Undecalcified骨の組織学、臨床と研究のさまざまなアプリケーションのための重要な情報を提供します。それは、特に大きなサイズの標本で、技術的に困難です。このビデオでは、良質のセクションを生成するプロセスを示していますし、それらを克服することで技術的な問題とメソッドを示しています。
Undecalcified骨組織は、骨のマイクロアーキテクチャを示しています。それは、骨代謝や骨形成と骨吸収に関する重要な情報を提供する骨の鉱化と細胞成分の両方を示しています。これは、臨床と研究のさまざまなアプリケーションにおいて非常に大きな重要性を持っています。それは、美しい画像1を得られますし、そのような蛍光色素の評価や組織形態計測2のようなテクニックが可能になります。蛍光色素の分析ではカルシウムに結合する蛍光色素がその時点で鉱化量の定量化を可能にする特定の時点、で注入されている技術です。組織形態計測は、顕微鏡レベルで骨の定量化のプロセスです。
undecalcified骨の組織学を実行すると、特に大きなサイズの標本で、技術的に困難です。それは組織学を埋め込まれた標準的なパラフィンで使用されているものから技術の変化を必要とします。このビデオでは、良質のセクションを生成するプロセスを示していますし、それらを克服することで技術的な問題とメソッドを示しています。試料の準備、固定と処理が他の軟部組織と同様の方法で達成されている、しかし密度に起因すると骨の低透過性がかなり長く固定して、処理時間が必要とされる、多くの場合、数週間服用。埋め込みは、メタクリレート系樹脂などの骨に似てたり、同じ硬さと密度との支持体を使用して達成が、パラフィン浸透および埋め込みとは異なり、これは不可逆的な段階です。切片は、蛍光分析などの研究に最適な厚いセクションを、産生する研削することによって達成することができます。これは、最善のmacrotomeにダイヤモンドブレードを使用して実現されます。また、薄い切片を光学顕微鏡のために製造することができ、これは非常に鋭い刃でそりのミクロトームを使用して実現されます。そりミクロトームは、大規模な、ハードブロックに必要な追加の強度と安定性を提供します。樹脂埋込みのセクションは、実証されている汚れの様々な、で染色することができます。
著者は、彼女の研究室の専門知識のための樹脂の埋め込みとMsステファニの墓の中に彼女の専門知識にMSスーコネルの支援に感謝したい。著者は、彼らのアドバイスを教授フランクKandzioraと博士マリー=アンヌPolbothに感謝したいと思います。
Goldner’s Trichrome stain
1. Weigert’s iron hemotoxylin (DeGroat)
Filtered and added to equal volume of hemotoxylin immediately before stain used.
2. Ponceau-fuchsin-azophloxin stock solutions
3. Light Green Solution
4. Phophomolybdic acid-Orange G solution
Von Kossa Stain
Alcian blue stain
Hemotoxylin and Eosin stain
All stain dye powders are Gurr dye powders. All reagents are analytical reagents, and not Lab reagents
Fluorochromes