Внутреннее ухо чувствительного эпителия взрослых данио является хорошей модельной системой для понимания механизмов волосы регенерации клеток у взрослых позвоночных. Этот протокол демонстрирует прекрасный рассечение эпителия, через который мы можем получить образцы тканей для изучения регенеративных событий на клеточном и субклеточном уровнях.
Abstract
Нейросенсорная эпителия внутреннего уха являются ключевой структуры для слуха и равновесия функций. Таким образом, важно понимать, клеточном и молекулярном особенности эпителия, которые в основном состоят из двух типов клеток: волосковых клеток (УВ) и опорных клеток (ПК). Здесь мы выбираем для изучения внутреннего уха сенсорно эпителии у взрослых данио не только потому, эпителиальных структур хорошо сохранились и у всех позвоночных изучены, но и потому, что взрослые данио способен к регенерации УВ, возможность, что млекопитающие теряют вскоре после рождения. Мы используем внутреннего уха взрослых данио в качестве модельной системы для изучения механизмов внутреннего уха HC регенерации у взрослых позвоночных животных, которые могли бы быть полезными для клинической терапии слуха / баланс дефицита в человеческом, в результате потери HC.
Здесь мы показываем, как это сделать общей и мелкой вскрытия внутреннего уха сенсорно эпителия у взрослых рыбок данио. Валовой рассечение удаляет тканей, окружающих внутреннее ухо и полезно для подготовки срезов ткани, что позволяет нам изучить детальную структуру сенсорного эпителия. Штрафа рассечение очищает не-сенсорно-эпителиальные ткани каждого отдельного эпителия и позволяет рассматривать неоднородность целом эпителий легко в целом монтажа эпителиальных образцов.
Protocol
Часть 1: Подготовка ткани Эвтаназии взрослых данио с буфером MS-222 (3-этил аминобензоат метансульфонат соли, 0,03%). Обезглавьте рыбы. Отрежьте нижнюю челюсть, место голову на вскрытии пластины с вентральной стороной вверх, и иммобилизации ткани насекомых булавками. Удаление мягк…
Discussion
В этом протоколе, мы описали общей и мелкой рассечение внутреннего уха сенсорно эпителия взрослых данио, которая позволяет нам подготовить образец ткани для изучения клеточных и субклеточных особенностей сенсорного эпителия.
Для того, чтобы осуществлять успешное вскр…
Acknowledgements
Это исследование было поддержано Внутренние программы исследований Национальной геноме человека Научно-исследовательского института, Национального института здоровья.
Liang, J., Burgess, S. M. Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish (Danio rerio). J. Vis. Exp. (27), e1211, doi:10.3791/1211 (2009).