Midollare surrenale cromaffini sistemi di colture cellulari sono estremamente utili per lo studio della secrezione di accoppiamento eccitazione-in un ambiente in vitro. Questo protocollo illustra il metodo utilizzato per analizzare le ghiandole surrenali e quindi isolare la regione midollare strappando via la corteccia surrenale. La digestione del midollo in singole cellule cromaffini è poi dimostrato.
Abstract
Midollare surrenale cromaffini sistemi di colture cellulari sono estremamente utili per lo studio della secrezione di accoppiamento eccitazione-in un ambiente in vitro. Questo protocollo illustra il metodo utilizzato per analizzare le ghiandole surrenali e quindi isolare la regione midollare strappando via la corteccia surrenale. La digestione del midollo in singole cellule cromaffini è poi dimostrato.
Protocol
Abbreviazioni: ACC – surrenale cellule cromaffini, E. Soln – soluzione enzimatica, E. DMEM – Arricchito Dulbecco modificato Aquila Media Preparazione Aggiungi alla papaina quantità desiderata di E. Soln (40 unità papaina / 1ml E. Soln.). Attivare la papaina con CarboGen per circa 15 minuti in ghiaccio. Buffer di ossigenare di Locke sul ghiaccio pure. D…
Kolski-Andreaco, A., Cai, H., Currle, D. S., Chandy, K. G., Chow, R. H. Mouse Adrenal Chromaffin Cell Isolation. J. Vis. Exp. (2), e129, doi:10.3791/129 (2007).