Summary

एक उपन्यास आरएफपी रिपोर्टर आँखों Imaginal डिस्क के विज़ुअलाइज़ेशन में सहायता ड्रोसोफिला</em

Published: December 15, 2009
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Summary

हम एक उपन्यास लाल फ्लोरोसेंट प्रोटीन (आरएफपी) रिपोर्टर है कि विशेष रूप में व्यक्त किया है का वर्णन<em> ड्रोसोफिला</em> आँख. हम आँख imaginal डिस्क के विच्छेदन के लिए एक पद्धति के विस्तार और कैसे इस संवाददाता को विच्छेदन और विकासशील आंखों में विशिष्ट प्रकार की कोशिकाओं की पहचान में सहायता करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

Abstract

<em> ड्रोसोफिला</em> आँख neurogenesis, संकेत transduction और neurodegeneration जैसे क्षेत्रों के अध्ययन के लिए एक शक्तिशाली मॉडल प्रणाली है. खोजों के कई बनाया है इस प्रणाली का उपयोग विकासशील आँख imaginal डिस्क में फोटोरिसेप्टर भेदभाव के spatiotemporal प्रकृति का लाभ ले लिया है. इस प्रणाली का उपयोग करें यह पहली बार आवश्यक है के लिए शोधकर्ता की पहचान जानने के लिए और आंख डिस्क काटना. हम एक उपन्यास आरएफपी संवाददाता आँख डिस्क और विकासशील आंखों में विशिष्ट प्रकार की कोशिकाओं के दृश्य की पहचान में सहायता का वर्णन. हम तीसरे instar लार्वा से आंख imaginal डिस्क के विच्छेदन के लिए एक पद्धति के विस्तार और वर्णन कैसे रिपोर्टर आंख – आरएफपी इस विच्छेदन में सहायता कर सकते हैं. यह आंख आरएफपी संवाददाता केवल आंखों में व्यक्त किया है और visualized किया जा प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी या तो संकेत प्रवर्धन के लिए आवश्यकता के बिना जीना ऊतकों में या निर्धारण के बाद का उपयोग कर सकते हैं. हम यह भी बताएंगे कि कैसे इस संवाददाता आँख डिस्क के भीतर विशिष्ट कक्षों प्रकार की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इस प्रोटोकॉल और रिपोर्टर आंख – आरएफपी का उपयोग शोधकर्ताओं सहायता का उपयोग करेंगे<em> ड्रोसोफिला</em> आँख करने के लिए मूल रूप से महत्वपूर्ण जैविक सवालों के पते.

Protocol

<ol><li> पहले एक Sylgard डिश पर जगह पीबीएस के एक एक विदारक माइक्रोस्कोप के अंतर्गत ड्रॉप.</li><li> अगले एक शीशी बोतल या एक रंग का उपयोग कर से कई भटक तीसरे instar लार्वा को हटाने और उन्हें पीबीएस में जगह.</li><li> शुरू करने के लिए विच?…

Discussion

ड्रोसोफिला आँख imaginal डिस्क के विच्छेदन सीधा है, लेकिन मास्टर करने के लिए समय ले सकते हैं. महत्वपूर्ण कदम आँख डिस्क और लार्वा दिमाग से दूर विच्छेदन की पहचान कर रहे हैं. आँख डिस्क की पहचान आसान बना दिया ह?…

Acknowledgements

इस काम के किंग्स कॉलेज लंदन और रॉयल सोसाइटी द्वारा वित्त पोषित किया गया था.

References

  1. Doroquez, D. B., Rebay, I. . Crit Rev Biochem Mol Biol. 41 (6), 339-339 (2006).
  2. Kaul, A. K., Craig, G. M., McNeill, H., Bateman, J. M. . , .
  3. Barolo, S., Castro, B., Posakony, J. W. . Biotechniques. 36 (3), 436-436 (2004).

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Cite This Article
Kaul, A. K., Bateman, J. M. A Novel RFP Reporter to Aid in the Visualization of the Eye Imaginal Disc in Drosophila. J. Vis. Exp. (34), e1617, doi:10.3791/1617 (2009).

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