माउस oocytes की पुनर्प्राप्ति

Summary

इस प्रोटोकॉल या oocytes चूहों के oviduct से प्रारंभिक अवस्था निषेचित भ्रूण निकालने के लिए तकनीक दिखाता है. infindibulum पहचान करने और इसे में एक कुंद अंत सुई डालने की क्षमता सही ढंग से प्रक्रिया के प्रदर्शन के लिए आवश्यक है.

Abstract

तिथि करने के लिए, केवल कुछ अध्ययनों Peromyscus embryogenesis या प्रजनन जीव विज्ञान के सफल जोड़तोड़ की सूचना दी है. Peromyscus आनुवंशिक स्टॉक केंद्र (http://stkctr.biol.sc.edu) के साथ मिलकर, हम इस प्रणाली को विकसित करने की जरूरत प्रमुख मतभेद निस्र्पक हैं. एक प्राथमिक लक्ष्य oocyte / जल्दी भ्रूण पुनर्प्राप्ति का अनुकूलन करने के लिए किया गया है.

Protocol

भ्रूण / Oocyte पुनर्प्राप्ति भ्रूण / oocytes की पुनर्प्राप्ति से पहले कम से कम दो घंटे, KSOM 37 º सी सीओ 2 इनक्यूबेटर और FHM में रखा गया है -20 डिग्री से thawed होना चाहिए. एक गिलास पकवान युक्त तीन अवतल उथले कुओं KSOM के इन्?…

Discussion

इस अनुच्छेद में, हम ovulation प्रेरित Peromyscus (superovulated) से oocytes की पुनर्प्राप्ति प्रदर्शित करता है. superovulation (के रूप में प्राकृतिक estrous चक्र विरोध) का उपयोग के कारण बहुत अधिक जिसके परिणामस्वरूप संख्या के लिए आम है. हालांकि, सावधानी…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Flushing needle	Tool	Zephyrtronics	ZT5-130-L	30 gauge blunt
Forceps (2)	Tool	Roboz	RS-5060
Peromyscus	Animal	Peromyscus Genetic Stock Center
Scissors	Tool	Roboz	RS-5880
FHM HEPES Buffered Media	Reagent	Specialty Media	MR-025-d
KSOM Embryo Culture Medium (5×10 ml)	Reagent	Specialty Media	MR-020P-5F
Mouth Pipette	Tool			Pulled from glass capillaries and attached to rubber tubing
Oocyte holding dish	Tool			Glass container with concave divets