое изображение. Движущиеся объекты, как две антенны, а не будет частью фона.
  2. Каждый кадр записанного видео должен быть загружен последовательно, а разница между текущим кадром и фоновые изображения должен быть вычислен. В результате этого вычитания подчеркивает те части изображения, которые переходят от кадра к кадру. Ideally, антенны пчелы являются единственными области ненулевых значений (рис. 1С).
  3. Для дальнейшей обработки, два крупнейших районов с ненулевыми значениями пикселов считаются антеннами. Для обеих антенн двоичной маски, которые будут созданы содержащие для каждого пикселя значение 1, если пиксель относится к антенне и значение 0 в противном случае. Эта маска служит основой для локализации усиков советов позже. Чтобы получить предварительное маска для всего изображения серо-значение каждого пикселя изображения разницы по сравнению с заранее определенным порогом. Так как мы заботимся шума в конце этого порога выбрана достаточно низкой. Предварительные маски тогда еще несет в себе два вида ошибок: во-первых, из-за шума на изображении небольших регионов все еще являются частью маски. Во-вторых, районы, которые принадлежат к антенне, не обязательно может быть полностью подключен. Последнее в основном происходит, если фон имеет примерно такое же свечение в качестве антенны. Для устранения этих артефактов, стандартноеобработки изображений морфологические операции применяются, т.е. сочетание эрозии изображений и расширение, опираясь на стандартные функции Matlab imerode и imdilate соответственно (см. 17 стр. 158-205 для дальнейшего объяснения). После удаления шума процесс антенн гипотезы по-прежнему содержится в ту же маску. Таким образом, в качестве следующего шага двоичной маски для кластерных непересекающихся областей, используя стандартные функции Matlab bwlabel (см. 17 стр. 40-48 для более подробной информации по алгоритму сегментации изображений).
  4. Количество пикселей на кластер считается и двух крупнейших кластеров выбран. Центр тяжести рассчитывают провести различие между левой и правой антенны (рис. 1D).
  5. Усиков наконечник для каждой антенны может быть определен как пиксель в кластере с наибольшим значением в проксимальных к дистальным направлении (см. рисунок 1D).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

В следующем эксперименте мы изучали, как влияет на тактильные обучения усиков поведение выборки в мед пчелами. Для этого мы следили за движением кончика антенны в наивным и кондиционером пчел до и во время презентации тактильных стимулов.

Во-первых, спонтанные движения усиков группы пыльца комбайны (N = 42) был записан в течение 1 мин. Одна половина пчел (N = 21), затем был обусловлен спаривания в пять раз тактильных стимулов с 30% сахарозы награды. Это был условный группы. Тактильный раздражитель 30 х 50 мм поверхность латуни куб с выгравированным горизонтальной решеткой (λ = 150 мкм). Другая половина пчел (N = 21) не было обусловлено и использовать в качестве наивного группы. Рисунке 2 показаны средние обучения условных групп пчел. Процент условного PER после первой наградой существенно отличается от спонтанного поведения (рис. 2 3-го награду.

После этого движение кончика антенны в обеих условных и наивных группы был записан еще в течение 1 мин в присутствии тактильных стимулов Рисунок 3 1 -. B 2 показано распределение усиков мест чаевые в обеих группах, до и во время презентации из тактильных объектов. И, наивный и условные группы изменили свои усиков картина движения в присутствии тактильных стимулов по сравнению с спонтанное поведение. Вероятность того, что усиков наконечник для поиска и / или образец область стимул значительно увеличивается, если стимул был настоящим, показывая, что тактильные выборка включает в себя заметное изменение в усиков картина движения по сравнению со спонтанным движением усиков. Это справедливо для обеих групп пчел (рис. 3 C 1 и C (рис. 3 C 1 и C 2, Mann-Whitney U тест, P <0,05; не было никакого существенного различия между двумя отчетных периодов на рисунке 3C). Таким образом, тактильные кондиционирования приводит к увеличению активного движения усиков около объекта и тактильные выборки поверхности объекта, как было показано ранее в Erber (2012) 18. По сравнению с наивным группы, пространственное распределение во время предъявления стимула была намного более гладкой после кондиционирования (сравните рис 3 B 1 и B 2).

Таким образом, результаты этого эксперимента показывают, что медоносные пчелы могут быть обучены эффективно реагировать на тактильный раздражитель, и что тактильные обучения сопровождается ростом активе поиска и отбора проб поведение.

Рисунок 1
На рис. 1 Запись видео и усиков процедуры отслеживания. Сверху вниз фиксированной пчел и тактильных стимулов. Тактильный стимул расположена в передней части головы фиксированной пчела с окклюзии глаз. Он расположен в усиков рабочий диапазон. д и р указывают на дистальных и проксимальных мест по отношению к животным B:. Вид сбоку же пчелы и тактильных стимулов. Поверхность тактильных стимулов и глава пчел (синий пунктир) параллельны друг другу C:. Отличительные перемещения пикселов из статических пикселей в видео последовательности. Вычитая каждого изображения от фона модель позволяет идентифицировать движущиеся части, т. е.ntennae. Фиксированные глава пчел и тактильных стимулов (указанные здесь, как красная пунктирная линия) являются статическими и не видны после вычитания D:. Определение левой и правой, и усиков чаевых. Два крупнейших пикселей кластеров после вычитания определены как антенны. Расчет центр тяжести позволяет различий между левой (красной) и правой (зеленый) антенны. Усиков наконечник для каждой антенны (черный крест) может быть определена как пиксель в кластере с наибольшим значением в дистальном направлении.

Рисунок 2
Рисунок 2. Кривая обучения тактильных PER кондиционирования. Пыльца комбайны были обучены с помощью пяти пар из CS (тактильный раздражитель) и США (раствор сахарозы) с между судом интервалом 5 мин. Процент положительных ответов из 21 животных построены для спонтанного поведения (SPONT) и DuКольцо презентации CS после каждого кондиционирования суда. Процент PER наблюдается после первого и всех последующих награды существенно отличается от спонтанного поведения (точный критерий Фишера вероятности, р <0,001).

Рисунок 3
Рисунок 3. Нормализованных средних распределений усиков кончика в период 1 мин. Усиков распределения конце каждого пчела была нормирована на общее количество точек данных на одно животное. Панели показывают результаты наивные (слева, N = 21) и кондиционером пчел (справа, N = 21) до (А) и во время предъявления стимула (B) A 1 и A 2. Спонтанные движения усиков до предъявления стимула. По оси абсцисс показывает боковое положение кончика антенны по отношению к гоэлектронной центре головы (сравните с рис 1С и D). Ординат дистального положения антенны чаевых. Цветовая шкала показывает процент времени, усиков чаевые провел в любом месте. Запись течение 1 мин была эквивалентна 3000 видеокадры B 1 и B 2. То же, что в 1,2, но во время предъявления стимула C 1 и C 2. Среднее количество кадров, в которых усиков игла находится внутри площадь объекта, т. е. ± 3 бункеров дистального или проксимального по отношению к стимулы поверхности. C1: наивные групп; C2: кондиционер группе. В коробке-усами показать средний, средний, квартили, и 5-95% процентиль диапазона количество кадров в минуту. В обеих группах пчел, есть существенная разница между "нет стимула» () и «с стимула" (B, C; Уилкоксона-рангового критерия, C 1: P = 5,39 * 10 -4; C 2 -5). Среднее количество кадров при тактильных стимулов презентации значительно больше условных пчел, чем в наивной пчел (Mann-Whitney U-тест, C 1 - C 2: P = 0,007). Нажмите, чтобы увеличить показатель .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Подготовка пчел: сбор и фиксация пчел должно быть сделано быстро, с тем чтобы сохранить уровень стресса животных низка. Стресс влияет на PER-отзывчивость и, следовательно, может иметь косвенное влияние на производительность в обучении пчел 19, 20. Уровень стресса может быть уменьшен путем размещения стеклянные флаконы с пчелами прямо на лед сразу после сбора, чтобы обездвижить их быстро. Следует учитывать, что пчелы нужно больше времени, чтобы восстановиться больше анестезии период раньше.

Видение оказывает негативное влияние на тактильные обучение у пчел 18. Поэтому важно, чтобы закрывать видение картины глаза животного. В целях повышения визуальной контрастности видеозаписей, рекомендуется использовать белую краску (например, Tipp-Ex). Следует проявлять осторожность, чтобы не получить антенн в контакте с краской.

Учитьсяния производительности: Бывший исследования в лабораторных и полевых условиях показала, что сахароза чувствительность комбайны пчелиного меда влияет на их ассоциативные способности к обучению 21, 22. Высокая чувствительность сахарозы положительно коррелирует с лучшей тактильной приобретение и дискриминации выступления. Пыльца комбайны колонии пчел в среднем более чутко реагировать на сахарозу, чем нектар комбайны в большинстве недели кормления сезон 23. Они могут быть легко идентифицированы пыльцы нагрузки на задние ноги и поймал в улье вход. Нектар комбайны с высокой чувствительностью сахарозы может быть пойман в конце кормления сезона, в период с сентября по октябрь. Они могут быть выбраны на искусственной подачи заполненных низкой концентрацией сахара вода помещается примерно в 20 м от улья 23.

Изучение эффективности и формирования памяти сильно зависит от насыщения состояние пчел во время выдержки 25. Больше голода период до кондиционирование, например, на ночь, может улучшить ассоциативное поведение обучения и повышения мотивации уровня животного.

Тактильные кондиционирования: PER используется в качестве безусловного рефлекса в обучении аппетит протокола 14. Поэтому очень важно, чтобы все испытания пчелы проявляют полностью выдвинутом PER на безусловный раздражитель (стимул сахар) перед кондиционером. Пчелы, которые не реагируют на сахар стимул должен быть отброшен, а также пчел, которые отвечают PER во время усиков контакта с тактильным раздражителем перед кондиционером. В противном случае крайне низкой или очень высокой оперативности этих животных посрамить обучения.

Тактильных стимулов, используемых в этом протоколе (латунь куб с горизонтальными решетками) был случайно выбранной. Медоносные пчелы также может быть обусловлено различными тактильных раздражителей с различными формами и текстурами (см. 10).

Для сравнения приобретения в различных группах пчел (например, пыльцы по сравнению комбайны нектар), приобретение оценка может быть вычислена 21. Эта оценка общего количества условных ответах на CS и имеет диапазон от 0 (нет обусловлена ​​PER) и 5 ​​(обусловлено PER после каждого кондиционирования судебное разбирательство).

Видео анализ: Различные видео анализов методы были использованы в прошлом количественной оценки изменений в поведении усиков движения в мед пчелами 26, 27. Наш метод имеет то преимущество, анализ движения усиков, не требуя отражающих маркеров на антеннах и выгоды от разнообразных инструментов обработки изображений в Matlab. В качестве примера, можно также проанализировать сроки АнтеннАль контакты отношению к объекту, определить скорость движения усиков, рассчитать углового положения антенны по отношению к оси тела или различия между левым и правым усиков движения.

PER, который происходит во время записи усиков ответ на объекте в условных пчелы могут помешать спустя с автоматического обнаружения антенн. В этом случае необходимо отредактировать фильм, например, в VirtualDub, и, чтобы скрыть объект, который вмешивается в процесс обнаружения, например, покрывая раздел, где появляется хоботок с серым слоем такой же формы.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Нет конфликта интересов объявлены.

Acknowledgments

Мы благодарим Joachim Erber для введения нас к тактильным парадигму обучения в мед пчелами. Эта работа была поддержана кластера передового опыта 277 CITEC, финансируемых в рамках немецкой инициативы Excellence.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Pollen foragers, Apis mellifera L. Private hives
Glass vials (22 x 45 mm) Carl Roth GmbH Co X655.1
Brass tubes, 10 x 30 mm Self-produced
Brass cube, 3 x 5 mm Self-produced
Tipp-Ex (solvent-free) Tipp-Ex GmbH Co KG
Sucrose solution (30%) Household suger diluted in water
Ethanol (70%) Carl Roth GmbH Co 9065.3
Syringe (1 ml) and needle (0.6 x 25) Carl Roth GmbH Co 59.1
Stop Watch Carl Roth GmbH Co L423.1
Micromanipulator Märzhäuser MM33 00-42-101-0000
Digital video camera Basler A602f-2
Macro lens for camera TechSpec VZM 200
Matlab R2009b The MathWorks

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Page, R. E., Scheiner, R., Erber, J., Amdam, G. V. The development and evolution of division of labor and foraging specialization in a social insect (Apis mellifera L.). Curr. Top. Dev. Biol. 74, 253-286 (2006).
  2. Menzel, R., Müller, U. Learning and memory in honeybees: From behavior to neural substrates. Annu. Rev. Neurosci. 19, 379-404 (1996).
  3. Seeley, T. D. The wisdom of the hive. Harvard University Press. Cambridge Mass, London. (1995).
  4. Staudacher, E., Gebhardt, M. J., Dürr, V. Antennal movements and mechanoreception: neurobiology of active tactile sensors. Adv. Insect Physiol. 32, 49-205 (2005).
  5. Martin, H., Lindauer, M. Sinnesphysiologische Leistungen beim Wabenbau der Honigbiene. Z. Vergl. Physiol. 53, 372-404 (1966).
  6. Kevan, P. G. Texture sensitivity in the life of honeybees. Neurobiology and behavior of honeybees. Menzel, R., Mercer, A. Springer Verlag. Berlin, Heidelberg, New York. 96-101 (1987).
  7. von Frisch, K. Tanzsprache und Orientierung der Bienen. Springer Verlag. Berlin, Heidelberg, New York. (1965).
  8. Waser, N. M. Flower constancy: definition, cause, and ceasurement. Am. Nat. 127, 593-603 (1986).
  9. Kevan, P. G., Lane, M. A. Flower petal microtexture is a tactile cue for bees. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 82, 4750-4752 (1985).
  10. Erber, J., Kierzek, S., Sander, E., Grandy, K. Tactile learning in the honeybee. J. Comp. Physiol. A. 183, 737-744 (1998).
  11. Kisch, J., Erber, J. Operant conditioning of antennal movements in the honey bee. Behav. Brain. Res. 99, 93-102 (1999).
  12. Scheiner, R., Erber, J., Page, R. E. Tactile learning and the individual evaluation of the reward in honey bees (Apis mellifera L.). J. Comp. Physiol. A. 185, 1-10 (1999).
  13. Erber, J., Scheiner, R. Honeybee learning. Encyclopedia of Neuroscience. Adelman, G., Smith, B. Elsevier. (2004).
  14. Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schäfer, S. Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera). J. Comp. Psychol. 97, 107-119 (1983).
  15. Dacher, M., Gauthier, M. Involvement of NO-synthase and nicotinic receptors in learning in the honey bee. Physiol. Behav. 95, 200-207 (2008).
  16. Camera Calibration Toolbox for Matlab [Internet]. Available from: http://www.vision.caltech.edu/bouguetj/calib_doc (2004).
  17. Haralick, R. M., Shapiro, L. G. Computer and Robot Vision. I, Addison-Wesley. Reading, Mass. (1992).
  18. Erber, J. Tactile antennal learning in the honey bee. Honeybee Neurobiology and Behavior. Galizia, C. G., et al. Springer Verlag. 439-455 (2012).
  19. Pankiw, T., Page, R. E. Effect of pheromones, hormones, and handling on sucrose response thresholds of honey bees (Apis mellifera L.). J. Comp. Physiol. A. 189, 675-684 (2003).
  20. Harris, J. W., Woodring, J. Effects of stress, age, season and source colony on levels of octopamine, dopamine and serotonine in the honey bee (Apis mellifera L.) brain. J. Insect. Physiol. 38, 29-35 (1992).
  21. Scheiner, R., Kuritz-Kaiser, A., Menzel, R., Erber, J. Sensory responsiveness and the effects of equal subjective rewards on tactile learning and memory of honeybees. Learn. Mem. 12, 626-635 (2005).
  22. Mujagic, S., Sarkander, J., Erber, B., Erber, J. Sucrose acceptance and different forms of associative learning of the honey bee (Apis mellifera L.) in the field and laboratory. Front. Behav. Neurosci. 4, 46 (2010).
  23. Scheiner, R., Barnert, M., Erber, J. Variation in water and sucrose responsiveness during the foraging season affects proboscis extension learning in honey bees. Apidologie. 34, 67-72 (2003).
  24. Mujagic, S., Erber, J. Sucrose acceptance, discrimination and proboscis responses of honey bees (Apis mellifera L.) in the field and the laboratory. J. Comp. Physiol. A. 195, 325-339 (2009).
  25. Friedrich, A., Thomas, U., Müller, U. Learning at different satiation levels reveals parallel functions for the cAMP-protein kinase A cascade in formation of long-term memory. J. Neurosci. 24, 4460-4468 (2004).
  26. Erber, J., Pribbenow, B., Grandy, K., Kierzek, S. Tactile motor learning in the antennal system of the honeybee (Apis mellifera L.). J. Comp. Physiol. A. 181, 355-365 (1997).
  27. Lambin, M., Déglise, P., Gauthier, M. Antennal movements as indicators of odor detection by worker honeybees. Apidologie. 36, 119-126 (2005).

Comments

1 Comment

  1. can this protocol apply in other kinds of stimulus,such as vision cues or sound?

    Reply
    Posted by: Hong en T.
    April 26, 2014 - 12:54 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics