Dokunsal İklimlendirme Ve Bal Arısı yılında antennal Örnekleme Stratejileri Hareket Analizi (

Neuroscience

Your institution must subscribe to JoVE's Neuroscience section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Bu protokolü biz durumu dokunsal uyaranlara karşı bal arıları koşulmuş ve ince çaplı anten örnekleme deseni kinematik analiz için bir 2B hareket yakalama tekniği tanıtmak nasıl gösterir.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Mujagić, S., Würth, S. M., Hellbach, S., Dürr, V. Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees (Apis mellifera L.). J. Vis. Exp. (70), e50179, doi:10.3791/50179 (2012).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Bal arıları (Apis mellifera L.) eusocial böcekler ve iyi işçilik ve çağrışımsal öğrenme yeteneği 1, 2 kendi karmaşık bir bölümü için bilinir. Onlar larva hemşirelik veya düzenli altıgen yemek için tarak (örneğin polen veya nektar) ve yavru 3 bina nerede işçi arılar, karanlık kovan içinde kendi yaşamının ilk yarısını harcamak. Antenler olağanüstü multisensory duyarga ve kovan bina 5 ve örüntü tanıma 6 dahil olmak üzere çeşitli dokunsal aracılı görevleri 4, çok önemli bir rol oynamaktadır. Daha sonra hayatta, her bir arı yiyecek aramak için kovanı terk eder. Sonra arı, karlı gıda kaynakları ayrımcılık konumlarını ezberlemek ve 7 yuvasını arkadaşları için iletişim öğrenmek zorundadır. Arı besin kaynağının multisensory hafıza oluşturmak üzere petal yüzey 9 renk ve koku veren 7, 8 gibi başka çiçek sinyalleri, ama aynı zamanda dokunsal işaretlerini kullanır. Laboratuvar işbirliği altındaşulları, arılar gibi kenarlarını ya da anten 10, 11, 12, 13 ile oluklar gibi dokunsal nesnenin özellikleri, ayrımcılık bir iştahlı öğrenme paradigması içinde eğitilmiş olabilir. Bu öğrenme paradigma yakından koşulmuş arı 14 hortum uzantı yanıt (başına) klasik koku klima ilgilidir. Laboratuarda dokunsal öğrenme paradigması avantajı anten hareket model analizi de dahil olmak üzere çeşitli fizyolojik ölçümleri ile ilgili öğrenme davranışsal deney birleştirme ihtimalidir.

Protocol

1. Arılar hazırlanması

  1. Bir toplayıcı geziden dönerken Nektarı veya Polen yem bir sükroz besleyici veya doğrudan kovan girişinde ya alanına yakalanmıştır. Her bir arı bir köpük tıkaç ile kapatılmalıdır ve daha işleme için laboratuvar hemen içine alınmış bir cam şişeye yakalanır.
  2. Onlar hareketsizlik ilk işaretleri göstermek ° C kadar laboratuvarda, yakalanan arılar kısaca 4 de buzdolabında soğutulur.
  3. Her tek immobilize arı baş ve toraks arasında ve karın üzerinde yapışkan bant ile küçük bir metal tüp monte edilir. Bakım hortum ve antenler serbestçe hareketli olduğu alınmalıdır.
  4. Vizyon tıkamak için beyaz boya (örneğin solvent içermeyen Tipp-Ex) ile sabit arı bileşik gözleri ve ocelli boyayın.
  5. Kayıtları sırasında baş hareketleri önlemek için baş ve toraks arasında kasete bunu düzeltmek için arı başının arkasına erimiş mum küçük bir damla ekleyin.
  6. Daha iyi belirlenmesi için kaset üzerinde bir sayı ile her bir arı işaretleyin ve dehidratasyonu önlemek için nemli bir atmosfere sabit arı ile tüp yerleştirin.
  7. Bir şırınga ile başvuran 30% sakaroz çözeltisini damlacıkları ile 5 saniye boyunca her bir arı besle ve dokunsal Klima protokolü ile başlamadan önce tüm arılar 30 dk kurtarmanızı sağlar.

2. Dokunsal Şartlandırma

  1. Klima önce, her bir arı antenleri uygulanan% 30 sukroz uyarana hortum uzantısı yanıt (PER) için test edilmelidir. Böylece hortum ucu açık alt çeneleri arasına bir sanal çizgi geçmek zorundadır. Sakaroz uyaran bir PER ile yanıt vermeyen bütün arıların atın.
  2. Dokunsal klima şartlı uyarıcı (CS) gibi bir düz veya bir oyulmuş desen, örneğin, yatay veya 150 mikron dalga boyuna sahip bir ızgara oluşturan dikey oluklar ile bir pirinç küp (örn. 3 x 5 mm), kullanmak için. Fya da koşulsuz uyarıcı (ABD) bir% 30 sukroz çözeltisi (su içinde seyreltilmiş beyaz şeker,) kullanın.
  3. Pirinç küp (CS) Klima işlem sırasında tam konumlandırma sağlamak için (örneğin, Märzhäuser MM33) bir micromanipulator bir tutucuya yerleştirilir. ABD% 30 sukroz solüsyonu ile dolu bir şırınga ile arı sunulmaktadır.
  4. Klima prosedür 5 dk arası bir deneme süresi (ITI) ile dokunsal uyarıcı (CS) ve sakaroz çözeltisi (ABD) beş eşleşmeleri oluşur. Monte edilmiş dokunsal uyarıcı (CS) ile mikromanipülatör önünde bir tek arı yerleştirin. Dokunsal uyaran yüzeyinin arının başında (Şekil 1 A ve B) paralel olacak şekilde yavaşça CS, yerleştirin. Hayvan ve dokunsal nesne arasındaki mesafe test arı antennal çalışma yarıçapı aralığında olmalıdır, arı rahat bir pozisyonda w dokunsal uyaran taramak gerekir yaniITH antenler de. Şekil 1'de gösterilen örnekte, mesafe 3 mm idi. Arı 5 sn için dokunsal uyaran (CS) tarama edelim. Ilk olarak 3 saniye sonra,% 30 sakaroz (ABD) hortum altında bir şırınga ile çözelti bir damlacık sunulmaktadır. Nazikçe hortum artırmak için enjektör ucu kullanın. Hortum altında Sakaroz stimülasyon 15 PER koşulsuz seçmektedirler. Arı sakaroz ödül yalamak için izin ver. Klima sırasında tam olarak ne zaman aralıklarını korumak için bir alarm sinyali ile bir kronometre kullanın.
  5. Klimalı BAŞINA arı öğrenme başarısı için bir ölçü olarak kullanılır. İlk ödüllendirilir eşlendirme sonra, arıların önümüzdeki ödül beklediklerini belirten, kendi burnumun uzantısı CS sunum yanıt başlar. Dokunsal uyaran sunum 3 sn süre penceresi sırasında ve sakkaroz sunum öncesi zaman görülen bir tam genişletilmiş hortum olumlu bir yanıt olarak puanlanmıştır. Hayır yanıtı olumsuz sayılır. OCCPER ve urrence deneyci tarafından unutulmamalıdır. CS sunumu sırasında BAŞINA gösteren arıların yüzdesi her deneme için çizilir.

3. Kinematik Kayıtlar

  1. Tek bir harnessed arı antennal hareketleri uygun bir makro lens (örneğin TechSpec VZM 200 ile donatılmıştır Basler A602f-2, bir yangın tel bağlantısı yoluyla 50 fps'de işletilen) bir dijital video kamera ile kaydedilmiştir. Kamera yukarıdan aşağıya bir görünümde hayvan (Şekil 1 A) üstünde konumlandırılmıştır. Şekil 1'de, kayıtların uzaysal çözünürlüğü 0.02 mm / piksel.
  2. Kameranın objektif altında farklı yönlerde 1 mm'lik bir kenar uzunluğu ile 10 x 10 mm dama tek görüntü kaydederken tarafından kamera kalibre. Kalibrasyon kamera kalibrasyon alet kutusu Matlab 16 ile yapılabilir.
  3. Kamera merceğinin altında bir tek sabit arı yerleştirin. Bir mikromanipülatör sabitlenmiş dokunsal uyaran, sunun, Hayvan için. Dokunsal kurutma için tarif edildiği gibi aynı şekilde devam edin ve arı nesne tararken anten hareketini kaydederler. Bu tam anten çalışma aralığı ve dokunsal uyarı görünür olması önemlidir. Uyaran desen seçenekleri test ve deneme numaraları deneysel tasarım bağlıdır.

4. Veri Analizi

  1. Görüntünün arka plan hesaplama Matlab yapılır. İlk olarak, zaman içinde orta gri skala değeri her bir piksel için hesaplanan gerekmektedir. Statik nesneler, arı ve dokunsal uyaran sabit kafa gibi, görüntü arka planı teşkil edecektir. Hareketli nesneler, iki anten gibi, arka planın parçası olmayacaktır.
  2. Kaydedilen video her bir ardışık kare yüklü olması gerekir, ve akım çerçeve ve resim arka planı arasındaki fark hesaplanarak gerekir. Bu çıkarma sonucu kareden diğerine hareket ediyor görüntünün bölümleri vurgular. Kimlikeally, arı antenleri sıfır değerleri (Şekil 1C) tek alanlardır.
  3. Daha fazla işlem için, sıfır olmayan piksel değerleri ile en büyük iki alanda antenler olduğu varsayılır. Her iki anten için bir ikili maskesi piksel anten ve aksi değeri 0 aitse, her piksel için bir değer 1 içeren oluşturulan olmaktır. Bu maske daha sonra anten ipuçları yerelleştirilmesi için bir temel olarak hizmet vermektedir. Tüm görüntü için ön maske kazandırmak farkı görüntünün her pikselin gri değer önceden tanımlanmış eşik karşılaştırılır. Biz gürültü icabına beri sonradan bu eşiğin oldukça düşük olduğu için tercih edilir. Öncelikle, görüntü gürültü küçük bölgeler nedeniyle halen maskesi parçası vardır: ön maskesi sonra hala hatalar iki çeşit taşır. İkincisi, anten ait alanlar mutlaka tam bağlanmamış olabilir. Arka plan yaklaşık olarak anten ile aynı ışıldama varsa ikincisi çoğunlukla oluşur. Bu eserler ortadan kaldırmak için, standartgörüntü işleme morfolojik işlemi uygulanır, standart Matlab fonksiyonları imerode ve (daha fazla açıklama için 17 pp 158-205 bakınız) sırasıyla imdilate güvenerek, görüntü erozyon ve dilatasyon bir arada yani. Denoising işleminden sonra antenler hipotezler hala aynı maske içinde yer alır. Bu nedenle, bir sonraki adım olarak ikili maske standart Matlab fonksiyonuyla bwlabel (görüntü bölütleme algoritması hakkında daha fazla bilgi için 17 pp 40-48 bakınız) kullanarak ayrık alanlar için kümelenmiştir.
  4. Küme başına piksel sayısı sayılır ve en büyük iki kümesi seçilmektedir. Ağırlık merkezi sol ve sağ anten (Şekil 1B) arasındaki fark olarak hesaplanmıştır.
  5. Her anten için anten ucu proksimal-to-distal yönde (Şekil 1D bakınız) en yüksek değere sahip bir kümede piksel olarak tanımlanabilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Aşağıdaki deneyde görmeyenlerin dokunsal öğrenme bal arıları antennal örnekleme davranışını nasıl etkilediği incelenmiştir. Bunun için, biz önce naif ve klimalı arılar anten ucu ve dokunsal uyaran sunum sırasında hareketi izlenir.

İlk olarak, polen yem bir grup kendiliğinden hareket anten (N = 42) 1 dakika boyunca kaydedildi. Arıların yarısı (N = 21) daha sonra beş kez% 30 sakaroz ödül ile dokunsal uyaran eşleştirme tarafından şartlandırılmış oldu. Bu klimalı grup oldu. Dokunsal uyaran bir oyulmuş yatay ızgara (λ = 150 mikron) ile bir pirinç küp 30 x 50 mm yüzey oldu. Arıların diğer yarısı (N = 21) klimalıdır ve naif grubu olarak kullanılmıştır. Şekil 2 arıların klimalı grubunun ortalama öğrenme eğrisi gösterir değildi. Birinci ödül sonra BAŞINA şartlı yüzdesi kendiliğinden davranış (Şekil 2 önemli ölçüde farklı olduğu 3. ödül sonra doygunluk gösterir.

Daha sonra şartlı ve naif grubunda bulunan anten ucunun hareket dokunsal uyarıcı varlığında, 1 dakika boyunca tekrar kaydedilmiştir Şekil 3, bir 1 -. B 2 her iki grupta da anten uç yerlerinin dağıtım gösterir, ve daha önce sunum esnasında dokunsal nesne. , Naif ve klimalı grup Hem spontan davranış kıyasla dokunsal uyaranın varlığında kendi anten hareket deseni değişti. Uyaranın varlığında ise arama ve / veya numune uyarıcı alana anten ucu olasılığını önemli ölçüde bu dokunsal örnekleme spontan anten hareketi ile karşılaştırıldığında anten hareketi desen belirgin bir değişiklik içerir gösteren artar. Bu, her iki grupta da arı (Şekil 3 C 1 ve C için de geçerlidir (Şekil 3 C 1 ve C 2, Mann-Whitney U testi, p <0.05 uyaran alanında kendi anten ucu ile önemli ölçüde daha fazla zaman geçirdim; ikisi arasında anlamlı bir fark yoktu Referans dönemleri Şekil 3C A). Böylece, dokunsal klima nesne ve benzeri gibi önceden Erber 'de gösterilen eşyanın yüzeyi dokunsal örnekleme (2012) 18 yakın aktif anten hareketinin bir artışa yol açar. Naif grubu ile karşılaştırıldığında, uyaran sunum sırasında mekansal dağılımı (Şekil 3 B 1 ve B 2 karşılaştır) Klima sonra çok daha yumuşak oldu.

Özetle, bu deney show sonuçlar bal arılarını dokunsal uyaranlara cevap vermeye çok etkili eğitilmiş olabilir, ve dokunsal öğrenme artan acti eşlik ediyorve arama ve davranış örnekleme.

Şekil 1
. Şekil 1 Video kayıt ve anten izleme prosedürü A:. Sabit bir arı ve dokunsal uyaran Yukarıdan aşağı görünüm. Dokunsal uyaran tıkalı gözleri sabit arının kafası önünde konumlandırılmış. Bu çalışma aralığı anten içinde yer almaktadır. d ve p hayvan göreli distal ve proksimal yerle gösterir B:. aynı arı ve dokunsal uyaran yan görünümü. Dokunsal uyaran ve arı (mavi noktalı çizgiler) başkanı yüzeyi birbirine paralel C:. Bir video sekansında statik piksel ayrımı hareketli piksel. Bir arka plan modeli Her bir görüntü çıkarma sağlayan hareketli parça, yani bir belirlenmesintennae. . Arı ve dokunsal uyaran (kırmızı noktalı çizgiler olarak burada belirtilir) sabit kafa çıkarma sonra D statik ve görünür değildir: sol ve sağ ve anten ucu tanımlama. Çıkarma sonra büyük iki piksel kümeleri anten olarak tanımlanır. Ağırlık merkezi hesaplanması sol (kırmızı) ve sağ (yeşil) anten arasında ayrım izin verir. Her bir anten (siyah çapraz) için anten distal ucu yönünde en büyük değere sahip bir küme içinde piksel olarak tanımlanabilir.

Şekil 2,
Şekil 2. Dokunsal BAŞINA klima Öğrenme eğrisi. Polen toplayıcılar 5 dakika arası bir deneme aralığı ile CS (dokunsal uyaran) ve ABD (sakaroz çözeltisini) beş eşlendirme kullanılarak eğitilmiştir. 21 hayvanların pozitif cevapların yüzdesi spontan davranış (spontane) ve du için çizilenHer klima yargılamadan sonra CS halka sunumu. Ilk ve sonraki tüm ödülleri spontan davranış (Fisher kesin olasılık testi, p <0.001) önemli ölçüde farklı olduğu sonra BAŞINA yüzdesi gözlenmiştir.

Şekil 3
Şekil 3. 1 dakikalık bir süre boyunca anten ucu konumu Normalize ortalama dağılımları. Her arı anten ucu dağıtım hayvan başına veri noktalarının sayısını normalize edildi. Panelleri naif (sol, N = 21) ve klimalı arılar sonuçlarını göstermek (sağ, N = 21) daha önce (A) ve uyaran sunum (B) sırasında A 1 ve A 2:. Uyaran sunum öncesi spontan anten hareketi. Apsis inci göreli anten ucunun lateral pozisyon gösterirkafa e merkezi (Şekil 1C ve D ile karşılaştırın). Ordinat anten ucu distal pozisyonunu gösterir. Renk skalası anten ucu herhangi bir yerde harcanan zaman yüzdesini gösterir. . 1 dk kayıt süresi B 1 ve B 2 3,000 video kareleri eşdeğer: A 1,2 olarak, ama aynı uyaran sunum sırasında C 1 ve C 2:. Anten ucu içinde bulunan edildiği kare ortalama sayısı nesne alanına, yani uyaran yüzeye distal veya proksimal göreli ± 3 bidon. C1: naif grubu; C2: Klimalı grubu. Box-whisker grafikleri medyan, ortalama, çeyreklik ve dakika başına düşen kare sayısının% 5-95 persentil aralıkları göstermektedir. P = 5.39 * 10 -4; C 2: Wilcoxon signed rank testi, C 1, arıların her iki grupta da, 'hiçbir uyaran' (A) ve 'uyaran' (B, C, arasında anlamlı bir fark yoktur -5). Dokunsal uyaran sunum sırasında kare ortalama sayısı naif arılar (Mann-Whitney U testi, C 1 - C 2: P = 0.007) daha Klimalı arılar anlamlı büyüktür. büyük bir rakam görmek için buraya tıklayın .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Arı hazırlanması: Toplama ve arı hayvan düşük gerilme düzeyini sağlamak için, hızlı bir şekilde yapılmalıdır sabitleme. Stres PER-yanıt üzerinde bir etkisi vardır ve bu nedenle, arılar 19, 20 öğrenme performansı üzerinde dolaylı bir etkisi olabilir. Stres düzeyini hızlı bir şekilde hareketsiz alındıktan hemen sonra doğrudan buz üzerinde arılar ile cam şişe yerleştirerek azaltılabilir. Arılara anestezi öncesi dönemde olduğu uzun kurtarmak için daha fazla zamana ihtiyacı dikkate alınmalıdır.

Vizyon arılar 18 dokunsal öğrenme üzerinde olumsuz bir etkiye sahiptir. Bu nedenle, hayvan tarafından gözlerinin boyama görme tıkamak için önemlidir. Video kayıtlarının görsel kontrastı artırmak için, bu (örneğin, Tipp-Ex) beyaz boya kullanmanız önerilir. Bakım boya ile temas antenleri için özen gösterilmelidir.

Öğrenmeking performans: laboratuar ve sahada Eski çalışmalarda bal arısı yem sükroz hassasiyeti onların ilişkisel öğrenme yeteneği 21, 22 etkilediğini gösterdi. Yüksek sakkaroz hassasiyet olumlu iyi dokunsal edinimi ve ayrımcılık performansları ile ilişkilidir. Bir bal arısı kolonisinin Polen yem ortalama bir toplayıcı sezon 23 en çok hafta içinde nektar toplayıcılar daha sakaroz daha duyarlı. Onlar kolayca kendi arka ayakları üzerinde polen yükleri tarafından belirlenen ve kovan girişinde yakalandı. Yüksek sukroz hassasiyet Nektarı toplayıcılar Eylül ve Ekim ayları arasında, bir toplayıcı sezon sonunda yakalandı. Bu kovan 23 dan yaklaşık 20 m yerleştirilen, düşük konsantre şeker su ile dolu yapay besleyiciler üzerinde seçilebilir.

Öğrenme performansı ve bellek oluşumu klima 25 sırasında bir arının doyma durumunu kuvvetlice bağlıdır. Daha uzun bir açlık period klima önce, örneğin bir gecede, çağrışımlı öğrenme davranışı geliştirmek ve bir hayvanın motivasyon düzeyini artırabilir.

Tactile koşullandırma: başına bir iştah açıcı öğrenme protokol 14 koşulsuz yanıt olarak kullanılır. Bu nedenle, test edilen tüm arıların tam klima önce koşulsuz uyaran (şeker uyaran) PER genişletilmiş gösteren çok önemlidir. Şeker uyarana yanıt vermeyen Arılar klima önce dokunsal uyaran ile anten teması sırasında bir BAŞINA ile yanıt arılar yanı sıra atılmalıdır. Aksi takdirde, bu hayvanların aşırı düşük veya aşırı yüksek tepki öğrenme eğrisi bulandırabilir olacaktır.

Bu protokolde kullanılan dokunsal uyaran (yatay kafesler pirinç küp) rastgele seçildi. Bal arıları da çeşitli şekil ve dokular (10) ile farklı dokunsal uyaranlara şartına edilebilecek.

Arılar farklı gruplar (örneğin Polen-versus Nektarı yem) olarak iktisap karşılaştırmak için bir kazanım skoru 21 hesaplanabilir. Bu skor CS klimalı yanıtların toplam sayısı ve 0 (PER klimalı) ve 5 (her klima deneme sonrasında PER şartlandırılmış) arasında bir menzile sahiptir.

Video analiz: Farklı video analiz yöntemleri bal arıları 26, 27 anten hareketi davranış değişiklikleri ölçmek için geçmişte kullanılmıştır. Bizim yöntem Matlab görüntü işleme araçları çeşitli anten ve faydaları üzerine yansıtıcı belirteçler gerektirmeden antennal hareketlerini analiz etme avantajına sahiptir. Bir örnek olarak, bir tane de antenn bir zamanlama analiz edebilirBir nesneyi doğru ark kontaklar, anten hareket hızını belirlemek, vücut ekseni referans anten açısal pozisyonları hesaplamak ya da sol ve sağ anten hareketi arasındaki ayrım.

Klimalı arılar nesneye antennal yanıtı kayıt sırasında oluşan bir PER anten otomatik algılama ile daha olumsuz etkileyebilir. Bu durumda VirtualDub, örneğin film, düzenlemek ve hortum aynı şeklin gri bir tabaka ile görüntülenir bölümü kapsayan örneğin algılama süreci, müdahale nesnesini maskelemek için gereklidir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Çıkar çatışması ilan etti.

Acknowledgments

Biz bal arıları dokunsal öğrenme paradigması bize tanıtmak için Joachim Erber ederim. Bu eser Alman Mükemmeliyet Girişimi çerçevesinde finanse Mükemmellik 277 CITEC arasında Küme tarafından desteklenmiştir.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Pollen foragers, Apis mellifera L. Private hives
Glass vials (22 x 45 mm) Carl Roth GmbH Co X655.1
Brass tubes, 10 x 30 mm Self-produced
Brass cube, 3 x 5 mm Self-produced
Tipp-Ex (solvent-free) Tipp-Ex GmbH Co KG
Sucrose solution (30%) Household suger diluted in water
Ethanol (70%) Carl Roth GmbH Co 9065.3
Syringe (1 ml) and needle (0.6 x 25) Carl Roth GmbH Co 59.1
Stop Watch Carl Roth GmbH Co L423.1
Micromanipulator Märzhäuser MM33 00-42-101-0000
Digital video camera Basler A602f-2
Macro lens for camera TechSpec VZM 200
Matlab R2009b The MathWorks

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Page, R. E., Scheiner, R., Erber, J., Amdam, G. V. The development and evolution of division of labor and foraging specialization in a social insect (Apis mellifera L.). Curr. Top. Dev. Biol. 74, 253-286 (2006).
  2. Menzel, R., Müller, U. Learning and memory in honeybees: From behavior to neural substrates. Annu. Rev. Neurosci. 19, 379-404 (1996).
  3. Seeley, T. D. The wisdom of the hive. Harvard University Press. Cambridge Mass, London. (1995).
  4. Staudacher, E., Gebhardt, M. J., Dürr, V. Antennal movements and mechanoreception: neurobiology of active tactile sensors. Adv. Insect Physiol. 32, 49-205 (2005).
  5. Martin, H., Lindauer, M. Sinnesphysiologische Leistungen beim Wabenbau der Honigbiene. Z. Vergl. Physiol. 53, 372-404 (1966).
  6. Kevan, P. G. Texture sensitivity in the life of honeybees. Neurobiology and behavior of honeybees. Menzel, R., Mercer, A. Springer Verlag. Berlin, Heidelberg, New York. 96-101 (1987).
  7. von Frisch, K. Tanzsprache und Orientierung der Bienen. Springer Verlag. Berlin, Heidelberg, New York. (1965).
  8. Waser, N. M. Flower constancy: definition, cause, and ceasurement. Am. Nat. 127, 593-603 (1986).
  9. Kevan, P. G., Lane, M. A. Flower petal microtexture is a tactile cue for bees. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 82, 4750-4752 (1985).
  10. Erber, J., Kierzek, S., Sander, E., Grandy, K. Tactile learning in the honeybee. J. Comp. Physiol. A. 183, 737-744 (1998).
  11. Kisch, J., Erber, J. Operant conditioning of antennal movements in the honey bee. Behav. Brain. Res. 99, 93-102 (1999).
  12. Scheiner, R., Erber, J., Page, R. E. Tactile learning and the individual evaluation of the reward in honey bees (Apis mellifera L.). J. Comp. Physiol. A. 185, 1-10 (1999).
  13. Erber, J., Scheiner, R. Honeybee learning. Encyclopedia of Neuroscience. Adelman, G., Smith, B. Elsevier. (2004).
  14. Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schäfer, S. Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera). J. Comp. Psychol. 97, 107-119 (1983).
  15. Dacher, M., Gauthier, M. Involvement of NO-synthase and nicotinic receptors in learning in the honey bee. Physiol. Behav. 95, 200-207 (2008).
  16. Camera Calibration Toolbox for Matlab [Internet]. Available from: http://www.vision.caltech.edu/bouguetj/calib_doc (2004).
  17. Haralick, R. M., Shapiro, L. G. Computer and Robot Vision. I, Addison-Wesley. Reading, Mass. (1992).
  18. Erber, J. Tactile antennal learning in the honey bee. Honeybee Neurobiology and Behavior. Galizia, C. G., et al. Springer Verlag. 439-455 (2012).
  19. Pankiw, T., Page, R. E. Effect of pheromones, hormones, and handling on sucrose response thresholds of honey bees (Apis mellifera L.). J. Comp. Physiol. A. 189, 675-684 (2003).
  20. Harris, J. W., Woodring, J. Effects of stress, age, season and source colony on levels of octopamine, dopamine and serotonine in the honey bee (Apis mellifera L.) brain. J. Insect. Physiol. 38, 29-35 (1992).
  21. Scheiner, R., Kuritz-Kaiser, A., Menzel, R., Erber, J. Sensory responsiveness and the effects of equal subjective rewards on tactile learning and memory of honeybees. Learn. Mem. 12, 626-635 (2005).
  22. Mujagic, S., Sarkander, J., Erber, B., Erber, J. Sucrose acceptance and different forms of associative learning of the honey bee (Apis mellifera L.) in the field and laboratory. Front. Behav. Neurosci. 4, 46 (2010).
  23. Scheiner, R., Barnert, M., Erber, J. Variation in water and sucrose responsiveness during the foraging season affects proboscis extension learning in honey bees. Apidologie. 34, 67-72 (2003).
  24. Mujagic, S., Erber, J. Sucrose acceptance, discrimination and proboscis responses of honey bees (Apis mellifera L.) in the field and the laboratory. J. Comp. Physiol. A. 195, 325-339 (2009).
  25. Friedrich, A., Thomas, U., Müller, U. Learning at different satiation levels reveals parallel functions for the cAMP-protein kinase A cascade in formation of long-term memory. J. Neurosci. 24, 4460-4468 (2004).
  26. Erber, J., Pribbenow, B., Grandy, K., Kierzek, S. Tactile motor learning in the antennal system of the honeybee (Apis mellifera L.). J. Comp. Physiol. A. 181, 355-365 (1997).
  27. Lambin, M., Déglise, P., Gauthier, M. Antennal movements as indicators of odor detection by worker honeybees. Apidologie. 36, 119-126 (2005).

Comments

1 Comment

  1. can this protocol apply in other kinds of stimulus,such as vision cues or sound?

    Reply
    Posted by: Hong en T.
    April 26, 2014 - 12:54 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics