门户静脉注射：研究癌症转移肝脏的方法

肝脏是大多数癌症的继发转移部位。为了研究转移，我们可以将癌细胞注射到门户静脉中，将血液从身体其他部位输送到肝脏。

首先将麻醉鼠标置于超精位置。使用氯西丁和酒精对裸露的腹部区域进行消毒。使用微切刀，在动物左侧的肋骨和第四个乳腺之间切口，而不会损坏内部器官。

将纱布垫浸泡在切口附近的无菌盐水中。用无菌棉签轻轻拉出肠子，露出入口静脉，并放在纱布上。用纱布垫盖住器官以防止干燥。将含有荧光标记癌细胞的注射针插入入口静脉，然后慢慢注射细胞。等待几秒钟，以防止细胞的回流，并小心地取出针头。

注射后，癌细胞通常以鼻窦体传播，并侵入门户三合会附近的肝细胞进行转移。将器官放回腹腔，缝合切口。在示例协议中，我们将执行门户静脉注射，以研究乳腺癌转移到肝脏。

在开始手术之前，用10%的漂白剂擦拭手术区的所有表面。注射前一小时，用100微升镇痛皮下治疗8至15周大的BALB/c雌性小鼠进行疼痛管理。在动物的眼睛上涂上软膏。然后，将鼠标放在苏平位置，并通过脚趾捏确认适当的安定水平。

接下来，用三个交替无菌纱布浸泡的2%氯西丁湿巾和两个酒精准备垫湿巾对动物的手术和周围区域（包括尾巴）进行消毒。最后一次氯西丁擦拭后，使用无菌手术刀在口腔左侧的中位和下垂平原之间对皮肤进行 1 英寸切口，从肋骨正下方开始，到第四根腹腔乳腺奶嘴上方结束，然后通过腹膜切口进行类似的一英寸切口。

现在，将肿瘤细胞上下吹风几次，以补充细胞溶液，并装载25微升可拆卸针注射器，配备32个量表针头和10个微升的细胞。压低柱塞，直到细胞在针尖，柱塞在适当的体积注射。用无菌酒精垫擦拭加载的针头外部，以去除任何外部肿瘤细胞，小心避免针头棒。

然后，用钳子握住切口中位侧的皮肤和腹膜衬里，使用无菌棉签小心地将大大小小的肠子移到浸泡在无菌盐水中的无菌纱布上。在盐水浸泡纱布中覆盖内部器官，以保持内部湿度和不育。当入口静脉可见时，有一个助手轻轻地将肠子抱出，用无菌棉签露出入口静脉，并将针头3至5毫米插入入口静脉，在肝脏以下约10毫米处以低于5度角，向上倾斜。

慢慢注射全量的肿瘤细胞，让血液流过针头几秒钟，以避免肿瘤细胞从静脉回流。

由于适当的可视化、访问和注射到入口静脉至关重要，因此在尝试注射之前，请花时间确保与针头相关的入口静脉定位令人满意。

当所有细胞都注射后，取出针头，同时用无菌棉尖施用器对静脉施加温和压力。然后，使用新的无菌棉尖施用器在注射部位上保持 0.5 到 1 厘米方形的止血纱布。

五分钟后，小心地抬起纱布以评估静脉关闭。当血流完全停止时，取出纱布，将肠子放回腹腔。使用简单、连续或中断的缝合模式，用无菌的 4-0 vicryl 缝合和锥度关闭腹膜衬里。

以同样的方式关闭皮肤后，沿切口部位注射100微升局部麻醉剂，然后皮下输送0.5毫升无菌盐水。