حقن الوريد البوابة: طريقة لدراسة الانبثاث السرطان إلى الكبد

الكبد هو موقع النقيلي الثانوي لمعظم أنواع السرطان. لدراسة الانبثاث، يمكننا حقن الخلايا السرطانية في الوريد البوابة، الذي يحمل الدم من أجزاء أخرى من الجسم إلى الكبد.

ابدأ بوضع ماوس مخدر في موضع غير صحيح. تعقيم منطقة البطن العارية باستخدام الكلورهيكسيدين والكحول. باستخدام الميكروسيستورات، قم بعمل شق بين الأضلاع والغدة الثديية الرابعة على الجانب الأيسر للحيوان دون الإضرار بالأعضاء الداخلية.

ضع وسادة شاش غارقة في محلول ملحي معقم بالقرب من الشق. اسحب الأمعاء برفق باستخدام مسحة قطنية معقمة للكشف عن الوريد المدخلي ، ووضعه على الشاش. قم بتغطية الأعضاء بوسادة الشاش لمنع التجفيف. أدخل إبرة الحقنة التي تحتوي على خلايا سرطانية تحمل علامة فلورية في الوريد البوابي وحقن الخلايا ببطء. انتظر لبضع ثوان لمنع التدفق الخلفي للخلايا وإزالة الإبرة بعناية.

بعد الحقن ، تنتقل الخلايا السرطانية عادة في الجيوب الأنفية وتغزو خلايا الكبد بالقرب من ثالوث البوابة للانبثاث. ضع الأعضاء مرة أخرى في تجويف البطن وخياطة الشق. في بروتوكول المثال، سنقوم بإجراء حقن الوريد البوابة لدراسة الانبثاث سرطان الثدي إلى الكبد.

قبل البدء في العملية، امسح جميع أسطح المنطقة الجراحية بتبييض 10٪. قبل ساعة واحدة من الحقن، علاج الفئران الإناث BALB/c البالغ من العمر 8 إلى 15 أسبوعا مع 100 ميكرولتر من مسكن تحت الجلد لإدارة الألم. تطبيق مرهم على عيون الحيوان. ثم ضع الماوس في موضع السطان وتأكد من المستوى المناسب من التخدير عن طريق قرصة إصبع القدم.

بعد ذلك ، قم بتطهير المناطق الجراحية والمناطق المحيطة بالحيوان ، بما في ذلك الذيل ، مع ثلاث مناديل معقمة متناوبة غارقة في الشاش بنسبة 2٪ من الكلورهيكسيدين ومناديل وسادة إعداد الكحول. بعد مسح الكلورهيكسيدين الأخير ، استخدم مشرط معقم لإجراء شق 1 بوصة في الجلد بين السهول المتوسطة والمترهلة على الجانب الأيسر من الفم ، بدءا من أسفل الأضلاع مباشرة وينتهي فوق حلمة الغدة الثديية الإربية الرابعة ، يليها شق مماثل بوصة واحدة من خلال الصفاق.

الآن، ماصة الخلايا السرطانية صعودا وهبوطا عدة مرات لإعادة إنفاق حل الخلية، وتحميل حقنة إبرة قابلة للإزالة 25 ميكرولتر، مجهزة إبرة قياس 32 مع 10 ميكرولتر من الخلايا. الاكتئاب المكبس حتى الخلايا هي في غيض من الإبرة والمغطاس هو في حجم مناسب للحقن. امسح الجزء الخارجي من الإبرة المحملة بوسادة كحول معقمة لإزالة أي خلايا ورم خارجية، مع الحرص على تجنب العصي بالإبرة.

ثم، عقد الجلد وبطانة الصفاق من الجانب المتوسط من الشق مع ملقط، واستخدام مسحة القطن العقيمة لتحريك بعناية الأمعاء الكبيرة والصغيرة على شاش معقم غارقة في المالحة العقيمة. قم بتغطية الأعضاء الداخلية في الشاش المحلول الملحي للحفاظ على الرطوبة الداخلية والعقم. عندما يكون الوريد المدخل مرئيا، يكون مساعد عقد بلطف الأمعاء للخروج من الطريق لفضح الوريد البوابة مع مسحة القطن العقيمة وإدراج الإبرة 3 إلى 5 ملليمترات في الوريد البوابة، ما يقرب من 10 ملليمترات تحت الكبد في زاوية أقل من 5 درجة، شطبة الجانب.

قم بحقن الحجم الكامل للخلايا السرطانية ببطء، مما يسمح للدم بالتدفق عبر رأس الإبرة لعدة ثوان لتجنب التدفق الخلفي للخلايا السرطانية خارج الوريد.

كما التصور السليم, الوصول, والحقن في الوريد المدخل أمر ضروري, تأخذ من الوقت لضمان أن تحديد المواقع من الوريد المدخل فيما يتعلق الإبرة مرضية قبل محاولة الحقن.

عند حقن جميع الخلايا، قم بإزالة الإبرة مع تطبيق ضغط لطيف في نفس الوقت على الوريد باستخدام قضيب طرف قطني معقم. ثم، استخدم قضيب طرف قطني معقم جديد لعقد قطعة مربعة من الشاش الهيموستاتيكي من 0.5 إلى 1 سنتيمتر فوق موقع الحقن.

بعد خمس دقائق، ارفع الشاش بعناية لتقييم إغلاق الوريد. عندما يتوقف تدفق الدم تماما، قم بإزالة الشاش وإعادة الأمعاء إلى تجويف البطن. باستخدام نمط خياطة بسيط أو مستمر أو متقطع ، أغلق بطانة الصفاق بخياطة معقمة 4-0 فيكريل وتفتق.

بعد إغلاق الجلد بنفس الطريقة ، قم بحقن 100 ميكرولتر من التخدير الموضعي على طول موقع الشق ، يليه تسليم تحت الجلد من 0.5 ملليلتر من المالحة المعقمة.