印度墨水通货膨胀：可视化肿瘤结核的染色方法

首先将安乐死的老鼠腹腔侧放在手术床上，固定动物的四肢。使用剪刀，沿着中线切开肋骨笼，直至唾液腺。将移液器尖端放在气管下面，以提升和隔离气管。旋转手术床180度。将含有印度墨水污渍的注射器针插入气管，将墨水注射到肺部，直到您感到阻力。

癌细胞分泌大量的乳酸，在细胞表面产生强烈的负电荷。当这些细胞沾染印度墨水，酸性污渍，细胞表面排斥污渍，保持未染色。

用剪刀切气管，在肺部下滑动一对钳子。轻轻地把肺从动物的身体里拉出来。在水中冲洗肺部，并将它们转移到含有Fekete溶液的瓶中，以去除多余的污渍，并将组织固定在烟罩中。肿瘤结核在黑暗的背景下呈白色。

在下列协议中，我们将执行印度墨水膨胀技术，以验证肺转移。

要验证原发性肿瘤向肺部的转移，首先将小鼠置于聚苯乙烯板上的糖氨酸位置，并确保腿部畅通无阻地进入气管。用70%乙醇喷洒鼠标。然后，用一把剪刀沿着老鼠中腹的中线穿过肋骨笼，朝唾液腺切开。识别气管。然后，使用钳子去除周围的组织。

接下来，用一只手握住移液器尖端，在气管下螺纹尖端，轻轻地将组织向上抬起，远离身体。保持气管升高，旋转解剖平台180度。然后，在气管中插入半cc 27口径的结块素注射器，用印度墨水完全充气肺部，直到感觉到强烈的阻力。

然后，用一把剪刀切开气管。用一个钳子将鼠标放在原位，在肺部下插入另一个钳子，并将肺叶从小鼠身上拉出来。在烧嘴水中短暂冲洗肺部，并将组织转移到烟罩中。然后，将肺放在含有 3 毫升 Fekete 溶液的玻璃闪烁小瓶中，封盖小瓶以防止溶液蒸发。几分钟后，将肺转移到培养皿中，并计算单个、白色、转移性肿瘤结核的数量。