באמצעות ערכת הנפשה של FishSim הכלים לחקור התנהגות דגים: חקר מקרה על חבר-הבחירה העתקה של מפרש Mollies

Behavior

Your institution must subscribe to JoVE's Behavior section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

שימוש של ערכת הנפשה הרומן ' FishSim הכלים, נציג עבור פולשני מניפולציה חזותי של מידע ציבורי פרוטוקול בהקשר של חבר-הבחירה העתקה של מפרש mollies. FishSim ערכת הכלים אנימציה מספק מסגרת נוחה לשימוש עבור עיצוב, אנימציה, מצגת של דגים ממוחשבים גירויים לניסויים התנהגותיים עם מבחן חי דג.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Gierszewski, S., Baker, D., Müller, K., Hütwohl, J. M., Kuhnert, K. D., Witte, K. Using the FishSim Animation Toolchain to Investigate Fish Behavior: A Case Study on Mate-Choice Copying In Sailfin Mollies. J. Vis. Exp. (141), e58435, doi:10.3791/58435 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

במהלך העשור האחרון, העסקת המחשב הנפשות למחקר התנהגות בעלי חיים גדל עקב יכולתה לא פולשני לתפעל את המראה וההתנהגות של גירויים חזותיים, לעומת מניפולציה בעלי חיים. כאן, אנו מציגים את FishSim אנימציה ערכת הכלים, מסגרת תוכנה שפותחה כדי לספק לחוקרים שיטה קלה לשימוש עבור יישום מחשב 3D אנימציות בניסויים התנהגותיים עם דגים. ערכת הכלים מציע תבניות כדי ליצור גירויים וירטואליים תלת-ממד של חמישה מינים של דגים שונים. גירויים ניתנות להתאמה אישית במראה והן גודל, המבוסס על תמונות שצולמו של דגים חיים. גירויים מרובים יכולים להיות אנימציה ע י הקלטת בריכות שחיה בסביבה וירטואלית באמצעות בקר משחק וידאו. כדי להגדיל האחדה של ההתנהגות מדומה, הנתיב שחייה מוקלטת מראש עשויה להיות שיחזר עם גירויים שונים. מספר הנפשות מאוחר יותר להיות מאורגן לפי רשימות השמעה, שהוצגו על המסכים במהלך ניסויים עם דג חי.

בחקר מקרה עם מפרש mollies (מולי latipinna), אנו מספקים פרוטוקול על איך לערוך ניסוי העתקה של חבר-בחירה עם FishSim. אנחנו מנוצל בשיטה זו כדי ליצור ולהנפיש וירטואלי זכרים ונקבות מודל וירטואלי, ולאחר מכן מוצג אלו לחיות נקבות מוקד ניסוי בחירה בינארית. התוצאות שלנו להפגין הנפשה ממוחשבת, עשוי לשמש כדי לדמות הדגים וירטואלי בניסוי העתקה חבר-הבחירה כדי לחקור את התפקיד של נקבה כתמים gravid כאינדיקציה לאיכות נקבה דגם חבר-הבחירה העתקת.

יישום שיטה זו אינה מוגבלת ניסויים העתקה חבר-הבחירה אך ניתן להשתמש בעיצובים שונים ניסיוני. עדיין, שימושיות שלו משתנה בהתאם ליכולות חזותי של המין המחקר, קודם צריך אימות. בסך הכל, אנימציות מחשב מציעים רמה גבוהה של שליטה ואת האחדתו בניסויים, לשאת את הפוטנציאל 'להקטין', 'החלף' חיות גירוי בשידור חי גם לגבי 'צמצום' בצרות.

Introduction

לאחרונה, ניצול טכניקות מודרניות עבור היצירה של הגירויים מלאכותיים, כגון אנימציות מחשב ומציאות מדומה, צברה פופולאריות, מחקר1. שיטות אלה מספקים מספר יתרונות לעומת גישות ניסיוניות קלאסי עם גירוי בשידור חי-חיות-1,-2. הנפשה ממוחשבת מאפשרת טיפול פולשני של הופעה (גודל, צבע) וההתנהגות של גירוי וירטואלי בהמות המשמשות בניסויים. לדוגמה, הסרה כירורגית של החרב זנב החרב הירוקה זכר (סייפן helleri) כדי לבדוק את העדפות חבר נקבות3 היה להיות מיותרים באמצעות הנפשה ממוחשבת במחקר מאוחר יותר על זה מינים4. יתר על כן, אנימציות מחשב יכול ליצור פנוטיפים זה רק לעתים רחוקות הם נתקלו הטבע5. תכוניות מורפולוגיות של בעלי חיים וירטואליים עשויים להשתנות אפילו מעבר לטווח הטבעי של המין הזה4. במיוחד, מניפולציה שיטתית אפשרי של התנהגות הוא אחד היתרונות של הנפשה ממוחשבת, שכן זה כמעט בלתי אפשרי עם בעלי חיים6,7.

טכניקות שונות קיימים עד היום ליצירת אנימציות מחשב. הנפשות פשוטות (2D) דו-ממדי בדרך כלל נובעות תמונה של גירוי לגור שני ממדים בלבד, ניתן ליצור עם תוכנות נפוצות כמו MS-PowerPoint8 או Adobe After Effects9. אנימציות תלת מימדי (3D), שדורשים גרפיקה תלת-ממדית מתוחכמת יותר דגמי תוכנה, לאפשר את הגירוי יועבר שלוש-ממדים, הגדלת אפשרויות עבור תנועת הגוף מורכב ומציאותי6,7 , 10 , 11 , 12. אפילו מציאות מדומה עיצובים המדמים את סביבת 3D שבו בעלי חיים לנווט כבר בשימוש13,14. בסקירה האחרונה. Chouinard-Thuly et al. 2 לדון טכניקות אלה אחד ולסמן יתרונות וחסרונות על יישום שלהם במחקר, אשר תלויה בעיקר את היקף המחקר הקיבולות חזותי של החיה מבחן (ראה "דיון"). בנוסף, פאוול, רוזנטל15 לייעץ על עיצוב ניסיוני המתאים, אילו שאלות שניתן לטפל בהן על ידי העסקת מלאכותי לגירויים בחקר התנהגות בבעלי חיים.

מאז יצירת הנפשה ממוחשבת עשוי להיות קשה וצורכת זמן, התעורר צורך בתוכנות להקל על לתקנן את התהליך של עיצוב אנימציה. במחקר זה, אנו מציגים בחינם, קוד פתוח FishSim אנימציה ערכת הכלים16 (קצר: FishSim; https://bitbucket.org/EZLS/fish_animation_toolchain/), רב תחומית המשלבת ביולוגיה ומדעי המחשב כדי מענה לצרכים אלו. בדומה קודם שפורסם בכלי anyFish17,18, התפתחות ערכת הכלים בעקבות המטרה לספק לחוקרים שיטה קלה לשימוש עבור יישום גירויים 3D אנימציה בניסויים עם דגים. התוכנה שלנו מורכב סט של כלים שבהם ניתן להשתמש כדי: (1) ליצור הדגים וירטואלי תלת-ממד (FishCreator), (2) הנפש נתיבי השחייה של הדג וירטואלי עם בקר משחק וידאו (FishSteering) ו- (3) לארגון ולהצגה של שיחה מוקלטת אנימציות בצגים לחיות מוקד דגים (FishPlayer). ערכת הכלים שלנו מספק תכונות שונות, שימושי במיוחד עבור בדיקות במצב בחירה בינארית, אך גם החלים על עיצובים אחרים ניסיוני. יתר על כן, ההנפשה אפשרי של שניים או יותר הדגים וירטואלי מאפשר הסימולציה של shoaling או חיזור. הנפשות אינם מאוגדים גירוי ספציפי, אך עשוי להיות שיחזר עם גירויים אחרים מאפשר לשנות את המראה של גירוי אבל לשמור את ההתנהגות שלה קבוע. מהות פתוח את ערכת הכלים, וכן את העובדה כי הוא מבוסס על מערכת מבצע הרובוט ROS (www.ros.org), מספקות המודולריות הגבוהה של המערכת ומציעות אפשרויות אינסופיות כמעט כדי לכלול התקנים משוב חיצוני (כמו הבקר או מערכת המעקב) וכדי להתאים את ערכת הכלים לצרכים של כל אחד במחקר. בנוסף מולי מפרש, ארבעה מינים אחרים שמישים כרגע: מולי אטלנטיק מקסיקנה מולי, גופי reticulata מולי, את שלוש – spined stickleback Gasterosteus aculeatus , של אמנוניים Haplochromis spp. מינים חדשים יכולים להיווצר גרפיקה תלת-ממדית דגמי כלי (למשל, בלנדר, www.blender.org). כדי להדגים את זרימת העבודה עם FishSim וכדי לספק פרוטוקול על איך לערוך ניסוי העתקה של חבר-בחירה עם הנפשה ממוחשבת, נוכל לבצע חקר מקרה עם מפרש mollies.

חבר הבחירה היא אחת ההחלטות החשובות ביותר חיות להפוך את ההיסטוריה לחיים שלהם. בעלי החיים התפתחו אסטרטגיות שונות למציאת הטוב ביותר ההזדווגות שותפים. הם יכולים להסתמך על מידע אישי בעת הערכת פוטנציאל ההזדווגות שותפים באופן עצמאי, ואולי לפי העדפות גנטי מראש מסוימים תכונה פנוטיפי19,20. עם זאת, הם עשויים לצפות גם הבחירה חבר של בני מינו, ובכך לנצל מידע ציבורי21. אם הצופה ואז מחליט לבחור הקצין אותו (או את פנוטיפ זהה) כמו conspecific נצפתה — "המודל" — שבחרת בעבר, זה נקרא חבר-הבחירה העתקה (להלן מקוצר כמו MCC)22,23. חבר-הבחירה העתקה היא צורת הלמידה החברתית ומכאן שאינו תלוי-חבר-בחירת אסטרטגיה24, אשר נצפתה שתי חוליות25,26,27,28, 29 , חסרי חוליות30,31,32. עד כה, נחקרה בעיקר דגים MCC, והוא נמצא תחת מעבדה תנאים33,34,35,36,37,38 והן בדרך בר39,40,41,42. העתקת הבחירה חבר יקר במיוחד עבור הפרט אם שני או יותר שותפים ההזדווגות פוטנציאליים דומים ככל הנראה איכות ומבחר חבר "טוב" – מבחינת הגדלת כושר — קשה לעשות43. האיכות של מודל נשי עצמה יכול להשפיע אם הנקבות מוקד להעתיק את הבחירה שלה או לא44,45,46,47. בהתאמה, איכות נשית מודל "טוב" או "רע" יוחסה לה פחות או יותר ניסיון בבחירת חבר, לדוגמה ביחס לגודל ולגיל44,45,46, או על ידי היותה conspecific . או heterospecific47... ב- mollies מפרש להעתיק את הבחירה חבר של בני מינו39,48,49,50,51, התברר כי הנקבות מוקד אפילו להעתיק הדחייה של זכר52 . מאז MCC נחשב תפקיד חשוב באבולוציה של תכונות פנוטיפי, כמו גם היווצרות המינים, הכלאה21,23,53,54, ההשלכות של העתקה " ברירה כוזבת"עשוי להיות עצום להפחתת הכושר של מכונת צילום55. אם הפרט יחליט להעתיק את הבחירה של אדם, שחשוב להעריך אם מודל שנצפה הוא מקור אמין של מידע, קרי, כי הדגם עצמו הוא עניין של בחירה "טוב" בשל אותו או היותה ניסיון חבר אחר הבחירה. כאן עולה השאלה: אילו תכונות חזותיות עשוי לאפיין את מודל אמין להעתיק מ בנקבות מולי מפרש?

תכונה חזותיים ברורים מפרש הנשי mollies ו Poeciliids אחרים היא המקום gravid (הידוע גם בשם 'אנאלי ספוט', 'תיקון שבוחרים' או 'הריון ספוט'). אזור זה בקדרות פיגמנט באזור פי הטבעת שלהם נובעת melanization של רקמת רירית את שק השחלות56. גודל ואת הנוכחות של הנקודה gravid משתנה על פני נקבות conspecific, עוד עשוי להשתנות באופן אינדיבידואלי במהלך ההתקדמות של מחזורי השחלות56,57. כתמים gravid עשוי לשרת כדי למשוך זכרים וכדי להקל על התמצאות gonopodial עבור הפריה פנימית58 או כאמצעי פרסום פוריות59,60. בהתחשב הקישור בין הנקודה gravid מצב הרבייה של הנקבה, חזינו כי המקום gravid משרתת כסימן של איכות נשית דגם על-ידי מתן מידע על מצבה הרבייה הנוכחי כדי התבוננות נקודתית נקבות. . חקרנו שתי השערות חלופי. ראשית, אם הנקודה gravid שלט כללי עבור בגרות, כפי שחזיתי מאת פאר, טראוויס59, זה מרמז על דוגמנית מנוסה ואמין ככל הנראה לעומת דגם בוגר (ללא הנקודה). הנקבות מוקד סביר יותר להעתיק את הבחירה של דגם עם מקום אבל לא זה של מודל ללא מקום. שנית, אם הנקודה gravid מסמן הלא-והפורה עקב פיתוח כבר ללול, כפי שחזיתי מאת סאמנר. et al. 60, המודל הוא ככל הנראה פחות אמין מכיוון שאינם פתוחים לרעיונות נקבות ייחשב פחות בררן. במקרה זה, מוקד נקבות לא יעתיק את הבחירה שלהם אבל זה של דגמים ללא מקום. עד כה, התפקיד של המקום MCC gravid בנקבות מולי מפרש יש אף פעם לא היה נבדק ולא השפעול מניפולציות.

השתמשנו FishSim לבצע ניסוי MCC על-ידי הצגת הגירוי וירטואלי זכרים ונקבות מודל וירטואלי על צגי מחשב במקום באמצעות גירוי חיים ודגים מודל כמו בשימוש של תהליך ניסוי קלאסי49,50 51, ,61. כללי השימושיות של התוכנה שלנו בעבר אומתה לבדיקת השערות על הבחירה חבר מפרש mollies12. . הנה, בדקנו העדר או נוכחות של מקום gravid אצל נקבות מודל וירטואלי משפיעה על בחירת חבר של התבוננות נקבות מוקד בשידור חי. ראשית הרשו לנו מוקד נקבות להתאקלם למיכל מבחן (איור 1.1) ולתת להם לבחור בין שני זכרים גירוי וירטואלי אחר במבחן הקצין הראשון-הבחירה (איור 1.2). לאחר מכן, בתקופת התצפית, לזכר מוקדמת וירטואלי לא מועדפת הוצג יחד עם נקבה מודל וירטואלי (איור 1.3). בבדיקה מאטה-הבחירה הבאים שנייה, הנקבות מוקד בחרה שוב בין הזכרים אותו (איור 1.4). ניתחנו אם מוקד הנקבות היו מעתיקים הבחירה חבר של הנקבה דגם שנצפה על-ידי השוואת החלטתה חבר-בחירה במבחן חבר-הבחירה הראשונה והשניה. ביצענו שתי ניסיוני טיפולים שונים שבהם אנחנו חזותית מניפולציות האיכות של הנקבה מודל וירטואלי. במהלך תקופת תצפית, גם הצגנו מוקדמת לא מועדפת וירטואלי הזכר (1) יחד עם נקבה מודל וירטואלי עם מקום gravid (טיפול "ספוט"); או (2) יחד עם נקבה מודל וירטואלי ללא מקום gravid (טיפול "אין מקום"). בנוסף, פקד ללא כל נקבה מודל, בדקנו מוקד נקבות בחרה בעקביות כאשר אין מידע ציבורי סופק.

Figure 1
איור 1. סקירה כללית של הצעדים החשובים ביותר ניסיוני עבור ניסוי MCC באמצעות גירויים הדגים וירטואלי. (1) תקופת הסתגלות. הקצין הראשון (2) -ברירתי: נקבה מוקד חי בוחר בין הגירוי וירטואלי זכרים. (3) תצפית תקופה: הנקבה מוקד צופה הזכר לא מועדפת מוקדמת יחד עם נקבה מודל וירטואלי עם מקום gravid. (4) בדיקה מאטה-בחירה שנייה: הנקבה מוקד שוב בוחרת בין הגירוי וירטואלי זכרים. בדוגמה זו, היא מעתיקה את הבחירה של המודל. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

הניסויים שבוצעו ולא טיפול של הדג היו בקנה אחד עם החקיקה צער הגרמני (Deutsches Tierschutzgesetz), אושרה על ידי הקצין רווחת בעלי חיים פנימיים ד ר אורס Gießelmann, האוניברסיטה של ואן זיגן, (את הרשויות האזוריות Kreisveterinäramt ואן זיגן ויטגנשטיין; היתר מספר: 53.6 55-05).

1. עיצוב הדגים וירטואלי

הערה: למצוא רשימה של תוכנה וחומרה הדרושים ברשימה השלמה. תיאור מפורט של הפונקציונליות הכללית של FishSim נוספים ועצות וטריקים ניתן למצוא במדריך למשתמש (https://bitbucket.org/EZLS/fish_animation_toolchain/).

  1. הכנה של הגוף הנשי טקסטורות עם ובלי gravid ספוט
    1. להתחיל GIMP ו לחץ על הקובץ >> פתח כדי לפתוח את התמונה מרקם של הגוף הנשי "PLF_body_6. . png"מ התיקיה מודלים מדריך"fishsim_animation_toolchain". השתמש בתמונה הזאת כהפניה עבור כל המרקמים שנוצר בגוף הנשי חדש עם מקום gravid. בחר את האזור ספוט gravid האפל של התמונה הפניה באמצעות הכלי בחירה חופשית ונחתוך את זה (לחץ על לערוך >> לחתוך).
      הערה: GIMP (זמין ב- www.gimp.org) הוא תמונה חופשית עריכת כלי, בדומה Adobe Photoshop, אשר יכול לשמש כדי לתפעל תמונות דיגיטלי וגרפיקה.
    2. פתיחת קובץ מרקם הגוף הנשי השני ב GIMP (למשל, "PLF_body_7.png") ולהעביר את האזור ספוט על המרקם הגוף השני על-ידי הוספת (לערוך >> הדבק לתוך) מראש לחתוך פינת ספוט צף כשכבה חדשה. להתאים את מיקום הנקודה gravid בשכבות התמונה ומיזוג השני על ידי לחיצה שכבה >> עוגן שכבה.
      הערה: להבטיח האזור של הנקודה gravid באותו הגודל והמיקום זהה על כל נקבה מודל וירטואלי (איור 2)!
    3. ייצוא (לערוך >> ייצוא כ) המרקם "ספוט" חדש תחת שם חדש (PLF_body_7_S.למשל, png) בתיקיה מודלים . סגור כל פתח חלונות ב GIMP.
      הערה: אל תבצע שינויים אחרים (למשל, שינוי קנה מידה) המרקם הקבצים מאז שהם יערכו במיוחד להיות מאוחר יותר ממופים אל הדג 3D.
    4. ליצור מרקם הגוף השני ללא מקום gravid, תוך שימוש באותו הגוף הנשי המקורי קובץ מרקם בפעם השנייה (למשל, "PLF_body_7.png"). עכשיו, מכסים כתמים gravid קיים כבר בקובץ המקורי עם העזרה של GIMP.
    5. פתח את המרקם הגוף הנשי ב GIMP ובחר את הכלי שיבוט. בחר את התבנית של האזור שמסביב בטן (ללא פיגמנטציה כהה) על-ידי הקשת Ctrl + שמאל לחץ , השתמש באפשרות זו כדי לכסות פיגמנטציה כהה הקיים על ידי ציור על זה עם הכלי שכפול (איור 2).
    6. ייצוא החדש שנוצר מרקם, אף לא נקודה"תחת שם חדש (למשל, PLF_body_7_NS.png) בתיקיה מודלים . סגור את GIMP.

Figure 2
איור 2: שיוצרו תמונות של הגוף הנשי טקסטורות לפני (המקורי), לאחר מניפולציה "המקום", "אין מקום" טיפול באמצעות עריכת תמונה כלים גימפ. המעגל מנוקד מסמן את האזור בו עליה בעורמה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

  1. התאמת נקודת התצפית והגדרת "מחולות" אנימציה
    1. מתחילים FishSim על-ידי בחירה בסמל FishSim מפעיל על הצד השמאלי של שולחן העבודה,. להגדיר את הרזולוציה על המסכים מצגת ולחץ להשיק.
      הערה: מומלץ לבצע את ההתאמות הבאות (צעדים 1.2.2\u20121.2.4) על מסך של אחד מהצגים המצגת (אם צג מידות ורזולוציות שונות).
    2. הקש F1 בלוח המקשים כדי לשנות להציג מצב למצב עריכה (דו-מצבי בין הצגת במצב עריכה על ידי שוב ושוב הקשה על F1).
      הערה: מעבר למצב עריכה מאפשר הכלים עריכה בחלק העליון של החלון. הסצנה כפי שנראה במצב הצגה מתארת מה יוצגו על המסך במהלך הניסויים.
    3. התאם את נקודת המבט להתאים את הממדים של הצגים המצגת על-ידי התאמת זווית המצלמה. לסובב את המצלמה על-ידי החזקת לחצן העכבר השמאלי, להזיז את הסמן. . כוון את המצלמה על-ידי החזקת לחצן העכבר הימני ולאחר הזזת הסמן. זום פנימה והחוצה על-ידי החזקת העכבר האמצעי (או שני לחצני העכבר) ואת הזזת הסמן.
    4. לחץ על הגדרות המצלמה בסרגל הכלים עריכת (סמל המצלמה) ולחץ על העתק לקאם סטטי כדי להגדיר את נקודת המבט. לחץ על קובץ >> להציל את הסצנה לשמור את הסצנה מנוכי עונתיות הסצנה ברירת מחדל חדש. עבור זה, לעקוף הקובץ "default_scene.scene" בתוך תיקיית סצינות של הספריה FishSim .
      הערה: הסצנה ברירת המחדל יופיע בכל הפעלה של FishSim וכן סצנת ההתחלה ב- FishPlayer. ב- FishPlayer הסצינה המהווה ברירת מחדל משמש גם הפסקה במהלך הניסויים (איור 3 א). התאמת בזירת שצריך לעשות פעם אחת בלבד.

Figure 3
איור 3: צילומי מסך של סצנה ב- FishSim. (א) הסצינה ברירת מחדל ריק בלי דג, (B) סצנה המראה זכר לבד, (ג) סצנה המראה את זכר אותו יחד עם נקבה דגם עם נקודה, ו- (ד) סצנה מראה הזכר זהה ודגם זהה הנשי בלי מקום. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

  1. העיצוב של גירוי זכר וירטואלי עבור מצגת במהלך הבדיקות חבר-בחירה
    הערה: להכין גירויים זכר וירטואלי, אשר מאוחר יותר להיות אנימציה, הציג לחיות נקבות מוקד במהלך הבדיקות חבר-בחירה.
    1. אם לא כבר פתוחה, להתחיל FishSim. הקש על F1 כדי להיכנס למצב עריכה.
    2. לחץ על קובץ >> טען דגים מודל מן התפריט הנפתח טען ברירת המחדל מפרש זכר מולי תבנית "default_PLM.x" על-ידי בחירתו מתוך התיקיה מודלים.
    3. שמאל לחץ פעמיים על דג טעון כדי לבחור בו. זה יסומן ברשת. לחץ על הסמל ' ציוד ' בסרגל הכלים כדי לפתוח את כלים דגים. תיבה יופיע עם אפשרויות עריכה משמש להתאמה אישית הזכר וירטואלי. לקבלת תצוגה משופרת של הדג, untick הצג רשת שינוי .
    4. לשנות את השם ל זכר.
      הערה: שמו של הגבר חשוב, מייצג את "התפקיד" שהוא ישחק מאוחר יותר במהלך ההנפשה. זה השם חייב להיות זהה עבור כל שנוצרו וירטואלי גבר אשר ישמשו מאוחר יותר במהלך הניסויים.
    5. לשנות את קנה המידה (מידות) של הזכר על-ידי שינוי הערכים של x, y ו- z, אם צריך, לחץ על החל.
    6. עריכת המרקם של הזכר על ידי לחיצה על מרקמים בתיבת הכלים לערוך. לחץ על תכונה של הדג (גוף, הגבי, סימטרית) כדי לשנות את זה.
      הערה: תיבת לבחור מרקם עבור יופיע עם כל. png-קבצים עשויה לשמש טקסטורות. טקסטורות יופיע עם שמות שניתנו בתוך תיקיית מודלים .
    7. לחץ על מרקם מוצג ברשימה (מימין), וזה ישירות מופיעים להחליף את המרקם מוקדמת על הדג.
    8. כשנוצר הזכר הרצוי, לחץ על החל תחת Config בתיבת הכלים לערוךולחץ להציל דגים לדיסק. שמור הזכר חדש בשם "Male_A.fish" בתוך תיקיית מודלים .
    9. בנוסף, להציל את הסצנה כולה (קובץ >> להציל את הסצינה) כולל את זכר אחד בתיקייה סצינות . כאן, מומלץ להשתמש בשם "Male_A_alone.scene" (איור 3B).
    10. לחץ על קובץ >> טען זירת כדי לטעון את הסצנה ברירת מחדל ריק וחזור על שלבים 1.3.2 כדי 1.3.9 כדי ליצור כמה שיותר גברים וירטואלי שונים כנדרש ולשמור כל חדשות שנוצרו זכר תחת שם ייחודי בתיקיה ' מודלים ' כקובץ חדש .scene-ב התיקיה סצנה .
  2. עיצוב של דגים נקבה מודל וירטואלי עבור מצגת במהלך תקופת תצפית
    1. לחץ על קובץ >> טען זירת כדי לטעון את הסצינה המהווה ברירת מחדל. בצע את שלב 1.3.1 ולחץ על קובץ >> טען דגים מודל כדי לטעון את תבנית ברירת המחדל הנשי "default_PLF.x" מתוך התיקיה מודלים .
    2. השמאלית, לחץ פעמיים על הנקבה טעון בחר אותו ולפתוח את כלים דגים. לשנות את השם ל "נקבה". קנה המידה הנקבה במידת הצורך כפי שמתואר בשלב 1.3.5.
      הערה: השם ושינוי קנה מידה צריך להיות זהה עבור כל הנשים למטרות של הניסוי הזה.
    3. החלף את המרקם הגוף הנשי ברירת המחדל שנוצרה בעבר "מקום"-גוף מרקם (המפורטים בתיבה מימין) כמתואר בצעדים 1.3.6 כדי 1.3.7.
    4. לחץ על החל תחת Config בתיבת הכלים לערוך, ולאחר מכן להציל דגים הדיסק על ידי לחיצה על שמור וליצור קובץ "Female_1S.fish" (S = נקודה).
    5. לחץ על קובץ >> טען זירת כדי לטעון את הסצינה המהווה ברירת מחדל. חזור על שלבים 1.4.1 כדי 1.4.4 כדי ליצור לפחות אחד (או כמה שיותר הדרושים) דגם זהה אך נקבה ללא gravid ספוט ולכנותו "Female_1NS.fish" (NS = בשום נקודה). שמור כל דג בתיקיה מודלים .
      הערה: עבור התקופה התצפית של הניסוי MCC, סצינות כולל זכר אחד ונקבה אחת צריך להיות שיצרת ושמרת.
    6. לחץ על קובץ >> טען זירת כדי לטעון את הסצנה ברירת מחדל ריק. לחץ על קובץ >> טען דגים מודל כדי להוסיף על וירטואלי זכר "Male_A.fish" מתוך התיקיה מודלים . לחץ על קובץ >> טען דגים מודל שוב כדי להוסיף את וירטואלי מודל נשי "Female_1S.fish" לזירת. לשנות את המיקום של כל דג על ידי שינוי שלהם x - y-, קואורדינטות ה-z כך גופם לא יחפפו.
      הערה: מחק דג מזירת על-ידי לחיצה כפולה על זה, לחיצה על מחק במקלדת.
    7. להציל הסצנה כולל זכר וגם נקבה דגם על-ידי לחיצה קובץ >> להציל את הסצינה כמו "Male_A_with_Female_1S.scene" (איור 3C).
    8. חזור על שלבים 1.4.6 כדי 1.4.7 ליצירת שלוש סצנות נוספות עבור: (1) Male_A עם Female_1NS (ראה איור תלת-ממד), (2) Male_B עם Female_1S Male_B (3) עם Female_1NS.

2. הנפשה של גירויים הדגים וירטואלי

הערה: כל סוג של אנימציה לצורך הניסוי צריך להיות מוכן פעם אחת בלבד באמצעות סצנה אחת זכר למופת וקטע תצפית מופתית אחת (זכר ונקבה מונפשים יחד). במהלך תהליך הבהמית, נתיב שחייה עבור כל דג נוצר אשר מאוחר יותר יכולה להיות שיחזר על ידי דגים, כל עוד השם הוא זהה (ראה שלב 1.3.4).

  1. אנימציות זכר וירטואלי עבור מצגת במהלך הבדיקות חבר-בחירה
    הערה: להכין שתי אנימציות של זכר וירטואלי: (1) מסלול שחייה עם משך של 7.5 דקות, ו- (2) נתיב שחייה עם משך זמן של 5 דקות.
    1. חברו את בקר המשחקים (למשל, תחנת לשחק סוני 3) ליציאת ה-USB של המחשב הפעלה.
    2. פתח FishSim ולחץ על קובץ >> טען זירת כדי לטעון את הסצינה של זכר אחד מן התיקיה סצינות, למשל, "Male_A_alone.scene". מתחילים FishSteering על-ידי לחיצה על הסמל FishSteering .
    3. קביעת ההגדרות בקר בחלון נפרד.
      הערה: FishSim ו- FishSteering להפעיל בו זמנית, דגים יכול גם להיות מכוון הצגת מצב, כפי שמוצג במהלך הניסויים, או במצב עריכה על-ידי הקשה על F1.
    4. כדי להנפיש את הדגים (זכר), בחר אותה מתוך התפריט הנפתח של לוח היגוי . כאן שמות דגם מתאימות את השם שניתן ב- ארגז הכלים לערוך (ראה שלב 1.3.4).
    5. לחץ על התחל הצבת ולהשתמש הבקר מניחים את הדג על כל עמדת הזינוק במיכל וירטואלי. לחץ על הפסק מיקום.
    6. להתחיל להקליט נתיב שחייה של הדג על ידי לחיצה על התחל הקלטה. השתמש בבקר כדי להזיז את הדגים סביב הסצנה.
      הערה: משך ההקלטה הוא נתון בפינה הימנית התחתונה של החלונית ההיגוי.
    7. לחץ על עצור הקלטה. לחץ על שמור כדי לשמור את הנתיב שחייה .bag-file ("שיא") על הכונן (למשל, על שולחן העבודה). בחר את השם של הקובץ לייצג את משך הזמן של הפרוטוקול, למשל, "7_30_min_male_alone.bag".
      הערה: לאחר ההקלטה מופסקת, אין אפשרות לערוך את משך הזמן הכולל שוב.
    8. לערוך את ההקלטה כדי להוסיף תנועה של לסנפיר הזכר לחקות התנהגות החיזור הזכר במהלך הבדיקות חבר-בחירה. בחר לסנפיר מתוך התפריט הנפתח בתכונה לערוך (תכונה אחת בלבד ניתן לעריכה בכל פעם).
    9. בחר התחל עריכת ואת הנתיב שחיה מלאה להיות שיחזר. לחץ על לחצן L1 בבקר כדי לגייס את וסנפיר הגב בנקודות ספציפיות בזמן. לחץ על שמור כדי לשמור את הגירסה הערוכה של הנתיב שחייה חדש . תיק-קובץ.
    10. חזור על שלבים 2.1.8 תגובה על ו 2.1.9 אך לבחור את gonopodium כדי להוסיף את התנועה. לשמור את הגירסה הסופית לשימוש מאוחר יותר ב- FishPlayer. קרוב FishSteering.
      הערה: מומלץ לשמור את התיק-קבצים עבור כל שלב עריכה תחת שם ייחודי. על ידי זה, זה תמיד אפשרי לחזור לגירסה מוקדמת יותר של ההנפשה אם משהו בתהליך העריכה משתבש.
  2. וירטואלי זכר והן דגמי הנשי הנפשה למצגת בתקופת התצפית
    הערה: להכין מהנפשה אחת עם זכר וירטואלי, הנקבה מודל וירטואלי בחיזור, ובכך מינית אינטראקציה עם אחד את השני, עם משך סך של 10 דקות.
    1. פתח FishSim. הקש על F1 כדי להיכנס למצב עריכה ולחץ על קובץ >> טען זירת כדי לטעון סצנה עם זכר ונקבה, למשל, "Male_A_with_Female_1S.scene". תתחיל FishSteering.
    2. בחר זכר ונקבה לסירוגין כדי למקם אותם (על-ידי לחיצה על התחל/הפסק מיקום) במיכל וירטואלי.
    3. עבור ההקלטה, לבחור את הדג הנשי תחילה מתוך התפריט הנפתח של לוח היגוי , ליצור נתיב שחייה עם משך של 10 דקות ביצוע השלבים 2.1.5 כדי 2.1.6.
      הערה: ניתן להקליט את הנתיב שחייה של דג אחד בלבד בכל פעם. לאחר animating את הדג הראשון, הנתיב שחייה של הדג השני יכול להיות כלולים שימוש בפונקציה לערוך בעוד הדג בעבר steered להיות שיחזר לצד עבור משך כל הזמן של ההנפשה.
    4. לחץ על עצור הקלטה להציל הנתיב שחייה בכונן, למשל, כמו "10_00_min_male_with_female.bag". לאחר מכן ערוך במרוכז של הזכר שחייה נתיב, וסנפיר תנועה ותנועה gonopodium כמתואר בצעדים 2.1.8 תגובה על כדי 2.1.10. שמירת הגירסה הסופית לשימוש מאוחר יותר ב- FishPlayer.

3. הכנת רשימות השמעה אנימציה הניסוי MCC

הערה: השתמש FishPlayer כדי להציג הנפשות בשני צגים לחיות נקבות מוקד. לארגן את רשימת ההשמעה עבור כל אחד מהצגים בנפרד לדמות את ההליך של הניסוי MCC (איור 1). הכלי מורכב החלון הראשי מציג את רשימת ההשמעה רשומה עבור כל אחד מהצגים (איור 4), חלון הנפשה נפרדים עבור כל אחד מהצגים המצגת.

  1. הפונקציונליות הכללית ואת הסידור של סצינות ורשומות
    1. סגור את כל החלונות ופתח FishPlayer על-ידי לחיצה על הסמל המתאים. להגדיר את ההגדרות עבור השימוש עם שני צגים עבור המצגת (ימינה ושמאלה) ולחץ על הפעל.
      הערה: הסצנה ברירת המחדל שנוצר בשלב 1.2.4 (תישמר ב scenes/default_scene.scene) תמיד להיות טעון ויוצג על שני הצגים כמו סצנת הפתיחה ובמהלך הפקודה pause.
    2. להוסיף ערכים לרשימת ההשמעה עבור כל אחד מהצגים בנפרד. לחץ על זירת עומס הוספה כדי להוסיף את הסצינה של למשל, A זכר, מתוך התיקיה סצינות בספריה FishSim . לחץ על הוסף לשחק הרשומה כדי להוסיף רשומה מהכונן, למשל, שיא 7.5 דקות זכר לבד.
      הערה: הסצנה, הרשומה הבאה תקושר אז על-ידי התוכנה, ניתן ליצור הנפשה הזכר וירטואלי מתואר בסצינה כמשמעותם הרשומה המתאימה.
    3. לחץ על השהה הוספה כדי להוסיף פקודה השהיה של משך מסוים (דקות/שניות) מציג את הסצנה ברירת המחדל בלי דגים כמו שבר דגים טיפול בין הרשומות.
      הערה: משך השהיה צריך בדרך כלל תלויות הזמן הדרוש לגידול דגים טיפול. לחץ על ערך וגרור כדי לשנות את הסדר ברשימה. הערכים שנבחרו מסומנות באדום. מחיקת ערך מרשימת ההשמעה על-ידי בחירת הפריט ולחיצה על למחוק את הבחירה.
    4. לחץ על הפעל/הפסק כדי להפעיל או לעצור מצגת. להפסיק תמיד יסיים את רשימת ההשמעה מלאה, למשל, שם אין דרך לעצור באמצע רשימת השמעה פעם לרוץ.
      הערה: רשימות השמעה תמיד להתחיל מן הערך הראשון ולהפעיל מלמעלה עד למטה. לכן, הסדר הנכון של כל הערכים יש להגדיר לפני הניסוי, לא ניתן לשנות אחר כך מבלי לעצור את המצגת. טיימר בחלק התחתון של החלון מציגה את משך הזמן בפועל של ההשמעה הנוכחית.
  2. סידור רשימת השמעה עבור שני הטיפולים ואת הפקד של הניסוי MCC
    הערה: מבחינת הסדר ערך, הניסוי MCC מחולק לשני חלקים: (1) בדיקה הקצין הראשון-הבחירה של (2) תקופת תצפית ואחריו את המבחן השני חבר-בחירה. לכן, עבור כל טיפול, הפקד, רשימות השמעה חייבים להיות מסודרים בשתי הזמנות שונות.
    1. בעת הפעלת הניסוי, ראשית, להכין רשימת השמעה עבור הבדיקה הקצין הראשון-בחירה.
    2. שנית, בתהליך הניסוי פועל, לשנות את סידור רשימת ההשמעה עבור התקופה תצפית עוקבות, הבדיקה חבר-הבחירה השנייה לפיה זכר וירטואלי היה המועדף על ידי הנקבה מוקד במבחן הקצין הראשון-בחירה.
  3. סידור רשימת השמעה ספציפי לטיפול "ספוט"
    1. לבדיקה הקצין הראשון-בחירת טיפול 1, להזמין את רשימת ההשמעה בדיוק כפי שהיא מתוארת דמות
    2. לאחר הבדיקה הקצין הראשון-בחירה, לקחת הפסקה לחישוב זכר וירטואלי אשר היה מועדף (ראה שלב 5.9 להלן). ואז לארגן מחדש רשימות השמעה עבור התקופה תצפית, שבה המידע לציבור מסופק עם האשה מוקד לפי מראה הזכר לא מועדפת מוקדמת יחד עם הנקבה מודל.
    3. לארגן את רשימת ההשמעה תצפית הבדיקה הבאה חבר-הבחירה השנייה על פי איור 5.
    4. לתקופה תצפית, קישור הרשומה 10-מין (זכר והן דגמי נשים יחד) עם קטע מציג ראש המנזר העדיפו זכר לבד.
      הערה: במקרה זה, יוצג רק שחיה הנתיב של הזכר, כי זה חסר בסצנה, הנקבה מודל וירטואלי יהיה נעדר.
    5. עבור רשימת ההשמעה שמציעות הזכר לא מועדפת, קישור הרשומה 10 דקות אל זירת כולל הזכר לא מועדפת מוקדמת יחד עם הנקבה מודל. בחר את הסצינות כולל נקבה דגם עם מקום gravid (S) לטיפול הזה.
      הערה: בניגוד 3.3.2, כאן, להיות שיחזר את הרשומה זהים אבל עכשיו הנקבה מודל זה גלוי.

Figure 4
איור 4: צילום מסך מראה FishPlayer רשימות השמעה עבור צגים ימין ועל שמאל בחלק הראשון (א. א, הקצין הראשון-בחירת מבחן) של הניסוי MCC. ערכי רשימת השמעה מסודרות לפי הצורך לבדוק את הקצין הראשון-בחירת טיפול 1. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 5
איור 5: מסך מראה FishPlayer רשימות השמעה עבור צגים ימין ועל שמאל של החלק השני (תקופה התבוננות, בדיקה מאטה-בחירה שנייה) של הניסוי MCC. ערכי רשימת השמעה מסודרות לפי הצורך עבור התקופה התבוננות ובדיקה חבר-הבחירה השנייה טיפול 1. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

  1. סידור רשימת השמעה ספציפי לטיפול "אין מקום"
    1. 2 טיפול, להזמין את רשימות ההשמעה כמתואר עבור טיפול 1 (איורים 4 , 5), אך במקום זאת להשתמש האירוע כולל הנקבה מודל וירטואלי ללא מקום gravid (NS) במהלך התצפית.
  2. סידור רשימת השמעה ספציפי עבור הפקד הבחירה עקביות
    הערה: בפקד הבחירה עקביות, ערכי רשימת השמעה עבור הבדיקה חבר-בחירה זהים טיפולים 1 ו- 2 (איור 4). בתקופת התצפית, עם זאת, אין מידע ציבוריים לנשים מוקד ושירות, ומכאן, אין אישה מודל הוא גלוי.
    1. להזמין את רשימות ההשמעה, כמוצג באיור 5 אבל לשלב הקלעים עבור כל זכר לבד יחד עם רשומת 10 דקות.
      הערה: במקרה זה, רק את השחייה נתיב של הדג זכר תוצג על, כי זה חסר בסצנה, הנקבה מודל תהיה חסרה משני הצדדים.

4. הגדרת הניסוי

  1. מקום שני המחשב מקרינים אחד בקצוות מנוגדים של טנק הבדיקה. התאם את המסכים לכסות קירות הזכוכית של הטנקים הבדיקה וכדי יש 1.5 ס מ רווח בין המסכים הקירות טנק. לספק תאורה למיכל מלמעלה.
  2. מכסים קרקעית מיכל עם שכבה דקה של חצץ ולמלא את זה עם מים מתאים חי דג לגובה של המסכים. לסמן את אזור הבחירה עם קו אנכי בעומק 20 ס מ משני הצדדים בצד החיצוני של הטנק. יש גליל זכוכית אקרילית סטופרים שני בהישג יד.
  3. מחברים על הצגים לספק הכוח של המחשב הפעלה, מניחים לפחות 1 מ' מן המיכל בדיקה, למשל, על שולחן קטן (איור 6).

Figure 6
איור 6: הגדרת הניסוי לניסוי MCC עם הנפשה ממוחשבת. תפעול המחשב מתחבר שני צגים המצגת (צג 1 ו- 2) אשר החוזר הנפשות לחיות נקבות מוקד בתוך הטנק הבדיקה. להמחשה, שני צגי LCD נמצאים בזווית כדי להראות קטע אנימציה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

5. עורכים את הניסוי MCC

הערה: בצע את ההליך ניסיוני שלהלן כדי לבצע ניסיון אחד של טיפול 1, טיפול 2 או הפקד הניסוי MCC באמצעות נקבה אחת מוקד חי (ראה איור 1).

  1. תפתח את FishPlayer במחשב ההפעלה ולארגן רשימות השמעה של הקצין הראשון - ברירתי כמו למשל, תיאר עבור טיפול 1 (איור 4). בדיקת הפועלות הצגים למצגת וכי הם מציגים את הסצנה ברירת מחדל ריק.
  2. המקום נקבה מוקד חי בתוך הטנק הבדיקה. תן לה לשחות בחופשיות, להתאקלם הטנק וגם את המצגת של המיכלים הריקים על שני הצגים לתקופה של 20 דקות.
  3. לאחר הסתגלות, למקם את הנקבה מוקד גליל שקוף באמצע המיכל בדיקה כדי להבטיח במרחק שווה על שני הצגים להפעיל ההשמעה על שני הצגים בו-זמנית על ידי לחיצה על לשחק, מתחיל עם הקצין הראשון-הבחירה מבחן.
    הערה: הנקבה מוקד מותר לצפות בשני גברים וירטואלי גירוי בתוך הגליל סביב 2.5 דקות.
  4. לפני השעון מגיע 02:30 דק ', לאט לאט למיכל ניסיוני ולשחרר הנקבה מוקד מן הגליל על ידי בעדינות להרים אותו ישר מהמים, למשל, 02:15 דקות.
    הערה: כאן, העיתוי המדויק תלוי המרחק מן המחשב הפעלה למיכל מבחן ואני צריכה להיקבע במהלך ניסיונות קודמים. חיוני לפעול לאט ובעדינות כדי להימנע והדגיש את הדגים. מאז דגים עשוי לפעול מהר מאוד, מומלץ כבר בהישג יד אחת סטופר תוך שחרור הנקבה להתחיל ישירות מדידת זמן האגודה (ראה שלב 6.1).
  5. חזור אל המחשב הפעלה. להתבונן הנקבה מוקד ויש שני סטופרים בהישג יד מדד האגודה לזמן עם כל זכר גירוי וירטואלי (ראה שלב 6.1).
    הערה: הנקבה מוקד מותר לשחות בחופשיות ולבחור בין שני זכרים במשך 5 דקות.
  6. לעצור את מדידת הזמן האגודה כאשר השעון מגיע 07:30 דקות. הערך הפסקה ואז יפעל במשך 1.5 הגבלת שימוש השהה זמן הטיפול, שוב, למקם את הנקבה מוקד בפנים הצילינדר, רשום את הזמן כל זכר וירטואלי על גליון נתונים.
    הערה: לאחר שתיקה קלה, השני 07:30 דקות ערך יתחיל, הנקבה מוקד תוכלו לצפות בשני גברים 02:30 דקות. תפקיד הזכר הוא החליף עכשיו בין השמאל לימין לשלוט על דעה קדומה צד אפשריים אצל נקבות מוקד (ראה שלב 6.3).
  7. לפני השעון מגיע ב11: 30 דקות, לשחרר את הנקבה מוקד מן הגליל. מדד האגודה זמן 5 דקות הבא.
  8. לעצור את מדידת הזמן האגודה כאשר השעון מגיע 16:30 min. הערך השהה יפעל עבור 1 הגבלת שימוש הפעם טיפול כדי למקם את הנקבה מוקד בפנים הצילינדר.
  9. . תרשום את האגודה פעמים עד המדידה השניה עבור כל גבר, לסכם האגודה פעמים של שני החצאים של הבדיקה הקצין הראשון-הבחירה (לפני ואחרי זכרים הוחלפו). לחשב אם הנקבה מוקד היה דעה קדומה בצד, אילו גבר היה המועדף על ידי הנקבה מוקד (ראה שלבים 6.1-6.3).
    הערה: זה לא בעיה אם ההשהיה הסתיימה לפני החישוב נעשה, מאז שתמשיך לשלב הבא צריך את רשימת ההשמעה כדי להגיע לסיומה, תפסיק.
  10. לארגן מחדש רשימות השמעה (האם לא לסגור FishPlayer!) כפי שמוצג באיור 5 (בהתאם הטיפול הנוכחי) כך מוקדמת העדיפו זכר תהיו מונפשים לבד במהלך תקופת תצפית, הזכר לא מועדפת מוקדמת יונפשו יחד עם המודל הווירטואלי הנשי.
    הערה: שינויים שבוצעו רשימות השמעה אינם גלויים לעין הנקבה מוקד.
  11. לחץ לשחק כדי להמשיך שהחלק השני של הניסוי ואת הערכים להיות שיחזר מלמעלה למטה החל פרק 10 דקות תצפית.
    הערה: במהלך תקופת תצפית, הנקבה מוקד נשאר בתוך הגליל אך הוא מסוגל לראות שתי מצגות.
  12. לאחר תקופת תצפית, הפוגה של 0.5 דקות מתחיל. לפני השעון מגיע ב10: 30 דקות, לשחרר את הנקבה מוקד מן הגליל ולהתחיל את בדיקה מאטה-בחירה שנייה עם הרשומה 5-מין עבור כל זכר. למדוד זמני האגודה הבא 5 דקות.
  13. לעצור את מדידת הזמן האגודה כאשר השעון מגיע 15:30 דקות. הערך הפסקה לאחר מכן להפעיל עבור 1.5 מינימלית המקום הנקבה מוקד בתוך הגליל, לרשום את הזמן נמדד עבור כל זכר וירטואלי.
    הערה: ואחרי שתיקה קלה, הבא 7:30 דקות ערך יתחיל הנקבה מוקד תוכלו לצפות בשני גברים (אשר עמדה שוב החליף בין השמאל לימין) 2.5 דקות.
  14. לפני השעון מגיע ב19: 30 דקות, לשחרר את הנקבה מוקד מן הגליל ולמדוד את האגודה זמן 5 דקות האחרונות.
  15. לעצור את מדידת הזמן האגודה כאשר השעון מגיע 24:30 min ולסיים את הניסוי. תרשום את האגודה זמני עבור שני גברים וירטואלי ולהמשיך עם ניתוח.

6. נתוני מדידה

  1. למדוד זמן האגודה במהלך הראשון ואת החלק השני (לפני ואחרי גירויים מוחלפות) של כל בדיקה מאטה-הבחירה, כאשר הנקבה מוקד רשאית לבחור בין שני גברים.
    הערה: . תתחילי למדוד כאשר הנקבה חוצה את הקו כך שמניחים את אזור הבחירה עם הראש שלה operculum להפסיק את המדידה כאשר operculum ואחראי שלה נמצאים מחוץ לאזור הבחירה.
  2. לסכם האגודה זמן שנמדד עבור כל זכר בחלק הראשון והשני של בדיקה מאטה-הבחירה ולקבוע אילו גבר היה המועדף.
    הערה: הזכר המועדף נקבע כאחד שהנקבה מוקד במשך יותר מ- 50% של הזמן הכולל שבילתה שני אזורי הבחירה תוך בדיקה מאטה-בחירה. לניתוח, ארגון הזמן מתורגם לעתים קרובות העדפה ציונים (הערך היחסי של חבר-ברירה), מוגדרת כזמן נקבה מוקד בילה עם זכר מחולק הפעם היא בילתה עם שני זכרים באזורי חבר-בחירה.
  3. לחשב אם הנקבות מוקד להציג דעה קדומה בצד במהלך הבדיקה הקצין הראשון-הבחירה לא לכלול נקבות משוחד הפרשניות.
    הערה: נקבות מוקד נחשבים להיות מוטה לצד, אם הם בילו יותר מ- 90% של הזמן הכולל (שני החצאים של הבדיקה הקצין הראשון-ברירה) באזור הבחירה אותו, אפילו אחרי המיקום זכר הוחלפה. הבחירה שלה עבור זכר נחשב אז סייד מוטים, המשפט הסתיים.
  4. למדוד אורך סטנדרטי של נקבת מוקד (SL).
    הערה: כדי למנוע דגים להיות לחוץ במהלך הניסויים, המידות נלקחות תמיד עם סיום המשפט ניסיוני.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

בעקבות הפרוטוקול, השתמשנו FishSim ליצירת אנימציות מחשב של מולי מפרש וירטואלי זכרים ונקבות. השתמשנו עוד יותר את ערכת הכלים להציג הנפשות לחיות נקבות מוקד במצב בחירה בינארית לבצע ניסוי MCC הנוהל ניסיוני המתואר באיור 1 ואת שלב 5 של הפרוטוקול.

על מנת לקבוע אם הנקבות מוקד להעתיק את הבחירה של הנקבה מודל וירטואלי, מדדנו העמותה זמן של הנקבה מוקד לכל זכר בתוך המבחן חבר-הבחירה הראשונה והשניה במהלך הניסויים. מספר פרמטרים בדרך כלל מאבחנים באמצעות האגודה זמן מתקבל הראשון ואת המבחן השני חבר-בחירה עבור כל טיפול, הפקד הבחירה עקביות. איך שעוברים ניתוח הנתונים אינו מאוגד מבחן סטטיסטי מסוים אבל יכול להיעשות בדרכים שונות (למשל, פרמטרית/nonparametric בדיקות, חוזרות ונשנות אמצעים ANOVA, מודלים סטטיסטיים), שעשוי להיות תלוי ב מבנה הנתונים הסופי. עבור ניתוח נתונים שלנו, השתמשנו R 3.2.262. אנחנו שהועלו הנתונים הגולמיים השגנו הניסוי שלנו, כמו גם את R-קוד השתמשנו לניתוח שלנו כדי Figshare (doi: 10.6084/m9.figshare.6792347).

במחקר הנוכחי, יצרנו 15 מודל וירטואלי שונה נקבות עם מקום gravid עבור טיפול 1 ונקבות 15 דגם זהה ללא מקום עבור טיפול 2. כל הנשים מודל היה באורך סטנדרטי וירטואלי (SL) של 50 מ מ. אזור יחסית ספוט gravid היה 4.7% משטח הגוף הכולל (למעט סנפירי; כפי שנמדד עם ImageJ v1.51j8) עבור כל הנשים טיפול 1. עוד, יצרנו 30 גברים גירוי וירטואלי אחר שהוצגו במהלך הבדיקות חבר-בחירה, המאפשרות 15 זיווגים גירויים זכר ייחודי. גירוי הזכרים היה משחק פאזל וירטואלי בין 41-45 מ מ. אנו לבצע ניסויים 15 עבור כל טיפול, הפקד הבחירה עקביות. בדקנו את המספר הכולל של נקבות מוקד חי 55 צאצא של מפרש פראי mollies נתפס באי מוסטנג ליד קורפוס קריסטי, TX, ארצות הברית בשנת 2014. כל הנשים מוקד היו מבוגרים, נבדקו רק פעם אחת. שתי נשים נאלצו ייכללו בשל בעיות טכניות במהלך הבדיקה. נקבה אחת הוצאה מהכלל אמורים להדגיש מאז היא לא להתאקלם המצב המבחן היה חושש להזין בכל אזור בחירה. הפקד להטיה בצד בדגים מוקד (פרוטוקול שלב 6.3) נדרש נוסף אנו מסירים נקבות שבע מניתוח הסופי בגלל ההטיה לצד שלהם במבחן הקצין הראשון-בחירה. בסך הכל, ניתחנו את סך של n = 15 נקבות מוקד עבור כל טיפול, הפקד. נקבות מוקד היה ממוצע SL 32 ± 5 מ מ טיפול 1, 33 ± 5 מ מ 2 טיפול ו- 33 ± 3 מ"מ של פקד בחירה עקביות. השווינו את האורך הסטנדרטי (SL) של נקבות מוקד על פני טיפולים ואת הפקד באמצעות מבחן דרגה סכום Kruskal ווליס לחשוף נתונים עצמאי SL לא להיות שונה בין טיפולים הפקד (מבחן דרגה סכום Kruskal ואליס: n = 45, df = 2, χ2 = 0.329, p = 0.848).

הפרמטר החשוב ביותר שנמדד בניסוי MCC כבר של הנקבה מוקד העמותה זמן לכל זכר (פרוטוקול שלב 6.1). האגודה זמן הוא מדד עקיף של בת-זוג להעדיף דגים63,64,65,66 ומידה ומבוססת כדי לקבוע חבר, בחירה מפרש mollies כאשר אין מגע ישיר מסופקים12,48,61,67,68. עבור כל טיפול, הפקד, קודם השתמשנו האגודה זמן לנתח אם המוטיבציה בחירת שונה בין ידידי-הבחירה בדיקות. בחירת מוטיבציה מוגדרת הזמן הכולל נקבה מוקד בילה בשני אזורי הבחירה תוך בדיקה מאטה-בחירה. עם זאת, שינוי בבחירת מוטיבציה ואינם משקפים בהכרח בשינוי העדפה או זכר. אם בחירת מוטיבציה שונה משמעותית בין שתי הבדיקות חבר-הבחירה זה חובה להשתמש העדפה ציונים ולא פעם ההתאגדות המוחלט, לצורך ניתוח נוסף על מנת להבטיח comparability בתוך ובין טיפולים (ראה פרוטוקול שלב 6.2 ). במחקר שלנו, בחירת המוטיבציה של נקבות מוקד לפני ואחרי התבוננות נקבה מודל וירטואלי אינטראקציה מינית עם גבר? האם לא נבדלים טיפול 1 (Wilcoxon חתם על מבחן דרגה: n = 15, V = 44, p = 0.379) ובשליטה על הבחירה עקביות ( Wilcoxon חתם על מבחן דרגה: n = 15, V = 42, p = 0.33). עם זאת, בחירת מוטיבציה היה גבוה באופן משמעותי לאחר התבוננות נקבה מודל וירטואלי ללא gravid ספוט אינטראקציה מינית עם גבר, בשנות טיפול 2 (Wilcoxon חתם על מבחן דרגה: n = 15, V = 22, p = 0.03).

ה דטרמיננטה החשוב ביותר של אם אירעה MCC היא עלייה משמעותית הזמן בילה/העדפה הציונים של הזכר לא מועדפת מראש מהראשון כדי החבר-הבחירה השנייה לבדוק22. הועבר למצב הטבעי, עלייה הזמן שבילה עם הזכר מוקדמת לא מועדפת, כתוצאה מכך גוברת הסבירות כי נקבה יזדווג. עם הגבר הזה. לכן, הניתוח העיקרי לעומת הפעמים מוחלט או את הציונים העדפה של הזכר לא מועדפת מוקדמת בין שתי הבדיקות חבר-בחירה. ניתוח זה צריך להיעשות עבור כל טיפול, הפקד בנפרד. מאז במחקר שלנו, בחירת מוטיבציה שונה הטיפול 2, היינו ציונים העדפה לזכר גירוי בתחילה לא מועדפת, ולא פעם ההתאגדות המוחלט, כדי לקבוע אם תוצאות אלה שונה בין הראשון והשני החבר-הבחירה מבחן כאשר סופק המידע לציבור, לעומת הטיפול שליטה בו מידע ציבורי נעדר.

בשביל זה, אנחנו מתאימים מודל ליניארי אפקט מעורבת (LME) עם הפונקציה lme מתוך החבילה 'nlme'69 עם העדפה הציון לזכר מוקדמת לא מועדפת (pref_NP) כמו המשתנה התלוי. כללנו בדיקה מאטה-הבחירה (Mtest: M1, M2) טיפול (טיפול: נקודה, נקודה, שליטה) כמו גורמים קבועים, כמו גם אורך סטנדרטי של הנקבה מוקד (SL) כמו covariate. לקחת בחשבון תכנון אמצעים חוזרות ונשנות, מוקד הזהות הנשית (ID) נכללה כגורם אקראי. היינו מעוניינים במיוחד אם ההשפעה של בדיקה מאטה-הבחירה הייתה שונה בין טיפולים; לכן, כללנו באינטרקציה בין בדיקה מאטה-הבחירה בטיפול במודל שלנו. ערכנו השוואות אורתוגונלית שני עבור "טיפול" באמצעות ניגודים פונקציית ה70. קבענו הניגודים של המודל (1) להשוות את הפקד נגד הממוצע של כל הטיפולים באיזה מודל וירטואלי כל נקבה הוצג במהלך התצפית [בקרה >> (מקום, בשום נקודה)], ו- (2) להשוות את הטיפול מציג מודל וירטואלי נקבה עם ספוט נגד זה בלי מקום (ספוט >> בשום נקודה). חלקת שאריות של גורם נגד הערכים מצויד חשף heteroscedasticity של השונויות שיורית עבור "Mtest". לכן, אנו כלל פונקציה משקולות באמצעות המחלקה varIdent של הפונקציה lme כדי לאפשר סטיות שונים עבור כל רמה של71,"Mtest"72. השתמשנו R חבילת 'phia'73 עבור ניתוח פוסט הוק עם תיקון הולם-Bonferroni של התנאים אינטראקציה משמעותית. בחנו הנחות מודל (Q/Q-חלקות, תמלוגים, תמלוגים נגד הערכים מצויד) עבור כל הדגמים חזותית74. אנחנו עוד יותר לעומת התפלגות שנשאר משהו נגד בהתפלגות רגילה באמצעות בדיקות נורמליות שפירו-וילק. ערכי-p נתון נחשבו משמעותית אם p ≤ 0.05.

התוצאות של ניתוח זה מקבלים איור 7 א , טבלאות 1 ו- 2. . מצאנו את האינטראקציה משמעותי בין M2 הניגוד "[שליטה >> (מקום, בשום נקודה)]" על העדפה ציונים של הגבר לא מועדפת מוקדמת (LME: df = 42, t =-2.74, p = 0.009). עם זאת, העדפה ציונים לא הושפעו על ידי מוקד SL הנשי. עוד פוסט הוק ניתוח של המונח אינטראקציה גילה הבדל משמעותי של העדפה עשרות הזכר לא מועדפת מוקדמת ב- M2 טיפול 1 (ספוט: df = 1, χ2 = 30.986, p < 0.001), טיפול 2 (בשום נקודה: df = 1, χ2 = p 19.957, < 0.001) אך לא עבור הפקד (χ2-מבחן: df = 1, χ2 = 2.747, p = 0.097). כאן, התוצאות שלנו להפגין את זה, כפי שחזיתי עבור MCC, העדפה ציונים לזכר מוקדמת לא מועדפת וירטואלי באופן משמעותי עלה מ M1 ל M2 אחרי הנקבות מוקד הציגה עם הבחירה חבר מדומה של נקבה מודל וירטואלי. מצאנו את האפקט הזה שני הטיפולים אך לא את הפקד בחירה עקביות. במקום זאת, הפקד שבו נקבה מודל לא היה נוכח במהלך תקופת תצפית, היו נקבות מוקד עקבי בבחירת חבר עבור זכר.

גורמים נמוך יותר הערכה העליון SE df ערך ה-t ערך-p
(חיתוך) 0.046 0.339 0.632 0.145 42 2,336 0.024
M2 0.207 0.296 0.384 0.044 42 6.750 < 0.001
לשלוט ← (מקום, בשום נקודה) -0.041 -0.012 0.017 0.014 41 -0.852 0.4
ספוט ← בשום נקודה -0.093 -0.043 0.008 0.025 41 -1,715 0.094
SL -0.012 -0.003 0.006 0.004 41 -0.747 0.459
M2 x [שליטה ← (מקום, בשום נקודה)] -0.148 -0.085 -0.023 0.031 42 -2,743 0.009
M2 x (במקום ← בשום נקודה) -0.067 0.042 0.15 0.054 42 0.777 0.441

טבלה 1. LME הערכות עבור אפקטים על העדפה ציונים לזכר מוקדמת לא מועדפת וירטואלי. ציון העדפה עבור מוקדמת לא מועדפת וירטואלי זכר הגירוי היה המשתנה התלוי בכל רחבי. בהינתן הם הערכות שגיאה סטנדרטית ±, מרווחי הביטחון העליונה/התחתונה, דרגות חופש, t- וערכי p-עבור כל גורם קבוע. הערכות intercept מייצגים גרנד הממוצע של כל הטיפולים. השוואות אורתוגונלית של טיפולים ניתנים. אם טיפולים משולבים בסוגריים, כלומר ערכים של טיפולים אלה משמשים את ההשוואות. הקטגוריה הפניית נקודת החיתוך עבור פקטור "M2" היא "M1". P-הערכים המשמעותיים (p < 0.05) מודפסים באותיות מודגשות. M1 = מבחן הקצין הראשון-הבחירה M2 = שנית חבר-ברירתי, SL = אורך רגיל של נקבות מוקד. תצפיות 90 עם n = 15 מוקד נקבות לכל טיפול.

גורם אקראי סטיה SD
מזהה ((חיתוך)) 1.464x10-10 1.21x10-5
ממסר 1.859x10-2 0.1364

בטבלה 2. LME סטיה מרכיבי זהות נשית מוקד בשונות ובסטיית תקן עבור האפקט אקראי "מוקד מזהה הנשי", שנשאר משהו ניתנות.

Figure 7
איור 7: תוצאות MCC וירטואלי להתנסות בתפעול דגם איכות נשית על ידי היעדרות חזותית או נוכחות של מקום gravid. (א) העדפה קולע למען הזכר גירוי וירטואלי לא מועדפת (מוקדמת) ב M1 ו- M2 עבור טיפולים והן את הפקד. (B) שינוי עדיפות מ- M1 M2 (העתקה הציון) לזכר מוקדמת לא מועדפת וירטואלי של הטיפולים ובשליטה. הקו המקווקו מתאר אין שינוי בהעדפות, ערכים חיוביים להראות עלייה בהעדפות, ערכים שליליים להראות ירידה העדפה. גריי נקודות ב A ו- B מתארים את הנתונים הגולמיים של כל נקבה מוקד. (ג) מספר ביטולי חבר-הבחירה ב- M2 עבור כל טיפול, הפקד. M1 = מבחן הקצין הראשון-הבחירה M2 = מבחן חבר-הבחירה השנייה, ns = לא משמעותי, * = p < 0.05, * * = p < 0.01, * * * = 0.001 < p. N = 15 טיפולים וגם את הפקד. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

לקבלת מידע נוסף אודות אם אפקט הצילום יכול להיות חזק יותר או פחות בהתאם הטיפול המתאים, השוואה בין העתקה ציונים ואת מספר ביטולי חבר-הבחירה בין הטיפולים השונים ובין הפקד היה ערכו. לפיכך, בהמשך ניתחנו אם הציונים העתקה של הזכר לא מועדפת קודמים היו שונים על פני טיפולים. הניקוד העתקה עבור זכר מתאר את השינוי הנשי העדפה זכר למן ההתחלה במבחן חבר-הבחירה השנייה. התוצאה העתקה מוגדרת על-ידי הציון העדפה של זכר במבחן השני חבר-בחירה פחות הציון הזה זכר אותו במבחן הקצין הראשון-בחירה. העתקה ציונים בטווח של-1 ו- +1, באפשרותך לציין ערכים חיוביים או שליליים שבה ערכים שליליים לתאר ירידה העדפת ערכים חיוביים עלייה העדפה זה זכר. כאן, אנחנו מתאימים LME עם העתקה ציון (copy_NP) כמו המשתנה התלוי, טיפול כגורם קבוע, מוקד SL נקבה כמו covariate ואזור של הנקבה מוקד ספוט כגורם אקראי. . ערכנו את ההשוואות אורתוגונלית שני זהה עבור "טיפול" כמתואר לעיל.

כפי שנראה ב איור 7 ב , טבלאות 3 ו- 4, מצאנו גבוה משמעותית העתקה הציון לזכר מוקדמת לא מועדפת בטיפולים עם נקבה מודל וירטואלי בהשוואה הפקד (LME: df = 20, t =-2.833, p = 0.01) אך לא משמעותית ההבדל בין הטיפולים (LME: df = 20, t = 0.618, p = 0.544). ציונים העתקה לא הושפעו על ידי מוקד SL הנשי.

גורמים קבועים נמוך יותר הערכה העליון SE df ערך ה-t ערך-p
(חיתוך) -0.889 -0.081 0.727 0.389 21 -0.208 0.837
לשלוט ← (מקום, בשום נקודה) -0.153 -0.088 -0.023 0.031 20 -2.833 0.01
ספוט ← בשום נקודה -0.079 0.033 0.146 0.054 20 0.618 0.544
SL -0.013 0.011 0.035 0.011 20 0.991 0.333

בטבלה 3. LME הערכות עבור אפקטים על העתקת ציונים לזכר מוקדמת לא מועדפת וירטואלי. העתקה הציון עבור מוקדמת לא מועדפת וירטואלי זכר הגירוי היה המשתנה התלוי בכל רחבי. בהינתן הם הערכות שגיאה סטנדרטית ±, מרווחי הביטחון העליונה/התחתונה, דרגות חופש, t- וערכי p-עבור כל גורם קבוע. הערכות intercept מייצגים גרנד הממוצע של כל הטיפולים. השוואות אורתוגונלית של טיפולים ניתנים. אם טיפולים משולבים בסוגריים, כלומר ערכים של טיפולים אלה משמשים את ההשוואות. P-הערכים המשמעותיים (p ≤ 0.05) מודפסים באותיות מודגשות. SL = אורך רגיל של נקבות מוקד. תצפיות 45 עם n = 15 מוקד נקבות לכל טיפול.

גורם אקראי סטיה SD
spot_area ((חיתוך)) 0.028 0.166
ממסר 0.075 0.275

בטבלה 4. LME סטיה מרכיבי מוקד פינת ספוט הנשי. בשונות ובסטיית תקן אקראית "spot_area", שנשאר משהו ניתנות.

בנוסף, בדקנו מספר נקבות מוקד זה הפוך את העדפותיהם חבר הראשונית ב- M2 שונה על פני טיפולים. חבר-הבחירה היפוך מוגדרת אם יש שינוי בההעדפה של זכר (מפחות מ 50% על יותר מ- 50% מהזמן בשני אזורי הבחירה) מהרגע הראשון במבחן חבר-הבחירה השנייה. חבר-הבחירה היפוך נספר כ- "כן" (העדפה זכר השתנה) או "לא" (העדפה זכר לא השתנה). כאן, ביצענו של פוסט הוק של pairwise G-מבחן באמצעות ה-R חבילת 'RVAideMemoire'75 עם תיקון עבור בדיקות מרובות. אנו להציג באיור 7C, הנקבות מוקד 11 מתוך 15 הפוך בחירתם חבר טיפול 1, עשר נקבות הפוך בחירתם חבר טיפול 2. מצד שני, רק שני ביטולי נצפו בפקד. ובכך, מספר נקבות מוקד זה להפוך את הבחירה הראשונית חבר שלהם לטובת הזכר לא מועדפת מוקדמת ב- M2 היה גדול יותר באופן משמעותי של שני הטיפולים בהשוואה הפקד (פוסט הוק pairwise G-test: המקום לעומת שליטה, p = 0.002; אין מקום לעומת שליטה, p = 0.003) אבל לא שונה באופן משמעותי בין טיפולים 1 ו- 2 (פוסט-הוק pairwise G-test: ספוט לעומת p נקודה, אין = 0.69).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

במקום gravid בנקבות מולי מפרש תוארה בעבר כדי לשמש כאמצעי הפריון פרסום כלפי זכרים conspecific59,60. אם מקום gravid עשויה לספק גם מידע לנשים conspecific בהקשר של הבחירה חבר היה לא נבדקה עד כה. במחקר במקרה הנוכחי, חקרנו את התפקיד הפוטנציאלי של מקום gravid כמקור מידע ציבורי להתבוננות נקבות conspecific בהקשר של MCC. המחקר שלנו מראה כי המקום gravid נראה לא להיות סימן של מודל איכות נשית לנשים מוקד חי כשתחליט להעתיק את הבחירה חבר של נקבה מודל וירטואלי עבור זכר וירטואלי. נקבות מוקד להעתיק את הבחירה של נקבה מודל וירטואלי עבור מוקדמת לא מועדפת וירטואלי לזכר ללא קשר אם הנקבה מודל היה מקום gravid או לא. מצאנו אין הבדל העתקה ציונים ולא מספר ביטולי חבר-בחירה בין שני הטיפולים, המציין כי ההעתקה האפקט היה גם חזק לא פחות אם הנקבה מודל היה מקום gravid או לא. כאשר אין מידע ציבורי סופק בפקד (אין דגם נשים הנוכחי), מוקד הנקבות היו עקביים בבחירת חבר. זה תומך כי השינוי הנצפה של העדפה בתוך הטיפולים יכול להיות מוסבר על ידי הנוכחות של מודל וירטואלי הנקבה בלבד, מתן מידע לציבור מספיק עבור העתקת הבחירה חבר של אחרים.

אף-על-פי הנוכחות הכללי ואת מידת המקום gravid נחשבים להיות מקושר מחזור הרבייה הנשית, עם המקום להיות הגדול ביותר לפני parturition הקטן ביותר או נעדר לאחר הלידה60, תצפיות חזותיות שיטתית של התפתחות כתמים gravid אצל נקבות בודדות עדיין נעדרים יתר על כן, וריאציה gravid בגודל נקודה יכולה להיות גבוהה בין נקבות בודדות עם כתמים גם מהיותו נעדר לחלוטין נקבות בוגרות, gravid60. למרות נקבות מולי מפרש קבלה קצר לאחר parturition59,76, הם מסוגלים לאחסן זרע במשך חודשים מספר57. לכן, נשים תמיד צריך להיות בררן בשביל באיכות הטובה ביותר. לגבי המחקר במקרה שלנו על MCC, וההשערות שנבדקו, אנו מסיקים כי מקום gravid לא ייתכן מחוון חוקי של מודל איכות נשית כדי התבוננות נקבות conspecific. מידע על מצב הרבייה נקבה מודל זה הנקבה התבוננות עלול יכול להשיג נראה לא חשוב בהחלטה כדי להעתיק את הבחירה שלה או לא, לפחות בקרב מפרש mollies.

ראוי לציין, המחקר שלנו מדגים הליך מאוד מתוקננת של מניפולציה חזותי של מידע ציבורי שמספק בניסויים MCC באמצעות המחשב אנימציה דגים. בניגוד מחקר מוקדם יותר על ידי בנסון77שהזריק חי דג עם קעקוע דיו כדי לתפעל כתמים gravid, השיטה שלנו מספק חלופה לגמרי בלתי-פולשנית מניפולציה חזותי. אנחנו מתוארות בפרוטרוט את ההליך כיצד ליצור ולהנפיש mollies מפרש וירטואלי ב- FishSim. בהמשך הראינו כיצד ניתן להשתמש הנפשה ממוחשבת לאמץ את ההליך ניסיוני של קלאסיקה MCC להתנסות עם הדגים וירטואלי עבור המצגת לקראת מבחן חי דג במצב בחירה בינארית.

בעקבות הפרוטוקול, אנו מזהים מספר שלבים קריטיים שדורשים תשומת לב מסוימת כדי להבטיח את הטיפול הנכון של ערכת הכלים שלנו, ההצלחה של הניסוי. מאז המחשב הנפשות הם יצר והציג באמצעות מחשבים, התקני תצוגה כגון צגי מחשב, הציוד הטכני תמיד צריך להיות מספיק טוב כדי להבטיח עיבוד חלקה של תהליך העבודה הכללי והפעלת, והכי חשוב, אנימציה (שלבים 2, 3 ו- 5). בעת שימוש שני צגים או יותר עבור המצגת של גירויים, מפרט טכני שלהם צריכים להיות זהים. בעת שימוש בתוכנה שלנו, רזולוציית הצג קבע צריך תמיד להיות זה של המצגת צגים (ראה שלב 1.2.1.). הגדרת האירוע (שלב 1.2.), כמו גם את העיצוב (צעדים 1.3. ו 1.4.), אנימציה (שלב 2) של גירויים וירטואליים תמיד צריכים להיעשות על צג מאוחר יותר להשתמש למצגת גירוי במהלך ניסויים כדי להבטיח את המידות המתאימות.

ב פרוטוקול זה, אנחנו מתרכזים על הצעדים הדרושים כדי ליצור ערכה אחת של דגים גירויים (צעדים 1.3. ו 1.4.) לשימוש במשפט אחד של הטיפול (שלב 5). כאן, אנחנו רוצים הצבע כי זה חשוב ליצירת מספר גירויים דגים שונים ו/או הנפשות בחשבון pseudoreplication15,78,79 אשר משפיע על פרשנות אפשרית של הנתונים שהתקבל במהלך הניסויים. עם ערכת הכלים שלנו, קל ליצור שונות דגים גירויים המציע אפשרויות לשימוש מערכת ייחודית של גירויים בכל ניסוי ניסיוני. באופן כללי המספר הכולל של גירויים הדרוש תלוי גודל המדגם המיועד עבור כל טיפול (ראו סעיף "נציג תוצאות" למידע על המחקר במקרה שלנו).

עם ערכת הכלים שלנו, רצינו לספק תהליך מהיר, קלה ליצירה הנפשה באמצעות בקר משחק וידאו (שלב 2). ובכך, שחייה כללי ההתנהגות של הדג וירטואלי נוצר באופן אוטומטי, בהתבסס על קטעי וידאו של שחייה חיים מפרש mollies80. התנהגות השחייה (כולל תנועה של סנפירים, gonopodium), לכן, מכוון לשימוש עם גירויים וירטואליים של מפרש mollies בדגים בפרט ושל מניבי לחיות באופן כללי. מלבד מניבי חיים דגים, תבנית נוספים עבור סטיקלבאק spined – שלושה מספק פונקציות נוספות לתנועה ספציפית, כגון העלאת/הורדת של עמוד השדרה הגבי ו הגחון.

פונקציות אנימציה כעת שמספקת את ערכת הכלים שלנו לא יהיה מספיק עבור כל תבנית התנהגותית וכל מיני דגים. זה, אולם, תלוי המשתמש, תלויה שאלת המחקר נבדק. עוד, אנימציה עם FishSteering (שלב 2) צריך קצת תרגול מראש להתרגל אל הפונקציות של בקר המשחקים. לכן, התהליך אנימציה היא כנראה השלב הכי הגוזלות זמן של הפרוטוקול. בקר של מותג שונים עשויים לשמש כאן אבל הפונקציונליות לא יהיה מלוטש, הפונקציות לחצן (שניתנו במדריך למשתמש) עשוי להיות שונה או נעדר לחלוטין. במהלך תהליך אנימציה, תכונה אחת בלבד של גירוי וירטואלי (למשל, מיקום, סנפירים, gonopodium) יכול להיות אנימציה בכל פעם. קודם כל, תנועת שחייה (מיקום) ואת תכונות נוספות לאחר מכן (למשל, סנפירים) ניתן להוסיף באופן עצמאי. אנו ממליצים לשמור כל שלב בנפרד. זה מציע יתרון כי למשתמש יש האפשרות לחזור לגירסה מוקדמת יותר של ההנפשה כדי לשנות תכונה ספציפית, לדוגמה שומר את הנתיב שחייה קבוע אך שינוי תנועת לסנפיר בהשוואה לגירסה קודמת. במיוחד בשעת הוספת הנפשה דג אחד או יותר (שלב 2.2.), סדר אילו דגים מונפשים גירויים חשוב מאוד וגם צריך להיקבע מראש. כאן, ייתכן שיהיה זה יעיל להפנות הביולוגיה של המין שנבדקו. במחקר במקרה שלנו, אנחנו מדומה את התנהגות חיזור mollies מפרש שבו גבר בדרך כלל עוקב של נקבה81. לפיכך, אנו קודם יצר את הנתיב שחייה של הנקבה וירטואלי, הוסיף את הנתיב עבור הזכר וירטואלי על ידי ביצוע הנקבה.

בעת הפעלת ההליך ניסיוני (שלב 5) העיתוי חיונית להצלחת הניסוי. הזמנים / משכים אנחנו מתייחסים בפרוטוקול (שלב 5) נגזר ממחקרים קודמים עם מפרש mollies. הם צריכים להיחשב הצעות לא מחויבות להצלחה הכללית ניסיוני אבל, בכל זאת, שיש בחוזקה אחריו במהלך ההליך. זמן הסתגלות עשוי להשתנות בין זני דגים אפילו אנשים, בדרך כלל כל עוד הדגים מוקד צריך לחקור את המיכל כל המבחן, להתאקלם לסביבתו החדשה. אנחנו נקבע את אורך משך הפסקה המתאימה במסלולי הכשרה של ההליך ניסיוני. ההשהיה צריך להיות לפחות עוד הפעם צורך לתפוס את הדג עם הגליל, כמו גם ובדרך מבחן טנק ומהמחשב מבצעית כדי לשחרר את הדג מן הגליל. כאן, פעמים יכול להשתנות בהתאם ניסיוני המקרה הספציפי בכל מעבדה, מיני דגים שנבדקו. בכל מקרה, הנסיין יכול לשנות בנפרד פעמים / משכי זמן גם על ידי הגדרת זמנים אחרים ב- FishPlayer (ראה שלב 3.1. 3.) או על-ידי יצירת רצפי הנפשה באורך שונה (ראה שלב 2.1).

הנסיין יכול לשפר מדידה של האגודה זמן עבור כל בדיקה מאטה-הבחירה על ידי יישום מערכת מעקב אוטומטי, למרות שזה צריך להיות מסוגל מעקב בזמן אמת. כאן, אנחנו גם רוצים להצביע כי אין שום אפשרות שיש משקיף עיוור ומכאן עיוור ניתוח כאשר בעקבות ההליך לבדיקת MCC. מאז הנסיין לא יכול לדעת אילו וירטואלי גירוי זכר להיות מועדף על ידי הנקבה מוקד לפני בדיקה, הוא או היא זקוקה להיות מודעים לבחירה של הדג מוקד כדי לשנות את הסדר של רצפי הנפשה בהתאם (ראה שלבים 3.2 ו- 5.10).

פרוטוקול שנתאר כאן הוא הספציפי שלנו עיצוב מחקר על MCC מפרש mollies. עם זאת, ערכת הכלים יכול לשמש גם בשילוב עם עיצובים ניסיוניים אחרים עם עד ארבעה צגים עבור המצגת. באופן כללי, כלים הנפשה המחשב מציעים מגוון רחב של פתרונות כדי ללמוד על התנהגות דגים כמו התאומה שאלות שונים הבחירה, shoaling החלטות או איתור טורף-טרף, באמצעות גירויים חזותיים מלאכותי. כללי טכני הרעיוני שיקולים לשימוש של הנפשה ממוחשבת בחקר התנהגות בבעלי חיים צריך להעריך בזהירות לפני השימוש בו ניסויים2,15. הכי חשוב בהחלטה ניתן ליישם גישות אנימציה מחשב במחקר מתייחסת היכולות חזותי של מיני דגים שנבדקו, בין אם הוא מגיב באופן טבעי לכיוון גירויים וירטואליים המוצג על צג מסכים. במיוחד, בעת בדיקת ההשפעה של צבע היבטים, יצוין כי צג מסכי רק מתארים את הצבעים כערכי RGB, כי זה עלול להכשיל או להגביל את אפשרויות המחקר, למרות פלט צבע RGB אכן עשוי להיות מותאם82. עבור כמה זני דגים, מגבלה בהחלט ייתכן כי צגים לא פולטות אורכי גל UV או, מצד שני, סוגי צגים מסוימים הם מאוד מקוטב שעלול להוות מגבלה עם דג רגיש לאור מקוטב לדוגמה בשאלות של חבר הבחירה83. לכן, אימות על האפקטיביות של הגירויים שהוצגו כמו אנימציות מחשב הכרחי לפני בדיקת כל השערות2,12,15,84,85.

בעתיד, פיתוחים חדשים בזיהוי בעלי חיים מעקב ופעולה. יהיה אפשר ליצור גירויים וירטואלי אינטראקטיבי זה להגיב בזמן אמת לקראת חיים דגים, לדמות התנהגות המתאים להעלות ריאליזם להתבוננות דגים 86. הודות המודולריות של האבחון כבסיס, להתקנים חיצוניים, כגון מצלמות אולי ניתן לשלב את ערכת הכלים, בתנאי כי למשתמש יש ידע בתכנות נאותה. ניסיון מוצלח ראשון הראה כי FishSim באופן כללי ניתן להשתמש כדי לדמות הדגים וירטואלי אינטראקטיבי גירויים על ידי הרחבה של תלת-ממד בזמן אמת מעקב המערכת-87,-88,-89. במהלך האירוע תקשורת מדע "מולי יודעת הכי טוב" (https://virtualfishproject.wixsite.com/em2016-fisch-orakel), היינו מסוגלים להפגין כי ניתן לתכנת הדגים וירטואלי בצע חי דג נקודתית במסך ולבצע התנהגות חיזור לפי אלגוריתם מוגדר מראש. עוד יותר, כגון מערכות מעקב בזמן אמת אחר יכול לשמש כדי למדוד זמן שיוך אוטומטי כדי לשפר את התהליך הניסיוני. תכונה זו אינה כלולה עדיין הגירסה הנוכחית של FishSim אך כפוף פיתוח עתידי.

לסיכום, השימוש של הנפשה ממוחשבת בחקר התנהגות בבעלי חיים היא גישה מבטיחה כאשר שיטות קונבנציונליות ידרוש טיפול פולשני של בעלי חיים כדי לתפעל את הביטוי של תכונה חזותית או תבנית התנהגותית. מניפולציה הנפשות המחשב מאפשר רמה גבוהה של שליטה תקינה לעומת באמצעות מבחן חי דג, במיוחד, שכן היא מציעה גם פתרונות לתמרן התנהגות אשר הוא מוגבל מאוד או אפילו בלתי אפשרי ב חי דג. עוד יותר, עולה בקנה אחד עם עקרון 3Rs דומה הנחיות השימוש בבעלי חיים למחקר והוראה90,91ו, טכניקה זו נושא פוטנציאל 'להקטין', 'החלף' חיה מבעלי החיים כמו גם לגבי 'צמצום' ניסיוני נהלים במחקר.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgments

עבודה זו נתמכה על ידי DFG פתוח דויטשה (אינטרנט 1531/12-1 קילוואט, ס ג) ו- KU 689/11-1 KDK, ק מ, JMH. אנו מודים התוכנית גרמניה DAAD עליית מתן וארגון התמחות מחקר לתואר ראשון בין ג ל- DB (קרנות-ID: 57346313). אנחנו מודים Mitacs למימון DB עם פרס ההתמחות המחקר עלייה-Globalink (FR21213). נבקשך תודה אהרון Berard שהזמנת אותנו להכיר FishSim מספר הקוראים של יופיטר, אלישיה DSouza, כמו גם שלושה סוקרים אנונימי על הערותיהם יקר על גירסה קודמת של כתב היד.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Hardware
2x 19" Belinea LCD displays Belinea GmbH, Germany Model 1970 S1-P 1280 x 1024 pixels resolution
1x 24" Fujitsu LCD display Fujitsu Technology Solutions GmbH, Germany Model B24-8 TS Pro 1920 x 1080 pixels resolution
Computer Intel Core 2 Quad CPU Q9400 @ 2.66GHz x 4, GeForce GTX 750 Ti/PCIe/SSE2, 7.8 GiB memory, 64-bit, 1TB; keyboard and mouse
SONY Playstation 3 Wireless Controller Sony Computer Entertainment Inc., Japan Model No. CECHZC2E USB-cable for connection to computer
Glass aquarium 100 cm x 40 cm x 40 cm (L x H x W)
Plexiglass cylinder custom-made 49.5 cm height, 0.5 cm thickness, 12 cm diameter; eight small holes (approx. 5 mm diameter) drillt close to the end of the cylinder lower the amount of water disturbance while releasing the fish
Gravel
2x OSRAM L58W/965 OSRAM GmbH, Germany Illumination of the experimental setup
2x Stopwatches
Name Company Catalog Number Comments
Software
ubuntu 16.04 LTS Computer operating system; Download from: https://www.ubuntu.com/
FishSim Animation Toolchain v.0.9 Software download and user manual (PDF) from: https://bitbucket.org/EZLS/fish_animation_toolchain
GIMP Gnu Image Manipulation Program (version 2.8.22) Download from: https://www.gimp.org/

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Witte, K., Gierszewski, S., Chouinard-Thuly, L. Virtual is the new reality. Current Zoology. 63, (1), 1-4 (2017).
  2. Chouinard-Thuly, L., et al. Technical and conceptual considerations for using animated stimuli in studies of animal behavior. Current Zoology. 63, (1), 5-19 (2017).
  3. Basolo, A. L. Female preference for male sword length in the green swordtail, Xiphophorus helleri (Pisces: Poeciliidae). Animal Behaviour. 40, (2), 332-338 (1990).
  4. Rosenthal, G. G., Evans, C. S. Female preference for swords in Xiphophorus helleri reflects a bias for large apparent size. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 95, (8), 4431-4436 (1998).
  5. Schlupp, I., Waschulewski, M., Ryan, M. J. Female preferences for naturally-occurring novel male traits. Behaviour. 136, (4), 519-527 (1999).
  6. Campbell, M. W., Carter, J. D., Proctor, D., Eisenberg, M. L., de Waal, F. B. M. Computer animations stimulate contagious yawning in chimpanzees. Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 276, (1676), 4255-4259 (2009).
  7. Woo, K. L., Rieucau, G. The importance of syntax in a dynamic visual signal: recognition of jacky dragon displays depends upon sequence. Acta Ethologica. 18, (3), 255-263 (2015).
  8. Balzarini, V., Taborsky, M., Villa, F., Frommen, J. G. Computer animations of colour markings reveal the function of visual threat signals in Neolamprologus pulcher. Current Zoology. 63, (1), 45-54 (2017).
  9. Tedore, C., Johnsen, S. Visual mutual assessment of size in male Lyssomanes viridis jumping spider contests. Behavioral Ecology. 26, (2), 510-518 (2015).
  10. Watanabe, S., Troje, N. F. Towards a “virtual pigeon”: a new technique for investigating avian social perception. Animal Cognition. 9, (4), 271-279 (2006).
  11. Culumber, Z. W., Rosenthal, G. G. Mating preferences do not maintain the tailspot polymorphism in the platyfish Xiphophorus variatus. Behavioral Ecology. 24, (6), 1286-1291 (2013).
  12. Gierszewski, S., Müller, K., Smielik, I., Hütwohl, J. -M., Kuhnert, K. -D., Witte, K. The virtual lover: variable and easily guided 3D fish animations as an innovative tool in mate-choice experiments with sailfin mollies - II. Validation. Current Zoology. 63, (1), 65-74 (2017).
  13. Thurley, K., Ayaz, A. Virtual reality systems for rodents. Current Zoology. 63, (1), 109-119 (2017).
  14. Stowers, J. R., et al. Virtual reality for freely moving animals. Nature. 14, (10), 995 (2017).
  15. Powell, D. L., Rosenthal, G. G. What artifice can and cannot tell us about animal behavior. Current Zoology. 63, (1), 21-26 (2017).
  16. Müller, K., Smielik, I., Hütwohl, J. -M., Gierszewski, S., Witte, K., Kuhnert, K. -D. The virtual lover: variable and easily guided 3D fish animations as an innovative tool in mate-choice experiments with sailfin mollies-I. Design and implementation. Current Zoology. 63, (1), 55-64 (2017).
  17. Veen, T., et al. anyFish: an open- source software to generate animated fish models for behavioural studies. Evolutionary Ecology Research. 15, (3), 361-375 (2013).
  18. Ingley, S. J., et al. anyFish 2. 0: An open-source software platform to generate and share animated fish models to study behavior. SoftwareX. 3, 13-21 (2015).
  19. Bakker, T. C. M., Pomiankowski, A. The genetic basis of female mate preferences. The Journal of Evolutionary Biology. 8, (2), 129-171 (1995).
  20. Andersson, M., Simmons, L. W. Sexual selection and mate choice. Trends in Ecology & Evolution. 21, (6), 296-302 (2006).
  21. Danchin, É, Giraldeau, L. -A., Valone, T. J., Wagner, R. H. Public information: From nosy neighbors to cultural evolution. Science. 305, (5683), 487-491 (2004).
  22. Pruett-Jones, S. Independent Versus Nonindependent Mate Choice: Do Females Copy Each Other? The American Naturalist. 140, (6), 1000-1009 (1992).
  23. Witte, K., Kniel, N., Kureck, I. M. Mate-choice copying: Status quo and where to go. Current Zoology. 61, (6), 1073-1081 (2015).
  24. Witte, K., Nöbel, S. Learning and Mate Choice. Fish Cognition and Behavior. Brown, C., Laland, K. N., Krause, J. Blackwell Publishing Ltd. 81-107 (2011).
  25. Waynforth, D. Mate Choice Copying in Humans. Human nature. 18, (3), 264-271 (2007).
  26. Galef, B. G., White, D. J. Evidence of social effects on mate choice in vertebrates. Behavioural Processes. 51, (1-3), 167-175 (2000).
  27. Kniel, N., Dürler, C., Hecht, I., Heinbach, V., Zimmermann, L., Witte, K. Novel mate preference through mate-choice copying in zebra finches: sexes differ. Behavioral Ecology. 26, (2), 647-655 (2015).
  28. Kniel, N., Schmitz, J., Witte, K. Quality of public information matters in mate-choice copying in female zebra finches. Frontiers in Zoology. 12, 26 (2015).
  29. Kniel, N., Müller, K., Witte, K. The role of the model in mate-choice copying in female zebra finches. Ethology. 123, (6-7), 412-418 (2017).
  30. Mery, F., et al. Public Versus Personal Information for Mate Copying in an Invertebrate. Current Biology. 19, (9), 730-734 (2009).
  31. Dagaeff, A. -C., Pocheville, A., Nöbel, S., Loyau, A., Isabel, G., Danchin, E. Drosophila mate copying correlates with atmospheric pressure in a speed learning situation. Animal Behaviour. 121, 163-174 (2016).
  32. Monier, M., Nöbel, S., Isabel, G., Danchin, E. Effects of a sex ratio gradient on female mate-copying and choosiness in Drosophila melanogaster. Current Zoology. 64, (2), 251-258 (2018).
  33. Dugatkin, L. A., Godin, J. -G. J. Reversal of female mate choice by copying in the guppy (Poecilia reticulata). Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 249, 179-184 (1992).
  34. Widemo, M. S. Male but not female pipefish copy mate choice. Behavioral Ecology. 17, (2), 255-259 (2006).
  35. Heubel, K. U., Hornhardt, K., Ollmann, T., Parzefall, J., Ryan, M. J., Schlupp, I. Geographic variation in female mate-copying in the species complex of a unisexual fish, Poecilia formosa. Behaviour. 145, (8), 1041-1064 (2008).
  36. Bierbach, D., et al. Male fish use prior knowledge about rivals to adjust their mate choice. Biology Letters. 7, (3), 349-351 (2011).
  37. Munger, L., Cruz, A., Applebaum, S. Mate choice copying in female humpback limia (Limia nigrofasciata, family Poeciliidae). Ethology. 110, (7), 563-573 (2004).
  38. Frommen, J. G., Rahn, A. K., Schroth, S. H., Waltschyk, N., Bakker, T. C. M. Mate-choice copying when both sexes face high costs of reproduction. Evol Ecol. 23, (3), 435-446 (2009).
  39. Witte, K., Ryan, M. J. Mate choice copying in the sailfin molly, Poecilia latipinna, in the wild. Animal Behaviour. 63, (5), 943-949 (2002).
  40. Goulet, D., Goulet, T. L. Nonindependent mating in a coral reef damselfish: evidence of mate choice copying in the wild. Behavioral Ecology. 17, (6), 998-1003 (2006).
  41. Alonzo, S. H. Female mate choice copying affects sexual selection in wild populations of the ocellated wrasse. Animal Behaviour. 75, (5), 1715-1723 (2008).
  42. Godin, J. -G. J., Hair, K. P. E. Mate-choice copying in free-ranging Trinidadian guppies (Poecilia reticulata). Behaviour. 146, 1443-1461 (2009).
  43. Nordell, S. E., Valone, T. J. Mate choice copying as public information. Ecology Letters. 1, (2), 74-76 (1998).
  44. Vukomanovic, J., Rodd, F. H. Size-Dependent Female Mate Copying in the Guppy (Poecilia reticulata): Large Females are Role Models but Small Ones are not. Ethology. 113, (6), 579-586 (2007).
  45. Dugatkin, L. A., Godin, J. -G. J. Female mate copying in the guppy (Poecilia reticulata): age-dependent effects. Behavioral Ecology. 4, 289-292 (1993).
  46. Amlacher, J., Dugatkin, L. A. Preference for older over younger models during mate-choice copying in young guppies. Ethology Ecology & Evolution. 17, (2), 161-169 (2005).
  47. Hill, S. E., Ryan, M. J. The role of model female quality in the mate choice copying behaviour of sailfin mollies. Biology Letters. 2, (2), 203-205 (2006).
  48. Gierszewski, S., Keil, M., Witte, K. Mate-choice copying in sailfin molly females: public information use from long-distance interactions. Behavioral Ecology and Sociobiology. 72, (2), 26 (2018).
  49. Schlupp, I., Marler, C., Ryan, M. J. Benefit to male sailfin mollies of mating with heterospecific females. Science. 263, (5145), 373-374 (1994).
  50. Schlupp, I., Ryan, M. J. Male sailfin mollies (Poecilia latipinna) copy the mate choice of other males. Behavioral Ecology. 8, (1), 104-107 (1997).
  51. Witte, K., Ryan, M. J. Male body length influences mate-choice copying in the sailfin molly Poecilia latipinna. Behavioral Ecology. 9, (5), 534-539 (1998).
  52. Witte, K., Ueding, K. Sailfin molly females (Poecilia latipinna) copy the rejection of a male. Behavioral Ecology. 14, (3), 389-395 (2003).
  53. Verzijden, M. N., ten Cate, C., Servedio, M. R., Kozak, G. M., Boughman, J. W., Svensson, E. I. The impact of learning on sexual selection and speciation. Trends in Ecology & Evolution. 27, (9), 511-519 (2012).
  54. Varela, S. A. M., Matos, M., Schlupp, I. The role of mate-choice copying in speciation and hybridization. Biological Reviews. 93, (2), 1304-1322 (2018).
  55. Nöbel, S., Danchin, E., Isabel, G. Mate-copying for a costly variant in Drosophila melanogaster females. Behavioral Ecology. ary095 (2018).
  56. Norazmi-Lokman, N. H., Purser, G. J., Patil, J. G. Gravid Spot Predicts Developmental Progress and Reproductive Output in a Livebearing Fish, Gambusia holbrooki. PLoS One. 11, (1), e0147711 (2016).
  57. Constantz, G. D. Reproductive biology of poeciliid fishes. Ecology and Evolution of livebearing fishes (Poeciliidae). Meffe, G. K., Snelson, F. F. Prentice Hall. 33-50 (1989).
  58. Peden, A. E. Variation in Anal Spot Expression of Gambusiin Females and Its Effect on Male Courtship. Copeia. 1973, (2), 250-263 (1973).
  59. Farr, J. A., Travis, J. Fertility Advertisement by Female Sailfin Mollies, Poecilia latipinna (Pisces: Poeciliidae). Copeia. 1986, (2), 467-472 (1986).
  60. Sumner, I. T., Travis, J., Johnson, C. D. Methods of Female Fertility Advertisement and Variation among Males in Responsiveness in the Sailfin Molly (Poecilia latipinna). Copeia. 1994, (1), 27-34 (1994).
  61. Witte, K., Noltemeier, B. The role of information in mate-choice copying in female sailfin mollies (Poecilia latipinna). Behavioral Ecology and Sociobiology. 52, (3), 194-202 (2002).
  62. R Development Core Team. R: a language and environment for statistical computing. Available from: http://www.r-project.org (2015).
  63. Bischoff, R. J., Gould, J. L., Rubenstein, D. I. Tail size and female choice in the guppy (Poecilia reticulata). Behavioral Ecology and Sociobiology. 17, (3), 253-255 (1985).
  64. Forsgren, E. Predation Risk Affects Mate Choice in a Gobiid Fish. The American Naturalist. 140, (6), 1041-1049 (1992).
  65. Berglund, A. Risky sex: male pipefishes mate at random in the presence of a predator. Animal Behaviour. 46, (1), 169-175 (1993).
  66. Kodric-Brown, A. Female choice of multiple male criteria in guppies: interacting effects of dominance, coloration and courtship. Behavioral Ecology and Sociobiology. 32, (6), 415-420 (1993).
  67. Witte, K., Klink, K. B. No pre-existing bias in sailfin molly females, Poecilia latipinna, for a sword in males. Behaviour. 142, (3), 283-303 (2005).
  68. Nöbel, S., Witte, K. Public Information Influences Sperm Transfer to Females in Sailfin Molly Males. PLoS One. 8, (1), e53865 (2013).
  69. Pinheiro, J., Bates, D., DebRoy, S., Sarkar, D., Team, R. C. nlme: Linear and Nonlinear Mixed Effects Models. Available from: http://cran.r-project.org/package=nlme (2015).
  70. Crawley, M. J. The R Book. John Wiley & Sons, Ltd. (2007).
  71. Pinheiro, J. C., Bates, D. M. Mixed-Effects Models in S and S-PLUS. Springer-Verlag. New York. (2000).
  72. Zuur, A., Ieno, E. N., Walker, N., Saveliev, A. A., Smith, G. M. Mixed Effects Models and Extensions in Ecology with R. Springer. New York. (2009).
  73. De Rosario-Martinez, H. phia: Post-Hoc Interaction Analysis. Available from: https://cran.r-project.org/web/packages/RVAideMemoire (2015).
  74. Korner-Nievergelt, F., Roth, T., von Felten, S., Guélat, J., Almasi, B., Korner-Nievergelt, P. Bayesian Data Analysis in Ecology Using Linear Models with R, BUGS, and Stan. Elsevier Science. (2015).
  75. Hervé, M. RVAideMemoire: Testing and Plotting Procedures for Biostatistics. Available from: https://cran.r-project.org/package=RVAideMemoire%0A (2017).
  76. Travis, J. Ecological genetics of life history traits in poeciliid fishes. Ecology and Evolution of livebearing fishes (Poeciliidae). Meffe, G. K., Snelson, F. F. Prentice Hall. 185-200 (1989).
  77. Benson, K. E. Enhanced Female Brood Patch Size Stimulates Male Courtship in Xiphophorus helleri. Copeia. 2007, (1), 212-217 (2007).
  78. Hurlbert, S. H. Pseudoreplication and the design of ecological field experiments. Ecological Monographs. 54, (2), 187-211 (1984).
  79. McGregor, P. K. Playback experiments: design and analysis. Acta Ethologica. 3, (1), 3-8 (2000).
  80. Smielik, I., Müller, K., Kuhnert, K. D. Fish motion simulation. ESM 2015-European Simulation and Modelling (EUROSIS) Conference Proc. 392-396 (2015).
  81. Baird, R. C. Aspects of social behavior in Poecilia latipinna (Lesueur). Revista de Biología Tropical. 21, (2), 399-416 (1974).
  82. Tedore, C., Johnsen, S. Using RGB displays to portray color realistic imagery to animal eyes. Current Zoology. 63, (1), 27-34 (2017).
  83. Calabrese, G. M., Brady, P. C., Gruev, V., Cummings, M. E. Polarization signaling in swordtails alters female mate preference. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111, (37), 13397-13402 (2014).
  84. Qin, M., Wong, A., Seguin, D., Gerlai, R. Induction of social behavior in zebrafish: live versus computer animated fish as stimuli. Zebrafish. 11, (3), 185-197 (2014).
  85. Scherer, U., Godin, J. -G. J., Schuett, W. Validation of 2D-animated pictures as an investigative tool in the behavioural sciences A case study with a West African cichlid fish, Pelvicachromis pulcher. Ethology. 123, (8), 560-570 (2017).
  86. Butkowski, T., Yan, W., Gray, A. M., Cui, R., Verzijden, M. N., Rosenthal, G. G. Automated interactive video playback for studies of animal communication. The Journal of Visualized Experiments. (48), 2374 (2011).
  87. Müller, K., Gierszewski, S., Witte, K., Kuhnert, K. -D. Where is my mate? Real-time 3-D fish tracking for interactive mate-choice experiments. ICPR 2016-23rd International Conference for Pattern Recognition; VAIB 2016, Proc. 1-5 (2016).
  88. Müller, K., Schlemper, J., Kuhnert, L., Kuhnert, K. -D. Calibration and 3D ground truth data generation with orthogonal camera-setup and refraction compensation for aquaria in real-time. IEEE 2014 International Conference on Computer Vision Theory and Applications (VISAPP). 3, 626-634 (2014).
  89. Müller, K., Hütwohl, J. M., Gierszewski, S., Witte, K., Kuhnert, K. D. Fish Motion Capture with Refraction Synthesis. Journal of WSCG. In press (2018).
  90. ASAB Guidelines for the treatment of animals in behavioural research and teaching. Animal Behaviour. 135, I-X (2018).
  91. Russell, W. M. S., Burch, R. L. The Principles of Humane Experimental Technique. Methuen and Co. Ltd. London. (1959).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics