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Biology

एक उपन्यास आरएफपी रिपोर्टर आँखों Imaginal डिस्क के विज़ुअलाइज़ेशन में सहायता ड्रोसोफिला doi: 10.3791/1617 Published: December 15, 2009

Summary

हम एक उपन्यास लाल फ्लोरोसेंट प्रोटीन (आरएफपी) रिपोर्टर है कि विशेष रूप में व्यक्त किया है का वर्णन

Abstract

Protocol

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ड्रोसोफिला आँख imaginal डिस्क के विच्छेदन सीधा है, लेकिन मास्टर करने के लिए समय ले सकते हैं. महत्वपूर्ण कदम आँख डिस्क और लार्वा दिमाग से दूर विच्छेदन की पहचान कर रहे हैं. आँख डिस्क की पहचान आसान बना दिया है का उपयोग कर लाइन आंख - आरएफपी यहाँ वर्णित है. संभावित संशोधनों antennal डिस्क या peripodial झिल्ली को निकालने के लिए, या ऑप्टिक पीआर मस्तिष्क में प्रवेश axons कल्पना संलग्न पालि छोड़ रहे हैं.

लाइन आंख - आरएफपी क्लोनिंग द्वारा एक उपन्यास आँख विशिष्ट pred एच डंक बढ़ाने रिपोर्टर 3 वेक्टर में बताया P2 2 जीन की दूसरी intron से बढ़ाने तत्व उत्पन्न किया गया और इस का उपयोग करने के लिए ट्रांसजेनिक मक्खियों बनाने. रिपोर्टर आंख - आरएफपी पीआरएस का एक विशिष्ट सबसेट में और शंकु कोशिकाओं (चित्रा 2.) में व्यक्त किया है. इसलिए यह निर्धारित करने के लिए है कि ब्याज की एक जीन इन प्रकार की कोशिकाओं में व्यक्त किया है के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. आंख आरएफपी लाइन के अनुरोध पर उपलब्ध है.

विकासशील ड्रोसोफिला आँख जीन और आणविक रास्ते पीआर neurogenesis में एक नियंत्रित अध्ययन के लिए एक शक्तिशाली मॉडल है. पद्धति और रिपोर्टर यहाँ वर्णित करने के लिए इस प्रक्रिया की समझ को आगे करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

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Acknowledgments

इस काम के किंग्स कॉलेज लंदन और रॉयल सोसाइटी द्वारा वित्त पोषित किया गया था.

References

  1. Doroquez, D. B., Rebay, I. Crit Rev Biochem Mol Biol. 41, (6), 339-339 (2006).
  2. Kaul, A. K., Craig, G. M., McNeill, H., Bateman, J. M. Forthcoming.
  3. Barolo, S., Castro, B., Posakony, J. W. Biotechniques. 36, (3), 436-436 (2004).
एक उपन्यास आरएफपी रिपोर्टर आँखों Imaginal डिस्क के विज़ुअलाइज़ेशन में सहायता<em> ड्रोसोफिला</em
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Kaul, A. K., Bateman, J. M. A Novel RFP Reporter to Aid in the Visualization of the Eye Imaginal Disc in Drosophila. J. Vis. Exp. (34), e1617, doi:10.3791/1617 (2009).More

Kaul, A. K., Bateman, J. M. A Novel RFP Reporter to Aid in the Visualization of the Eye Imaginal Disc in Drosophila. J. Vis. Exp. (34), e1617, doi:10.3791/1617 (2009).

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