מזהה הקמת אספקת דם משותף בעכברים Parabiotic על ידי הזרקת הסוכר קאודל וריד

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

כאן אנו מתארים שיטה חדשה של זיהוי הקמת מוצלח של זרימת דם משותפת של שני parabits באמצעות הזרקת וריד caudal של גלוקוז, הגורם נזק מינימלי והוא לא קטלני לתוך parabionts.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Liu, X., Bai, X., Li, M., Li, H., Zhang, Y., Yang, B. Detecting Establishment of Shared Blood Supply in Parabiotic Mice by Caudal Vein Glucose Injection. J. Vis. Exp. (156), e60411, doi:10.3791/60411 (2020).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Parabiosis היא שיטה ניסיונית לשילוב בניתוח שתי בעלי חיים מקבילים לאורך ציר האורך של הגוף. אנו מציגים פרוטוקול לגילוי הקמתה המוצלחת של כימריזם דם בפראביטס על ידי הזרקת וריד caudal של גלוקוז. . עכברים מיוטיים נבנו גלוקוז הוזרק לתוך העכבר התורם דרך הווריד הזנב, ותנודות של רמת הגלוקוז בדם נמדד בשני העכברים באמצעות גלומוטר דם בנקודות זמן שונות. התוצאות שלנו הראו כי לאחר הזרקת גלוקוז, רמת הגלוקוז בדם בעכברים תורמים גדל בחדות אחרי 1 דקות ירד לאט לאחר מכן. בינתיים, רמת הגלוקוז בדם של עכברים הנמען לשיאה 15 דקות לאחר ההזרקה. תוצאות דומות הושגו עם אוונס כחול, משמש שליטה חיובית עבור גלוקוז. התנודות הסינכרוניות של רמות הגלוקוז בדם מעידות על כך שזרימת הדם בין שני העכברים הוקמה בהצלחה.

Introduction

Parabiosis היא שיטת דוגמנות שבה שני אורגניזמים חיים מחוברים יחד בניתוח ולהתפתח כמערכת פיזיולוגית אחת עם מערכת משותפת מחזור הדם1. דגמים כאלה שימשו באופן נרחב לחקר הפיזיולוגיה בשל היתרון כי החומרים המיוצרים על ידי אדם אחד יכולים לפעול על שתי בעלי חיים באותו זמן דרך מערכת הדם המשותפת. מאז אמצע 1800, כאשר הניסויים parabiotic היו חלוץ על ידי פול ברט2, השיטות לבניית מודלים parabiotic הפכו סטנדרטיים. עם זאת, שיטה פשוטה ונוחה לאימות הקמתה המוצלחת של כימריזם דם חסר. נמסר כי מחזור הזרימה ניתן להעריך בהצלחה על ידי intraperitoneally הזרקת 0.5% הצבע הכחול אוונס באחד הפראביבטים ואחריו מדידה של בספיגת כחול אוונס בדם של שני הפראביב עם קורא מיקרולוח3. שיטה נוספת מחייבת גזע עכבר מסוים המכיל CD 45.1+-ו-cd 45.2+-מונוציטים עם התווית בכל מבנה. Cy, תא הציטונסה משמש לאחר מכן כדי לקבוע כמינות דם על ידי מדידת תדירות של שני סמנים ב מונוציטים מן הטחול או הדם4. עם זאת, שיטות אלה הן לעתים קרובות קטלני או מסורבל לבעלי חיים, ושיטה בטוחה ופשוטה לאימות מהיר ואמין של מודלים parabiotic הוא רצוי מאוד. במחקר זה, הקמנו שיטה חדשה למטרה זו, אשר אומתה במודל העכבר של parabiosis. הריכוז של גלוקוז בדגימות דם שנלקח מווריד הזנב נמדד באמצעות גלוקומיטר, והתבנית של שינויים ברמת הגלוקוז בעכברי התורם והנמען נחשבת אינדיקציה לצ המחזור. קראנו לשיטה זו את שיטת התנודות בגלוקוז. היישום של שיטת אימות זו אינו מוגבל לעכברים, אך ניתן להרחיב אותם למודלים פתולוגיים שונים, למעט אלה עם חוסר התקנה רציני של מטבוליזם הגלוקוז. ההליך הוא פשוט, הצלת זמן, ובטוח.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

כל ההליכים הכרוכים בבעלי חיים והטיפול בהם אושרו על-ידי שימוש בבעלי חיים מוסדיים ובוועדת הרפואה של חרבין.

הערה: הכלים והציוד הנדרשים לשיטה מפורטים בטבלת החומרים.

1. הכנת חומרים ובעלי חיים

  1. סדר C57BL/6 עכברים זכרים עם משקל בין 20 g-25 גרם מספק בעלי חיים סטנדרטיים המעבדה.
  2. הבית העכברים במחזור של 12 h החושך: 12 h החשיכה ב -24 עד 26 ° צ' עם גישה בליבינום למים ומזון.

2. פרביוזיס

  1. באמצעות הזרקה של 20 גרם/L 2, 2, 2-tribromoethanol בריכוז של 0.1 mL/10 g. לאשר הרגעה הולמת כפי שמצוין על ידי הרפיה שריר, נשימה איטית ויציבה, אובדן רפלקס העור, היעלמות רפלקס הקרנית.
  2. החלת משחה אופטלמולוגית עם טיפ-עצה כדי למנוע עיניים יבשות.
  3. בצע את ההליך parabiosis כפי שמתואר בעבר5.
    1. מניחים את העכברים במצב פרקדן. לגלח ביסודיות את הצד השמאלי של עכבר אחד בצד ימין של העכבר השני החל כ 1 ס מ מעל המרפק ל 1 ס מ מתחת לברך עם מכונת גילוח חשמלית. השתמש קרם דפילציה כדי לנקות לחלוטין את הפרווה על העור מגולח.
    2. לנגב את האזורים המגולחים. עם שפתי-האור מניחים את העכברים על משטח מחומם מכוסה על ידי כרית סטרילי.
    3. צור חתכים בעור האורך החל מ 0.5 ס מ מעל המרפק כדי 0.5 ס מ מתחת למפרק הברך באמצעות זוג מספריים חדים על הצד המגולח של כל חיה.
    4. לנתק את העור מfascia תת עורית בעדינות לאחר החיתוך.
    5. לחבר את האוקרגון והברך של parabiont עם תפר 3-0.
    6. תפר את העור מגולח עם תפר מתמשך 5-0.
  4. הכנס 0.5 mL של 0.9% התת-עורי אל כל עכבר כדי למנוע התייבשות.
  5. הכנס טרמדול (10 מ"ג/25 גרם/יום) הפנימי מוברג לכל עכבר כדי להקל על הכאב.

3. ואלידציה של כימנות מחזור

  1. שיטת התנודה בגלוקוז
    הערה: לוודא את הבנייה המוצלחת של הצ מחזור בין parabionts בשיטת תנודות הגלוקוז (אין צום) ביום העשירי לאחר ניתוח parabionts.
    1. באמצעות הזרקת הצפק של 20 גרם/L 2, 2, 2-טריברואואתנול לכל עכבר בריכוז של 0.1 mL/10 גרם.
    2. לתקן את עכברי התורמים בתוך. תיקון זנב של עכבר חזותי ורידי
    3. שפשף את הורידים הקאואל באגף של אחד מזנבו של הפראבונט עם כדור צמר גפן שנספג ב 70-75% אלכוהול כדי לנקות את הזנב ולהתרחב בכלי הדם.
    4. החזק מזרק 1.0 mL המכיל גלוקוז ביד ימין ולשמור את המחט במקביל הווריד (פחות מ 15 °).
    5. הכניסו את המחט לתנוחה כ-2-4 ס מ מקצה הזנב.
    6. הכנס 100 μL של גלוקוז (1.2 g/ק"ג) לתוך התורם בתוך 10 s.
      הערה: המונח תורם מתייחס לפרביונט המקבל את הזרקת הגלוקוז דרך העורק האחורי. המטופל הוא הפרבימונט השני, שאינו מקבל גלוקוז ישירות.
    7. נקה את הבהונות. עם שפתי-האור לחתוך את הבהונות של עכברים התורם והנמען עם מספריים ולאסוף טיפת דם בנקודות זמן שונות לאחר ההזרקה של גלוקוז (1 דקות, 5 דקות, 10 דקות, 15 דקות, 20 דקות, 30 דקות, 40 דקות, 50 דקות, ו 60 דקות). הסר את קריש הדם בכל נקודת זמן איסוף כדי למנוע נזק נוסף.
      הערה: הנפח של דם שנאסף היה 10-25 ul עבור בדיקה אחת, ו 90-225 ul בסך הכל.
    8. לטפטף את הדם לתוך מרכז מבחני גלוקומיטר עבור זיהוי רמת גלוקוז.
  2. תשתמש בכתם הכחול של. אוון כשליטה חיובית3
    1. הכנס 200 μL של 0.5% כחול הנוגדן של אוון intraperitoneally לתוך העכבר התורם.
    2. 2 h מאוחר יותר, המתת החסד על ידי הזרקה התוך הצפק של 20 גרם/L 2, 2, 2-tribromoethanol לכל עכבר בריכוז של 0.2 mL/10 גרם, ולאסוף דם משני parabits על ידי ניקוב לב.
    3. צנטריפוגה את דגימות הדם ב 916 x עבור 15 דקות.
    4. . אספו נסיוב מהסופרנטאנט
    5. דלל את הנסיוב עם 0.9% הנאגל בשעה 1:50.
    6. למדוד את ספיגת דגימות סרום מדולל ב 620 ננומטר עם ספקטרוסקופיה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

ב שישה עכברים תורמים, רמות הגלוקוז בדם עלה בחדות כדי 26.5 μm/L (173% עלייה) בממוצע של 1 דקות לאחר ההזרקה של 100 μL של גלוקוז (1.2 g/ק"ג) דרך הווריד הזנב ולאחר מכן ירד בהדרגה ל 13.3 μm/L ב 60 דקות. בעכברי הנמען, הגלוקוז בדם עלה באיטיות לאחר ההזרקה והגיע לרמת השיא הראשונה ב -15 דקות (47% הגדלה, 12.2 μm/L). בהתבסס על התוצאות הנ ל, התקן של מחזור המחזור הוגדר כדלקמן: 1) עלייה חדה ברמת הגלוקוז בדם (מינימום 100% להגדיל או > 20 μm/L) בעכברים תורמים בתוך 1 דקות לאחר הזרקת גלוקוז, ו 2) עלייה משמעותית ברמת הגלוקוז בדם בעכברים הנמען 15 דקות לאחר ההזרקה (מינימום 37% עלייה) (איור 1

הריכוז של הצבע הכחול אוונס בסרום של parabionts הצביע גם על בנייה מוצלחת של כימריזם המחזור (איור 2). הורמנו את הפראביטס לאחר מדידת הגלוקוז בדם באמצעות 5 מ ל 2, 2, 2-triרומטוזיס (20 g/L). הצמתים התת עורית בין הפראביטים נצפו בבירור (איור 3).

איור משלים 1 מראה כי העכברים התורמים היה רמת הגלוקוז משמעותי בדם להגדיל 1 דקות לאחר הזרקת גלוקוז, בעוד רמת הגלוקוז בדם של עכברי המטופל לא היה גבוה, אשר הוכיחה כי הצ של המחזור בפראביבטס לא הוקמה בהצלחה 1 יום לאחר ניתוח parabionts. באופן דומה, רמת ה-OD בדם בעכברי הנמען לא הייתה מוגבהת כמו זו של עכברים תורמים (איור משלים 2).

בהתבסס על התוצאות משיטת תנודות הגלוקוז, מצאנו ששני זוגות של פראביטים לא התבססו על כימנות דם 15 יום לאחר ניתוח הפראוזיס. כפי שמוצג בטבלה השלמה 1, שני עכברי הנמען לא הגדילו את רמת הגלוקוז בדם בתוך 60 דקות לאחר הזרקת הגלוקוז לתוך העכברים התורמים. ריכוז הדם של אוונס הכחול בשני הנמענים גם הוא לא גבוה (טבלה משלימה 2), אשר הוכיחה כי שיטת תנודות הגלוקוז היה רגיש כמו שיטת אוונס כחול.

יתר על כן, כדי להעריך את ההשפעה של גלוקוז מוזרק על מטבוליזם אינסולין, גילינו את רמת האינסולין בדם 1 h ו 3 h לאחר ההזרקה של 100 μL של גלוקוז (1.2 g/ק"ג) בעכברים (איור משלים 3). רמת האינסולין בדם הצטמצמה במידה ניכרת 1 h לאחר הזרקת גלוקוז בגלל במהירות הסוכר גדל והתאושש לרמות נורמלי ב 3 h. תוצאות אלה הראו כי ההשפעות של גלוקוז שהזריקו על מטבוליזם אינסולין היו ניתנים לשחזור.

Figure 1
איור 1: שינויים ברמת הגלוקוז בדם בפראביבטס לאחר הזרקה של גלוקוז דרך הווריד caudal. (א) רמת הגלוקוז בדם של עכברים תורמים. (ב) רמת הגלוקוז בדם של עכברים הנמען (n = 6). הנתונים מוצגים כממוצע ± SEM. * p < 0.05, * * p < 0.01, * * * p < 0.001 לעומת 0 דקות. נא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 2
איור 2: הריכוז של אוונס כחול בדגימות סרום של parabionts נמדד על ידי קורא מיקרופלייט. הנתונים מוצגים כממוצע ± SEM. * * * p < 0.001 (n = 6). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 3
איור 3: יצירת מעטפת תת עורית בעור מחובר בין הפראביטים. שמאלה: דמות מייצגת של העכברים הפראביוזיס. מימין: דמות מייצגת של הצינור התת. התת עורי בין הפראביטים אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Supplementary Figure 1
איור משלים 1: רמת הסוכר בדם של הפראביטים נבדקה יום אחד לאחר ניתוח הפראוזיס. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Supplementary Figure 2
איור משלים 2: הריכוז של אוונס כחול נמדד על ידי קורא אימונולוגיה בסרום של הפראביטים 1 יום לאחר ניתוח parabionts. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Supplementary Figure 3
איור משלים 3: ריכוז האינסולין בסרום של העכברים לאחר הזרקת גלוקוז. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

0 דקות 5 דקות 15 דקות 20 דקות 40 דקות 60 דקות
תורם -1 5.7 26.2 21.2 17.6 16.9 15.4
נמען -1 6.7 5.8 5.9 6.2 5.2 5.4
התורם -2 8.4 25.5 21.1 20.5 17.4 13.8
נמען -2 6.7 5.8 5.9 6.2 5.2 5.4

טבלה משלימה 1: רמת הגלוקוז בדם (μa/L) בפראביטס 15 ימים לאחר ניתוח הפרבולה.

שליטה-1 תורם -1 נמען -1 שליטה-2 התורם -2 נמען -2
ערך OD 0.059 0.935 0.062 0.068 0.862 0.073

טבלה משלימה 2: ריכוז דם של אוונס כחול (ערך OD) בפראביטים 15 ימים לאחר ניתוח הפרבולה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Parabiosis מתייחס לטכניקה כירורגית של חיבור שתי חיות חיים כדי להקים מערכת כלי דם משותף על ידי ניסיוני פירושו6,7,8. היתרון של מודל זה הוא כי החומרים המיוצרים על ידי אדם אחד יכול לפעול על שני בעלי חיים באותו זמן. לפיכך, ניתן להשתמש במודל הפרביוזיס כדי לחקור את התפקיד של חומר או גורם במחלה קשורה, תוך הפקת מסקנות משמעותיות וחדשניות רבות. לאור ערך היישום הגדול שלה, המודל הביא להבנה טובה יותר של מחלות לב וכלי דם8,9,10,11,12,13, הפרעות מערכת העצבים14,15, השתלת איברים16, סוכרת17,18.

עם זאת, אימות של הקמתה המוצלחת של מחזור המחזור הוא הצעד הראשון והקובע ללימודים עם parabiosis. מחקרים נוכחיים דיווחו על כמה שיטות לגילוי כימריזם המחזור. לאחר ואח '4 דיווחו כי כאשר הצ דם אושרה בזוגות parabiotic על ידי מדידת התדר המעורב של מונוציטים בטחול עם סמנים שונים עם תוויות בתורם (cd 45.1+) והנמען (cd 45.2+) עכברים. בשיטה זו, עכברים ספציפיים עם CD 45.1+-או cd 45.2+-מונוולוציטים עבור כל parabiont שימשו עבור parabiosis. Cy, החוליה הייתה נחוצה כדי לקבוע כימנות דם על ידי מדידת שילוב של כדוריות הדם המסומנות. בנוסף, מרתה ואח '3 העריכו החוצה-מחזור על ידי intraperitoneally הזרקת 200 μl של 0.5% הצבע הכחול אוונס באחד הפראביבטים. דם משני הצדדים נאסף 2 שעות מאוחר יותר על ידי ניקוב לב. כימנות דם נקבע על ידי מוגבר הריכוז הכחול של אוונס בעכברי הנמען, אשר נבדק על ידי קורא מיקרופלייט. למרות שאסטרטגיות אלה מאפשרות לנו לקבוע כיוריזם דם, יש עדיין מגבלות רבות שלא ניתן להתעלם מהן. , ראשית, עבור שיטות קטלניות. ניתן לאשר את כימיית הדם רק בהוצאה להורג עם זאת, בשיטה שלנו, הקמת כימריזם דם ניתן לבחון בכל עת לאחר ניתוח parabiosis. Parabionts עם כושלים הוקמה מחזור המחזור יכול להיות מנשלל למחקר נוסף מראש כדי להפחית עומס עבודה מיותרת. אכן, באמצעות שיטת תנודות הגלוקוז שלנו היינו מסוגלים לבחור את העכברים עם בנייה מוצלחת של כימריזם דם בתוך parabionts מסוימים, אשר עשוי להיות בגלל זמן מספיק של פראביוזיס, ניתוח מניפולציה לא יציבה, ריפוי פצע מתעכב, או רקמת גוף מנותקת שנגרמו על ידי בעלי חיים נאבק. בנסיבות כאלה, גם הכישלון של כימריזם הדם אושר על ידי שימוש בשיטה הכחולה של אוונס. תוצאות אלו מצביעות על כך ששיטת התנודות בגלוקוז הייתה יעילה כמו השיטה הכחולה של אוונס (איור משלים1 ואיורמשלים 2, טבלה משלימה 1 וטבלה משלימה 2). שנית, השיטות המשמשות כעת לאימות הן זמן רב מדי וקשות, בניגוד לשיטה חדשה זו, שהיא פשוטה ואפקטיבית.

במחקר הנוכחי, בחנו בהצלחה את הצ של המחזור בעכברים parabiotic על ידי שיטת תנודות הגלוקוז. העכברים היו מורדם עבור הזרקת גלוקוז ורמת הסוכר בדם מדידות, אשר עשה מניפולציה שלהם קל יותר. הזרקנו 100 μL של גלוקוז (1.2 g/ק"ג) דרך הווריד הזנב של העכברים בתוך 10 s. בתנאים אלה, הבחינו תנודות סדירות ברמות הגלוקוז בדם בעכברי התורם והנמען. חשוב מכך, כמות הגלוקוז שנהגנו נטו לרומם את רמת הגלוקוז בדם בטווח מסוים. יתר על כן, התוצאות הראו כי רמת אינסולין בדם התאושש לטווח הרגיל 3 שעות לאחר הזרקת גלוקוז (המשלים איור 3), הרומז כי כמות הגלוקוז מוזרק לתוך העכברים היו השפעות מינימליות על חילוף החומרים באינסולין. בנוסף, המינון של הגלוקוז שנתנו לתורם היה נמוך יותר מאשר משמש לבדיקת עמידות הגלוקוז של עכברים (עבור ה-gtt, 2 g/kg גלוקוז הוא intraperitoneally מוזרק לעכברים, משווה כ 1.6 g/ק"ג באמצעות הזרקת וריד caudal19,20,21), כלומר המינון של גלוקוז עבור שיטת תנודות הגלוקוז לא יגרום היפררגליקמיה ושינויים מזיקים אחרים. לסיכום, השיטה בה השתמשנו היא יעילה, לא מזיקה וחוסכת זמן. עם זאת, זה יכול להיות מוגבל עכברים סוכרתית ב parabiosis, אשר עדיין צריך ניסויים נוספים לאישור.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

. למחברים אין מה לגלות

Acknowledgments

עבודה זו הייתה נתמכת על ידי הקרן הלאומית למדע הטבע של סין (81570399 ו 81773735), תוכנית המחקר ופיתוח המפתח הלאומי של סין-מסורתי הרפואה הסינית מודרניזציה פרויקט מחקר (2017YFC1702003), ו היי לונג ג'יאנג הקרן המצטיין למדעי הנוער (JC2017020).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
curved forceps JZ surgical Instruments, China J31340
fine scissors JZ surgical Instruments, China WA1030
needle forcep JZ surgical Instruments, China 60017961
2.5 mL syringes Agilent, USA 5182-9642
Tribromoethano Sigma-Aldrich, USA T48402-5G
penicillin Solarbio, China IP0150
tramadol Yijishiye, China YJT712520
glucometer Roche Diabetes Care, Indiana Accu-Chek Active test strips
Evan's blue Counterstain Solarbio, China G1810
depilatory cream Nair, USA LL9161
Warming Blanket (Heating pad) Kent Scientific Corp, USA TP-22G
Electrical shaver Codos, China CP-5000
3-0,5-0
surgical suture
Shanghai Medical Suture Needle Factory, China SYZ 3-0#, SYZ 5-0#

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Baruch, K., et al. Aging-induced type I interferon response at the choroid plexus negatively affects brain function. Science. 346, (6205), 89-93 (2014).
  2. Zhang, Y., et al. Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue. Nature. 372, (6505), 425-432 (1994).
  3. Torres, M., et al. Parabiotic model for differentiating local and systemic effects of continuous and intermittent hypoxia. Journal of Applied Physiology (1985). 118, (1), 42-47 (2015).
  4. Loffredo, F. S., et al. Growth differentiation factor 11 is a circulating factor that reverses age-related cardiac hypertrophy. Cell. 153, (4), 828-839 (2013).
  5. Kamran, P., et al. Parabiosis in mice: a detailed protocol. Journal of Visualized Experiments. (80), e50556 (2013).
  6. Conboy, M. J., Conboy, I. M., Rando, T. A. Heterochronic parabiosis: historical perspective and methodological considerations for studies of aging and longevity. Aging Cell. 12, (3), 525-530 (2013).
  7. Eggel, A., Wyss-Coray, T. A revival of parabiosis in biomedical research. Swiss Medical Weekly. 144, w13914 (2014).
  8. Brack, A. S. Ageing of the heart reversed by youthful systemic factors! EMBO Journal. 32, (16), 2189-2190 (2013).
  9. Wu, J. M., et al. Circulating cells contribute to cardiomyocyte regeneration after injury. Circulation Research. 116, (4), 633-641 (2015).
  10. Kaiser, J. 'Rejuvenation factor' in blood turns back the clock in old mice. Science. 344, (6184), 570-571 (2014).
  11. Rando, T. A., Finkel, T. Cardiac aging and rejuvenation--a sense of humors? New England Journal of Medicine. 369, (6), 575-576 (2013).
  12. Heidt, T., et al. Differential contribution of monocytes to heart macrophages in steady-state and after myocardial infarction. Circulation Research. 115, (2), 284-295 (2014).
  13. McPherron, A. C. Through thick and thin: a circulating growth factor inhibits age-related cardiac hypertrophy. Circulation Research. 113, (5), 487-491 (2013).
  14. Villeda, S. A., et al. Young blood reverses age-related impairments in cognitive function and synaptic plasticity in mice. Nature Medicine. 20, (6), 659-663 (2014).
  15. Katsimpardi, L., et al. Vascular and neurogenic rejuvenation of the aging mouse brain by young systemic factors. Science. 344, (6184), 630-634 (2014).
  16. Starzl, T. E., et al. The lost chord: microchimerism and allograft survival. Immunology Today. 17, (12), 577-584 (1996).
  17. Coleman, D. L. A historical perspective on leptin. Nature Medicine. 16, (10), 1097-1099 (2010).
  18. Salpeter, S. J., et al. Systemic regulation of the age-related decline of pancreatic beta-cell replication. Diabetes. 62, (8), 2843-2848 (2013).
  19. Sheldon, R. D., et al. Gestational exercise protects adult male offspring from high-fat diet-induced hepatic steatosis. Journal of Hepatology. 64, (1), 171-178 (2016).
  20. Martineau, M. G., et al. The metabolic profile of intrahepatic cholestasis of pregnancy is associated with impaired glucose tolerance, dyslipidemia, and increased fetal growth. Diabetes Care. 38, (2), 243-248 (2015).
  21. Wang, F., Liu, Y., Yuan, J., Yang, W., Mo, Z. Compound C Protects Mice from HFD-Induced Obesity and Nonalcoholic Fatty Liver Disease. International Journal of Endocrinology. 2019, 3206587 (2019).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics