Summary
该协议的目的是演示如何准备串行晶体学样本，以便于最近在澳大利亚同步加速器上委托的高粘度喷油器Lipidico上收集数据。
Abstract
澳大利亚同步加速器公司已开发出一种用于进行连续晶体测量的设施。该设施采用了专用的高粘性喷油器Lipidico，作为大分子晶体学 （MX2） 光束线的一部分，可在室温下测量大量小晶体。该技术的目标是使晶体能够种植/转移到玻璃注射器中，直接用于喷油器的串行晶体成像数据收集。此喷油器的优点包括能够快速响应流速变化而不中断流。这种高粘度喷油器 （HVI） 存在几个限制，其中包括对允许的样品粘度限制为 +gt;10 Pa.s。流稳定性也可能是一个问题，具体取决于样本的特定属性。此处介绍了如何设置样品和操作喷油器以进行澳大利亚同步加速器的串行晶体学测量的详细协议。该方法演示了样品的准备，包括将酶晶体转移到高粘度介质（硅胶油脂）中，以及喷油器在 MX2 中用于数据收集的操作。
Introduction
串行晶体学 （SX） 是一种最初在 X 射线自由电子激光器 （XFELs）1、2、3、4的背景下开发的技术。虽然固定目标方法可用于SX 5、6、7，但通常情况下，喷油器系统用于将晶体连续输送到X射线束。由于它结合了大量晶体的数据，SX避免了在实验过程中需要任何晶体对齐，并使数据能够在室温8，9时收集。在合适的喷油器的帮助下，晶体逐一流入X射线交互区，并在区域探测器9、10上收集由此产生的衍射数据。迄今为止，SX已经成功地解决了一些蛋白质结构1，11，12，13，包括晶体太小，无法测量使用传统的晶体学。它还利用XFEL的股秒脉冲持续时间，为时间解决的分子动力学提供了新的见解。通过使用光学激光源启动泵探针反应，对光系统II14、15、光活性黄蛋白16、17、细胞色素C氧化酶18以及细菌霍多普辛19、20、21进行了深入研究。这些研究已经探索了光激活后发生的电子转移动力学，证明了序列晶体学在理解时间解决的生物过程方面的巨大潜力。
连续晶体学的发展也越来越普遍同步加速器来源9，12，20，22，23，24。基于同步加速器的 SX 允许使用适当的喷油器系统在室温下有效地测量大量单个晶体。因此，这种方法适用于较小的晶体，因此，除了需要快速帧速探测器来收集数据外，还需要微聚焦光束。与传统的晶体学相比，SX 不涉及 X 射线束中单个晶体的安装和对齐。由于大量单个晶体的数据被合并，与传统晶体学相比，每个晶体接收的辐射剂量可以大大降低。同步加速器 SX 也可以应用于时间解决反应的研究，甚至到毫秒的机制，只要有足够高帧速率的探测器（例如，100 Hz 或更多）。在同步加速器上已经进行了几次连续晶体学实验，这些实验使用喷油器，这些喷油器最初是在XFEL源20、22、23号开发的。两种最常见的喷油器类型是气体动态虚拟喷嘴（GDVN）25和高粘性喷油器（HVI）9，24，26，27，28。GDVN 是注射低粘度液体样品的理想之选，但需要高流速才能实现稳定的流，这反过来又会导致高样品消耗率。相比之下，HVI 的适用于高粘度样品，从而以更低的流速生成稳定的流，从而降低样品消耗。因此，HVI喷油器倾向于在粘性载体更可取的情况下交付样品（例如，基于脂质的膜蛋白）和/或大量样品不可用。SX喷油器的使用通常具有挑战性，需要广泛的操作培训。它们还涉及冗长的样品传输协议，因为样品需要加载到专门的储层中，这通常与样品在"死体积"中丢失或连接中泄漏有关的风险很高。因此，在样品到达 X 射线束之前，优化喷油器设计以减轻任何损失是可取的。
最近，第一个SX结果使用利皮迪科23与酶靶点，使用Eiger 16M探测器发表。这种喷油器设计通过最大限度地减少从初始结晶到将晶体转移到喷油器中，然后将样品输送到 X 射线束中所涉及的步骤数量，从而限制样品浪费。本手稿描述并演示了从样品准备开始、进入注射过程，最后使用同一结晶容器收集数据的样品传输过程。还描述了喷油器的操作。
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Protocol
1. 使用玻璃注射器在高粘性介质中制备晶体
- 轻轻地将水晶溶液（约1，000 x g，+10分钟，22°C）中离心，形成柔软的晶体颗粒并去除多余的缓冲区。 这将导致颗粒中的晶体高度浓度，可用于数据收集。
注：为防止粘性介质稀释，在此步骤中增加晶体浓度。优化粘性介质与晶体体积的比例，以获得高浓度的晶体，同时保持媒体的高粘度。离心晶体溶液形成颗粒，并去除多余的缓冲区，以增加溶液中的晶体浓度，如 Darmanin 等所述。阿尔. 29. - 用耦合器设置两个 100μL 注射器。
- 将耦合器固定到第一个注射器的末端，并在注射器顶部添加 28 μL 的水晶溶液。慢慢地，将柱塞插入注射器顶部，轻轻地将溶液向下推至耦合器尖端，去除形成的任何气泡。遵循下面讨论的两种方法之一来做到这一点。
注：如果晶体不显著改变整体样品的粘度，则添加到高粘度介质中的晶体体积可能会有所不同。- 第一种方法：使用快速压力变化来爆裂气泡。
- 小心地将一个戴手套的手指放在钝化耦合针尖的顶部，然后（非常轻轻地）施加压力以创建密封件。不要施加太大的压力，因为这可能会导致针棒受伤。
- 现在将柱塞拉回来，将解决方案从针头点拉开，这将在注射器中产生积压。
- 通过从钝化的针尖上取下戴手套的手指，快速释放注射器顶部的压力。请小心，如果取出手指时样品离尖端太近，可能会喷出，导致样品丢失。注射器内压力的快速变化会破裂气泡。重复，直到所有气泡都被移除。
- 第二种方法：使用"人离心机"去除气泡。
- 将注射器放在一只手上，针头朝上，柱塞夹在两根手指之间，使其无法移动。
- 快速将手持注射器的手臂向一个方向旋转 2-3 次，结果样品上的离心力将迫使任何气泡从注射器中流出。小心点，如果做得太慢，样品可能会丢失。
- 检查注射器是否存在气泡，如果气泡仍然存在，重复步骤 1.3.2.1 – 1.3.2.2，直到清除所有气泡。
- 第一种方法：使用快速压力变化来爆裂气泡。
- 使用细铲，将 +42 μL 的高真空硅胶油脂直接添加到第二个注射器的顶部。将柱塞一直推至末端，清除所有气泡，并确保注射器末端没有气隙。
注：硅胶油脂的精确成分并不关键，因为它充当惰性载体。粘度值 =gt;10 Pa.s 或大约 60：40 硅胶油脂与晶体溶液的比例是最佳注射方式，但是，根据样品的确切特征，这种情况可能有所不同。调整添加到硅胶油脂中的晶体溶液体积，以优化混合物中的晶体浓度，如讨论中所述。硅胶润滑脂以外的高粘度介质只要与样品30、31、32、33兼容即可使用。 - 确保两个注射器中的任何一个都没有气泡，并使用耦合器将注射器连接在一起。垂直握住注射器，只需抓住注射器的末端，因为由于手指产生的热量而使注射器变热会影响样品。
- 将样品混合在一起，轻轻压低晶体溶液侧的柱塞，使其混合到硅胶油脂中，然后将柱塞推入硅胶油脂侧，从而将样品推回晶体溶液侧。轻轻重复这个过程50至100次，使样品彻底混合，看起来均匀。
注：如果晶体直接生长在高粘性介质中（例如脂质立方相（LCP），则不需要步骤 1.1-1.6。在刘 et.al 中可以找到注射器内生长晶体的协议。34，35。按照此协议进行样品整合，步骤 10，其中所有样本现在都包含在一个注射器中，并删除结晶缓冲区。本协议不需要添加 7.9MAG。相反，通过轻轻将柱塞推下样品，直到注射器中不再保留液体，从注射器中取出所有多余的液体。 - 通过注射器在光学显微镜下可视化晶体，或者为了获得最佳效果，将少量 （+1 μL） 提取到玻璃滑梯上，并在顶部放置盖滑。
- 检查晶体浓度。
- 通过使用光学显微镜图像计算特定区域的晶体数量，确定硅胶油脂中的晶体浓度。为了获得最佳效果，在整个介质中均匀分配的高密度晶体是理想的（+106 晶体/mL），以获得较高的晶体命中率。
- 通过在步骤 1.3 和 1.4 中更改晶体与粘性介质的比例来调整注射器中的晶体浓度。
- 为了降低晶体浓度，请在第 1.4 步增加硅胶润滑脂/HV 介质的量，或在步骤 1.1 中设置注射器之前用结晶缓冲器稀释溶液中的晶体颗粒，从而稀释注射器中的晶体。
- 要增加晶体浓度，请在第 1.4 步减少硅胶油脂的含量，但请注意不要将粘度降低到 10 Pa.s 以下。
注：此处报告的晶体浓度针对此特定样本和晶体尺寸进行了优化。然而，理想的晶体浓度将取决于晶体大小、光束大小、针头内部直径（I.D.）和事件X射线通量。这可以从命中率中确定，最佳命中率为 ~30%，被视为"良好"。在实践中，必须在光束时间针对不同的样品优化晶体浓度，以获得所需的命中率。从高浓度晶体开始，109 个晶体/mL。调整晶体浓度的程序在刘 et.al。35.
- 协议可在此处暂停，直到喷油器准备好进行数据收集。
- 如果晶体生长在LCP中，则密封它们，让它们在室温下在注射器中停留几天。
- 如果晶体已转移到不同的高粘度介质（例如硅胶润滑脂），则应在测量前对晶体进行稳定性测试。这将确定晶体在惰性介质中稳定多长时间（理想情况下>8 h）和数据收集的时间限制。在这里，溶酶晶体在硅胶油脂中稳定了数天，使用光学显微镜检查时没有溶解的迹象。
- 在断开耦合器之前，将所有样品移动到一个注射器中。将耦合器与注射器断开并连接注射针。将针头牢牢拧入注射器底部，确保紧固针头以防止泄漏。这个实验使用了108μm I.D.针（针长13毫米，点式3）。根据晶体大小和光束大小，连接 51μm 或 108μm I.D. 针头。
注：需要在光束时间之前对样品流进行预先测试，才能选择正确的喷油器针尺寸。根据样品特性（即粘度、充电、缓冲成分）和针头 I.D.，样品的流动方式会有所不同。因此，建议测试各种针头尺寸，以尽可能小的 I.D. 针产生最稳定的流，以最大限度地提高数据收集过程中的信号噪声比。 - 如果喷油器已经安装并对齐在光束线上，则移动到第 3 节，并将样品注射器直接安装到喷油器上。
注：协议可在此处暂停。
2. 喷油器安装和控制
- 将喷油器安装到光束线上。取出 MX2 光束线上的低温喷嘴，然后用喷油器更换。松开固定低温喷嘴的夹紧螺钉，并将其连接到位于电动舞台旁边的支架上。
- 将喷油器从手推车上抬起来，握住黑色手柄，放在电动舞台上。
- 将喷油器固定在机动阶段：手拧紧黑色夹紧螺丝旋钮。
- 将空注射器安装到喷油器上
- 在喷油器计算机控制接口（即 EPOS 位置控制软件）中，在软件菜单中选择工具下的Homing 模式。然后选择负限制开关，并开始霍明，让软件运行，直到螺丝被收回足够的注射器，以适应螺丝下。如果离开运行无人监督的限制开关自动停止螺钉。
- 通过注射器支架中的缝隙插入针头，将空（"dummy"）注射器安装到喷油器上。将注射器与支架对接。
- 用两个O环固定注射器。
- 将第一个 O 形环包裹在注射器的中间部分，将其连接到注射器两侧的钩子上。
- 将第二个 O 形环绕在注射器上部的挂钩上，然后将 O 环的一部分放在玻璃注射器的顶部，如演示和图 1B所示。
- 将喷油器与 X 射线束对齐
- 通过光束线控制软件，将喷油器的机动阶段移动到 X 射线交互点。这可以使用内联相机进行可视化。光束的大小和位置由屏幕上的红十字表示，可移动电动舞台，使针头与 X 射线交互区域对齐。
- 调整阶段的 x 和 y 位置，使针头与红十字对齐。
- 调整 z 位置，直到针尖对焦。
- 通过检查注射器尖端是否与光束线相机生成的光学显微镜图像中可见的十字线相符，可直观地验证针尖和 X 射线光束的对齐。
- 针尖对齐后，将尖端移到交叉毛发上方~100μm。这消除了针尖的 X 射线散射。
注：同步加速器MX2光束线上的喷油器的安装和对齐必须由光束线科学家进行，并且可以在30分钟内完成。
3. 安装样品注射器
- 按照步骤 2.3 将空注射器替换为样品注射器。
- 将喷油器盖放在样品注射器柱塞头上。
- 将驱动螺钉移到盖的顶部。
- 在喷油器控制软件中选择 速度模式。
- 输入 3000 rpm （+115 nL/s） 作为 设置值 并按 应用设置值。
- 当驱动螺丝碰到注射器柱塞头的盖时，请停止电机。
- 将喷油器控制软件中的 rpm 值设置为零，当螺钉接近盖子时， 将设置值 更改为"0"。
- 接触后，通过按 应用设置值 立即停止螺钉来激活预设值。
- 轻轻摇动盖子，确保盖牢牢地握住。
注：每当在控制软件中的 "设置值 "框中输入新的集值时，它只有在按下 "应用设置值"后才会激活。
4. 运行喷油器
- 盖驱动器螺钉与柱塞顶部牢固接触后，将转速 设置值 更改为 100。这相当于~4 nL/s。
- 当样品首次出来时，可直观地检查针尖，或查看针头的光束线相机图像，以观察样本何时开始从针尖挤出。
- 搜索小屋，关闭小屋门，打开X射线束。从此，喷油器必须从外壳远程操作。
- 调整转速，直到生成稳定流。
- 将转速 设置值 降低到 90。
- 重复步骤 4.4.1，以 10 的增量降低 rpm 设置值 ，以减慢流速度，但仍保持稳定的流。对于硅胶润滑脂，使用了价值为 30 rpm 的油脂。
注：根据样本特征和X射线曝光时间，典型的转速范围在30-100 rpm（1=4 nL/s）之间变化。一般来说，rpm 应调整以产生最慢的流速（以尽量减少样本消耗），同时保持稳定的流。
- 管理流动不畅的样本流。
- 继续以 10 的增量增加 rpm 设置值 ，直到流变得更直。如果流不稳定，即使将 rpm 设置值 增加到 100 rpm 的最大值，也尝试通过实施下面描述的两种方法之一来提高稳定性。
- 第一种方法：在样品流下方插入聚苯乙烯样品捕手，以帮助指导样品。此方法适用于带电的样本流。
- 第二种方法：将吸气漏斗插入采样器。要向漏斗提供空气，将其连接到位于小屋中的空气出口管。此方法可以帮助指导和稳定样本流，而不受流的电荷限制。
- 继续以 10 的增量增加 rpm 设置值 ，直到流变得更直。如果流不稳定，即使将 rpm 设置值 增加到 100 rpm 的最大值，也尝试通过实施下面描述的两种方法之一来提高稳定性。
- 一旦实现了恒定稳定的流，开始数据收集，并根据正常的 X 射线晶体学实验优化探测器距离。
注：rpm 使用补充信息"Lipidico 设备计算器"中提供的转换表转换为流速。输入转速值、针直径和注射器体积，使用此计算器计算流速。
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Representative Results
利皮迪科是作为替代交付系统在MX2（图1）上使用的HVI。它非常适合 SX，其中晶体要么生长在脂质立方相中，要么转移到高粘性惰性介质中。
为了证明喷油器应用硅胶油脂与溶酶晶体混合，用于在澳大利亚同步加速器的MX2光束线收集SX数据。要将喷油器安装在 MX2 光束线上，低温喷嘴将被移除，代之以 图 1中所示的喷油器。注射器样品直接安装在喷油器上，并使用 O 形环（图1B）固定。数据收集可以在样本更改后几分钟内启动。喷油器专为快速样品控制而设计，配备简单的设置，便于不熟悉 SX 的用户操作。
图1：利皮迪科的图像，一种粘性喷油器，用于澳大利亚同步加速器的SX实验。（A） 显示一张利皮迪科并入 MX2 的照片。红色箭头指示 X 射线束的方向。（B） 更近距离地观察利皮迪科的样本持有人区域。注射器由两个 O 环保持到位，样品在捕手中收集。（D） 样本流的特写视图，显示喷油器针头和样本废物捕手，可更改为在针头下看到的聚苯乙烯/吸气捕手（A）。这个数字是从伯恩森等人改编的。al. 201923 获得 AIP 出版的许可。 请点击这里查看此数字的较大版本。
喷油器与各种类型的高粘性载体兼容。喷油器的最佳样品运行速度对流稳定性至关重要，过慢会导致冰壶效应/流膨胀，过快会导致流破裂。最佳速度将因使用的载体系统而异。 图 2 和 图 3 显示了以不同喷油器速度测试的硅胶油脂，并演示了流行为如何变化。缓慢的流速（图 2A，2.3nL/s）导致从喷油器中挤出的硅胶油脂膨胀，而更快的流速（图 2C，6.6nL/s）则产生更薄的流。粘性介质流的卷曲定期观察到（图3A）。为了解决这个问题，测试了两种创新的解决方案：聚苯乙烯捕手和针下的通风吸出漏斗。聚苯乙烯捕手引入弱静电力，在高电荷样品上效果最佳，如硅胶油脂（图3B），而通气吸漏斗有助于引导流垂直向下到捕手，与样品充电无关。根据样本的特性，任何选项都可以成功使用。
图2：使用不同喷油器速度的高粘性载体流的效果。100% 硅胶油脂以不同的样品速度进行测试，以评估其流速特性。（A）. 2.3 nL/s （30 rpm），（B） 3.5 nl/s （90 rpm） 和（C） 6.6 n/s （170 rpm）。 请点击这里查看此数字的较大版本。
图3：100%硅胶油脂的流行为，显示粘性介质卷曲。（A） 卷曲效果在2.3 nl/s （30 rpm） （B） 将聚苯乙烯捕手添加到样品废物保持器的效果，喷油器速度为2.3 nL/s（30 rpm）。 请点击这里查看此数字的较大版本。
使用了一个玻璃注射器，内含 26 μL 的酶晶体（晶体尺寸 10 μm x 10 μm x 20 μm），悬浮在硅胶油脂中（图 4A）。Lipidico 使用 108 μm 针头 I.D.生成恒定的样本流，平均流速为 1.14 nL/s（电机设置为 30 rpm）。峰值查找算法36 用于评估命中率，并在数据收集时间的 38 分钟内收集了足够的数据（总计 224，200 张图像），从而实现了结构检索（PDB 代码 6MQV）。 表1 提供了数据收集统计的摘要， 图4B 显示了围绕酶结构20中的二氧化硫键之一的电子密度图的代表性图像。
图4：酶图像。（A） 硅油脂中酶晶体的光学图像。一种交叉偏振（40倍放大倍）的酶晶体图像，与高粘度介质硅胶油脂混合，使用可见光显微镜成像。晶体的大小范围在15至20μm和（B）围绕酶脱硫键的电子密度图（2Fo-Fc，1σ）的代表性图像之间。这个数字是从伯恩森等人改编的。al. 201923 获得 AIP 出版的许可。 请点击这里查看此数字的较大版本。
补充信息。 请点击这里下载此文件。
表1：显示来自利皮迪科的SX数据统计数据的摘要表。溶酶晶体与高粘性介质、硅胶油脂混合，流经MX2光束线的X射线相互作用区域。这是伯恩森等人发表的完整结果表的摘要。al.23.该表在 AIP 出版许可下在此进行调整。
| 数据统计 | 利皮迪科， MX2 光束线 |
| 探测器 | 十进制艾格 X 16M， |
| 帧速率 | 100赫兹 |
| 样本检测距离（毫米） | 300 |
| X射线能量（凯文） | 13 |
| 光束大小 （WxH） （μm） | 12x22 |
| 不。帧的框架 | 224200 |
| 命中率 （%） | 2.95 |
| 不。索引帧 | 4852 |
| 分辨率（=） | 17.74-1.83 |
| 完整性 | 99.44 |
| 空间组 | P43212 |
| 单元单元单元 | |
| a、b、c（=） | 78.68, 78.68, 34.48 |
| α, β, γ (°) | 90, 90, 90 |
| I/σ（I） | 5.08 |
| 冗余 | 73.97 |
| CC1/2 | 0.96 |
| R工作/免费 | 0.18/0.26 |
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Discussion
开发了一种替代的 HVI，非常适合在同步加速器源上进行 SX 实验。它比现有的高等健康高等疾病有两个关键优势。首先，在光束线上安装很容易，允许在传统晶体学和 SX 之间快速切换，在 MX2 上安装和对齐只需约 30 分钟。其次，用于种植晶体的样品注射器可直接用作注射液罐，从而限制样品转移过程中的浪费。已描述和演示更改样本的协议。与其他高射电相比，该设计无需复杂的气流来控制喷气机。演示了改变喷油器流速的简单过程，无需延迟响应即可进行调整。
成功收集 SX 数据的最关键步骤是优化晶体浓度，获得高粘度介质的均匀混合物，并生成稳定的数据收集流。通过将晶体向下离心至颗粒，并在载体介质中添加更高浓度的晶体，确保样品在耦合系统中彻底混合，可以实现最佳的晶体浓度和均质性。一旦晶体浓度得到优化，在光束期间可以轻松调整喷油器的流速，以获得稳定的流。粘性流的卷曲通常用高粘性样本观察。提出了两种解决方案：使用聚苯乙烯样品捕手进行带电样品，或添加作为捕手的通风吸出漏斗。这在初始测试中成功地控制了流，但在不同的样品条件的卷曲可能导致样品粘在针点。通过添加特殊涂层来改变针头的表面电荷特性，可以克服这种情况。涂有不同化学品（即硅胶）的针头以前已被成功改装为液体处理机器人，可从制造商定制订购，以适应注射器37。
喷油器不限于硅胶油脂，可用于其他高粘性液体。几个不同的替代品已被证明23，可以成功地用于晶体注射，并在许多其他出版物22，30，33描述。使用此 HVI 的样品粘度上限仍在调查中，但高达 25 Pa.s（使用 100% 硅胶润滑脂）的样品粘度已导致稳定流。但是，当样品粘度降低到 +lt;10 Pa.s（使用 70% 硅胶润滑脂样品）时，无法产生可靠的流。因此，10 Pa.s 表示使用此 HVI 注射的样品粘度当前下限。针头 I.D. 也是一个重要的考虑因素。虽然51μm I.D.在注射各种载体时进行了成功测试，但晶体的引入会破坏样品流。因此，根据它们的大小，随着晶体引入矩阵，与较大的针头尺寸相比，使用 51μm I.D. 针头时出现堵塞的可能性要大得多。当发生堵塞时，可能会发生压力的严重积聚，在其他喷油器中，这可能导致注射器破裂。但是，此 HVI 的设计包括一个安全机制，如果压力过高，直到启用停用开关，驱动力学将脱离注射器柱塞。这会导致驱动器停止，并防止玻璃注射器破裂。
此喷油器存在若干限制。喷油器是专门为高粘性样品设计的，因此，像样品这样的液体不能直接用于样品输送。为了克服这一限制，在缓冲系统中生长的晶体可以与第 1 步中描述的合适的惰性介质混合，但是，晶体可能会变得不稳定。因此，应首先对各种惰性介质26、27、28、29进行筛查，以确保样品的稳定性。其次，晶体尺寸和晶体包装质量将影响衍射质量。MX2 光束线的最佳光束大小为 22 x 12 μm （H x W） 和通量 +1012光子/s。在 MX2 执行 SX 的最佳晶体尺寸为 +10 μm，并已证明具有较高的信号噪声比。但是，如果小尺寸晶体的订单井然有序且衍射到高分辨率，则可以收集它们的数据。可以选择将此光束线的光束尺寸缩小到 7.5 μm，但是，这需要付出代价，因为它减少了在实验期间需要考虑的事件通量。
这种喷油器的开发使SX很容易为主流晶体学家所接受。Lipidico 的成功运营为 SX 数据收集在各种同步加速器源中的快速简便方法打开了大门。它能够收集 MX2 中 10μm 或更少的晶体的室温数据，从而限制单个晶体的辐射损伤影响。它还为澳大利亚提供了一个新的机会，以执行毫秒时间解决SX，这是晶体学家目前的最先进的。此喷油器系统的未来应用扩展到使用小角度 X 射线散射 （SAXS） 对高粘度材料的 X 射线特征，使喷油器能够轻松适应澳大利亚同步加速器的其他光束线。
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Disclosures
MK适用于库塞尔设计。Kusel Design 是一家定制实验室设备开发商，由拉特罗贝大学的彼得·本特森博士和 ANSTO 的汤姆·卡拉多克-戴维斯博士共同参与，并开发了一种低成本设备，使澳大利亚同步加速器的 MX2 光束线能够进行高粘度研究。该装置是与卡拉多克-戴维斯博士密切协商后开发的。作者没有相互竞争的经济利益。
Acknowledgments
这项工作得到了澳大利亚高级分子成像研究中心（CE140100011）（http://www.imagingcoe.org/）的支持。这项研究部分使用澳大利亚同步加速器的MX2光束线进行，这是ANSTO的一部分，并利用了澳大利亚癌症研究基金会（ACRF）探测器。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Hen eggwhite lysozyme | Sigma-Aldrich | L6876 | Used to grow crystals for testing the injector and the crystals are transferred into silicon grease. https://www.sigmaaldrich.com/ |
| High vacuum silicon grease | Dow Corning | Z273554-1EA | Used for testing of injector. https://www.sigmaaldrich.com/ |
| Injector needle (108 µm ID) | Hamilton | part No: 7803-05 | www.hamiltoncompany.com |
| Glass gas-tight syringes, 100 µl | Hamilton | part no: 7656-01 | Syringes used for sample injection. www.hamiltoncompany.com |
| LCP syringe coupler | Formulatrix | 209526 | Syringe coupler to mix the samples |
| Lipidico injector | La Trobe Univerity/ANSTO | This is a specific piece of equipment that can be accessed through La Trobe University / ANSTO Australian Synchrotron Facility |
References
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