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신생아와 성인 중추 신경계에서 배양 소교 세포
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JoVE Journal Immunology and Infection
Culturing Microglia from the Neonatal and Adult Central Nervous System

신생아와 성인 중추 신경계에서 배양 소교 세포

Full Text
28,999 Views
11:28 min
August 9, 2013

DOI: 10.3791/50647-v

Robert Bronstein*1,2, Luisa Torres*2,3, Jillian C. Nissen*2,3, Stella E. Tsirka2

1Program in Neuroscience,Stony Brook University, 2Department of Pharmacological Sciences,Stony Brook University, 3Program in Molecular and Cellular Pharmacology,Stony Brook University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article outlines methods for the efficient isolation and culture of viable microglia from neonatal and adult mouse tissues. The procedure allows for the dissection and plating of cortical microglia within 90 minutes, with a microglial harvest occurring approximately 10 days later.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Cell Biology
  • Microglial Research

Background

  • Microglia are the primary immune cells in the central nervous system.
  • Isolation of microglia is crucial for studying their role in neuroinflammation and neurodegeneration.
  • Existing methods may not accurately reflect microglial behavior in vivo.
  • This study presents a novel approach to culture microglia that maintains their resting state.

Purpose of Study

  • To isolate primary microglial cells from neonatal and adult mouse tissues.
  • To provide a reliable method for studying microglial behavior.
  • To improve upon existing microglial culture protocols.

Methods Used

  • Dissection of neonatal mouse cortex or adult spinal cord.
  • Harvesting of cortical or spinal tissue for cell culture.
  • Digestion of tissue to isolate microglial cells.
  • Culture of isolated microglial cells until experimental use.

Main Results

  • Microglial cells can be isolated and cultured efficiently.
  • The protocol allows cells to return to a resting state.
  • Harvested cells can be analyzed using immunofluorescent microscopy.
  • The method provides a more accurate representation of microglial behavior.

Conclusions

  • The presented protocol is a significant improvement over traditional methods.
  • It enables researchers to study microglial cells in a more physiologically relevant state.
  • This approach may enhance our understanding of microglial functions in health and disease.

Frequently Asked Questions

What are microglia?
Microglia are the resident immune cells of the central nervous system, playing a crucial role in maintaining homeostasis and responding to injury.
Why is it important to isolate microglia?
Isolating microglia allows researchers to study their behavior and functions in detail, which is essential for understanding their role in neurological diseases.
How long does the isolation process take?
The dissection and plating of cortical microglia can be completed within 90 minutes, with harvesting occurring approximately 10 days later.
What advantages does this method have over traditional protocols?
This method allows microglial cells to return to a resting state, providing a more accurate representation of their in vivo behavior.
What techniques can be used to analyze the isolated microglia?
Isolated microglial cells can be analyzed using immunofluorescent microscopy to study their morphology and activation state.

우리는 신생아 대뇌 피질 성인 척수 가능한 미세 아교 세포의 효율적이고 신속한 분리 / 문화 방법을 설명합니다. 대뇌 피질의 미세 아교 세포의 해부 및 도금은 초기 박리 다음 장소 ~ 10 일을 복용 이후 미세 아교 수확으로 90 분 이내에 수행 할 수 있습니다.

이 절차의 전반적인 목표는 신생아 마우스 피질 또는 성인 마우스의 척수에서 1차 미세아교세포를 분리하는 것입니다. 이것은 먼저 출생 후 0일 또는 2마리의 새끼 쥐 또는 성인 척수의 뇌를 제거함으로써 수행됩니다. 다음으로, 신생아 조직에서 피질을 채취하거나 척수 조직을 소화합니다.

그런 다음 피질 및 척추 조직 세포를 실험적으로 사용할 때까지 배양합니다. 궁극적으로 수확된 신생아 및 성인 미세아교세포는 면역형광 현미경으로 분석할 수 있습니다. 혼합 피질 플레이트를 위해 미세아교세포를 흔드는 것과 같은 기존 방법에 비해 당사의 신생아 미세아교세포 배양 프로토콜의 주요 장점은 세포가 즉시 휴지 상태로 돌아가고 생체 내에서 미세아교세포 행동에 대한 보다 정확한 그림을 제공할 수 있다는 것입니다.

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