Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Tuina i en frossen skulderrottemodell: En effektiv og reproduserbar protokoll

Published: July 21, 2023 doi: 10.3791/65440

Summary

Denne studien utvikler en effektiv og reproduserbar Tuina-protokoll for behandling av frossen skulder etablert i en rottemodell. Denne tilnærmingen vil bidra til å studere Tuina-terapibehandlingsmetoden for frosne skuldre.

Abstract

Frozen shoulder (FS) er en vanlig tilstand uten definert optimal behandling. Tuinaterapi, en tradisjonell kinesisk medisin (TCM) teknikk som brukes til å behandle FS-pasienter på kinesiske sykehus, har vist gode resultater, men mekanismene er ikke fullt ut forstått. Basert på en tidligere studie, hadde dette arbeidet som mål å utvikle en Tuina-protokoll for en FS rottemodell. Vi delte tilfeldig 20 SD-rotter inn i kontrollgrupper (C; n = 5), FS-modell (M; n = 5), FS-modell Tuinabehandling (MT; n = 5) og FS-modell oral behandling (MO; n = 5) grupper. Denne studien brukte støpt immobiliseringsmetode for å etablere FS rottemodell. Effekten av Tuina og peroral deksametason på glenohumeralt bevegelsesområde (ROM) ble evaluert, og de histologiske funnene ble vurdert. Vår studie viste at Tuina og oral deksametason var i stand til å forbedre skulderaktiv ROM og bevare kapselens struktur, med Tuina-terapi som viste seg å være mer effektiv enn oral deksametason. Avslutningsvis var Tuina-protokollen etablert i denne studien svært effektiv for FS.

Introduction

Frozen shoulder (FS), også kjent som adhesiv kapsulitt i skulderen, er en selvbegrensende sykdom preget av skuldersmerter og mobilitetsunderskudd. Det påvirker vanligvis mennesker mellom 30 og 70 år, med en gjennomsnittsalder på 50 år, og har en prevalens på rundt 5% i den kinesiske befolkningen1. Kvinner er rapportert å ha en 1,6 ganger høyere forekomst av FS sammenlignet med menn2. Forekomsten av FS er høyere hos personer med diabetes, glukose og lipidmetabolismeforstyrrelser eller andre relaterte sykdommer, mellom 10% og 36%2,3. Nåværende kliniske behandlinger for FS inkluderer fysioterapi, steroid medisiner og kirurgiske behandlinger4.

Tuina, en tradisjonell kinesisk medisin (TCM) terapi, har vist seg å effektivt lindre skuldersmerter hos FS-pasienter, og forbedre livskvaliteten 5,6. Imidlertid er de underliggende mekanismene for denne behandlingen ikke godt forstått. Derfor er bruk av dyremodeller for å studere effekter og mekanismer av Tuina i behandling av FS avgjørende.

Rotte skulderleddet har en kompleks struktur som ligner på den menneskelige skulderen og brukes ofte i mekanistiske studier av FS7. FS rottemodellen er preget av en nedgang i glenohumeral ROM og kapselfibrose8. Videre tillater denne modellen observasjon av skulderkapselen og muliggjør patologisk forskning mens du reparerer skaden9. Videre brukes orale kortikosteroider ofte som kontrollgruppe i FS-behandlingsforskning10. Denne studien tar sikte på å utvikle en Tuina-protokoll for FS-rottemodellen og demonstrerer muligheten for å gjennomføre dyreforsøk i Tuina-forskning ved å sammenligne effekten av Tuina-terapi og oral deksametason.

Protocol

Denne studien ble godkjent av etikkomiteen ved Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine (Antall: AWE-2022-023).

1. Forsøksdyr

  1. Tjue mannlige Sprague-Dawley (SD) rotter (7 uker gamle, 250-280 g) ble plassert i standardforhold (romtemperatur [RT] 20-24 ° C, fuktighet 40% -60%, og en 12 h / 12 h lys / mørk syklus).

2. Gruppering metode

  1. Grupper SD-rottene i kontrollgruppe (C), FS-modell kontrollgruppe (M), FS-modell Tuina behandlingsgruppe (MT) og FS-modell oral behandlingsgruppe (MO), hver bestående av 5 rotter. Hold 5 rotter per bur (samme gruppe).
  2. Etter 7 dagers akklimatisering, immobiliser den ene skulderen til rottene i M-, MT- og MO-gruppene ved hjelp av gipsstøpt immobilisering i 3 uker for å etterligne FS som beskrevet i neste avsnitt.
  3. Administrer Tuinabehandling til rotter i MT-gruppen i 2 uker, som beskrevet i avsnitt 4 (figur 1).
  4. Beregn den nødvendige dosen av deksametason for hvert kilo rotter (0,0675 mg / dag) basert på voksendosen (0,75 mg / dag) og forholdet mellom rotte og kroppsoverflateareal (0,018).
  5. Administrer daglig intragastrisk deksametason oppløsning til rotter i MO-gruppen med 0,067 mg/kg/dag kl. 07:00 i 2 uker.
    MERK: Bruk denne grupperingsmetoden for å bekrefte effekten av Tuina-protokollen i denne studien. Utfør grupperingsmetoden i henhold til eksperimentelle formål i ulike studier.

3. Utvikling av FS-modellen

  1. Bedøve rotter ved bruk av tribromoetanol (250 mg/kg, ved intraperitoneal injeksjon)11.
    MERK: I samsvar med kravene fra institusjonens etiske komité ble det lagret en stamløsning bestående av tribomoetanol (10 g) og tert-amylalkohol (10 ml) ved 4 °C.  Før bruk ble den fortynnet til 2% med destillert vann.
  2. Påfør plasterdynkede bandasjer på rottenes høyre skulder og bryst, og hold høyre forben ved 90° innvendig rotasjon av skulderleddet i 3 uker (figur 2)12.
    MERK: Overvåk rotter for å sikre at de kan utføre normale fysiologiske aktiviteter som å gå, spise og drikke. Refix gipsbandasjen hvis rotterne ikke kan utføre normale fysiologiske aktiviteter.
  3. Bekreft vellykket etablering av FS-modellen ved å observere utviklingen av symptomer som stivhet i høyre skulderledd, sammentrekning av høyre øvre lem, muskelatrofi og halting hos rotter13.

4. Tuina-metoden

MERK: Gjennom hele prosedyren må etterforskeren bruke personlig verneutstyr. Bare én profesjonell Tuina-lege må utføre alle manipulasjoner (figur 3, figur 4 og figur 5).

  1. Tren etter parameterbestemmelsessystemet Intelligent massasjeteknikk, som inkluderer en mekanoreceptor og en datamaskin (figur 3A).
    1. Utfør manipulasjoner på mekanoreceptor- og kraftparametrene i tre retninger vist gjennom programvare (figur 3B).
    2. Bruk tommelfingeren til å utføre rotatorisk eltemetode i en roterende bevegelse med en styrke på 0,5 kg og en frekvens på 100-120 ganger/min (figur 3C).
    3. Bruk fingertuppen til tommelen til å utføre punktpressemetoden med en styrke på 0,5 kg (figur 3D).
    4. Utfør Tuina på rottene ved å opprettholde det mekaniske displayet nevnt i trinn 4.1.2 og 4.1.3 i 1 min.
  2. Hold rotta til den roer seg (~2 min). Deretter utfører du manipulasjonen. Plasser rotta i lateral liggende stilling, men posisjonen kan endres basert på forskjellige manipulasjonsmetoder.
  3. Bruk høyre pekefinger og langfinger til å klemme høyre forben på rotta og bøye og strekke den flere ganger for å bestemme posisjonene til rottens skulderledd, albueledd og humerus.
  4. Elt høyre skulder, forben og rygg på rotta med urviseren med tommelmassen med en styrke på 0,5 kg og en frekvens på 100-120 ganger/min i 3 minutter (figur 4A-C).
    1. Manipulere forbenet muskler i lateral liggende stilling.
    2. Manipuler skulder- og ryggmusklene i utsatt stilling.
  5. Trykk acupoint LI15 (Jianyu), SI11 (Tianzong), HT01 (Jiquan,) og LI11 (Quchi) vertikalt med tommelfingertuppen 30 ganger per akupunkt med en styrke på 0,5 kg (figur 4D-G).
    1. Bruk rat-acupoint-atlaset til å definere plasseringen av hvert akupunkt (figur 5)14,15.
    2. Trykk LI15, som ligger i depresjonen fremre-dårligere enn den akromiale enden, i utsatt stilling.
    3. Trykk SI11, som ligger i depresjonen til infraspinatus fossa i midten av scapular ryggraden, i utsatt stilling.
    4. Trykk HT01, som ligger i axilla-senteret, i den bakre posisjonen.
    5. Trykk LI11 som ligger i depresjonen medialt til extensor carpi radialis i den laterale enden av den cubitale folden i lateral liggende stilling.
  6. Hold skulderleddet med venstre tommel og langfinger, og strekk forbenet i adduksjons-, abduksjons-, fremre ekstensjons- og bakre forlengelsesposisjoner i 10 s (figur 4H-K).
    MERK: Denne strekkmetoden må utføres uten motstand hos rotter.
  7. Pause Tuina-prosedyren hvis rotta blir urolig. Stryk rotta i 10 s for å roe den ned, og fortsett deretter med forsøket.
  8. Utfør prosedyren daglig i 2 uker.

5. Måling av glenohumeral ROM

MERK: Det er viktig å fullføre måleprosessen så raskt som mulig for å forhindre degenerasjon av leddkapselvevet.

  1. Fjern scapulaen og proksimale to tredjedeler av humerus en bloc etter å ha ofret rotta med en overdreven dose tribromoetanol (3x startdose, ved intraperitoneal injeksjon), og utsett den nedre kanten av scapulaen.
  2. Stikk en injeksjonskanyle (1,2 cm x 0,45 mm) langs humeralskaftet inn i humeralhodet.
  3. Sett to injeksjonsnåler vertikalt inn i øvre og nedre hjørner av scapulaen på plastskum innpakket med et sterilt kirurgisk ark.
  4. Fest en tynn tråd til injeksjonsnålen på humeralakselen og trekk den i den andre enden med en 5 g kraft for å gjøre den parallell med humeralakselen. Mål vinkelen mellom den nedre kanten av scapulaen og humeralskaftet (figur 6).
    MERK: For å sikre pålitelige resultater, få en egen etterforsker til å utføre målingene.
  5. Rapportere data som ±standardavvik (SD) ved hjelp av et statistisk analyseprogram.
    MERK: SPSS-programvare (SPSS, versjon 25.0) ble brukt her.
  6. Analysere forskjellene mellom grupper ved hjelp av enveis variansanalyse (ANOVA).
  7. Få strekgrafikk ved hjelp av passende programvare.
    MERK: GraphPad Prism 8 ble brukt her.
  8. Vurder kapselpatologi ved hjelp av H&E og Masson-farging etter måling.

6. Seksjon forberedelse

  1. Etter evaluering av glenohumeral ROM, fikser hele prøver i 4% PFA i 3 dager, etterfulgt av avkalkning i EDTA (pH 7,2) løsning i ytterligere 2 måneder.
  2. Etter dehydrering skjærer du innebygde vevsblokker som inneholder prøvene i 5 μm skiver16.
  3. Tørk skiven ved 65 °C i 60 min.
  4. Avvoks skiven.
  5. Bløtlegg skiven i xylen I, xylen II og xylen III i 7 minutter, etterfulgt av en synkende etanolserie (vannfri etanol, 5 min; 95% etanol, 2 min; 80% etanol, 2 min og 70% etanol, 2 min), og til slutt i ultrarent vann i 2 minutter.

7. Farging av H&E

  1. Beis seksjonene med hematoksylin i 5 minutter, skyll med 1% saltsyreetanol i 3 s, og vask med rennende vann i 5 minutter.
  2. Beis seksjonen med eosin i 3 min og vask med vann fra springen.
  3. Bløtlegg seksjonen i en etanolserie (95% etanol I, 3 s; 95% etanol II, 3 s; vannfri etanol I, 3 s og vannfri etanol II, 1 min) og senk den deretter ned i en xylenserie (xylen I, 1 min; xylen II, 1 min).
  4. Legg en dråpe nøytral tannkjøttforsegling på hver prøve. Forsegl hver prøve med et dekselglass.
  5. Samle bilder ved hjelp av et invertert fluorescensmikroskop (skalastang = 100 μm).

8. Masson farging

  1. Bruk en immunhistokjemisk penn til å tegne en sirkel rundt seksjonene og inkuber deretter seksjonene i Bouins løsning i 2 timer ved 37 °C til mordant. Deretter vasker du seksjonene med vann til den gule fargen forsvinner.
  2. Behandle prøvene med lapis lazuli blått fargestoff i 3 min og vask dem deretter med destillert vann.
  3. Etter farging av seksjonene med hematoksylin (Mayer) i 2 minutter, behandle seksjonene i 3 s i den sure etanoldifferensieringsløsningen. Vask deretter seksjonene i rennende vann i 10 minutter.
  4. Beis seksjonene med ponceau magenta fargestoffløsning i 10 minutter og vask dem deretter med vann.
  5. Fordyp seksjonene i fosfolybdisksyreoppløsningen i 10 minutter.
  6. Legg anilinblå fargeløsning til seksjonene i 5 minutter, og vask dem deretter med en svak syrearbeidsløsning i 2 minutter.
  7. Dehydrer og gjør avsnittene gjennomsiktige som beskrevet i trinn 7.3.
  8. Plasser en dråpe nøytralt tannkjøttforseglingsmiddel på hver seksjon og dekk den med et dekselglass. La delene ligge i en avtrekkshette til tørk.
  9. Samle inn bilder som beskrevet i trinn 7.5.

Representative Results

Den fysiske aktiviteten til rotter ble observert for å evaluere suksess eller fiasko for FS-modellen. En tidligere studie viste at støpt immobilisering signifikant reduserte tilbakelagt distanse og ganghastighet sammenlignet med normale rotter17. En annen forskning antydet at FS ikke påvirket tilbakelagt distanse, og halting var det vanligste presenterende symptomet13. Denne studien viste stivhet i høyre skulderledd, sammentrekning av høyre overekstremitet, muskelatrofi og halting hos rotter etter modellering. Disse lesjonene i MT- og MO-gruppene ble fullstendig borte etter 2 ukers intervensjon. Men det var ingen signifikant endring i M-gruppen.

Det primære kriteriet for å evaluere effektiviteten av Tuina i FS er måling av glenohumeral ROM18. Vi observerte at gjennomsnittsverdiene for glenohumeral ROM var 149,3° ± 5,9° i C-gruppen, 111,1° ± 3,9° i M-gruppen, 128,5° ± 2,8° i MT-gruppen og 119,56° ± 2,9° i MO-gruppen. Som vist i figur 7 var glenohumeral ROM hos rotter i M-gruppen signifikant lavere enn i C-gruppen (P < 0,0001). Videre var ROM-en i MT-gruppen og MO-gruppen betydelig høyere enn i M-gruppen (P < 0,05, P < 0,0001). Imidlertid var ROM-en i MO-gruppen signifikant lavere enn i MT-gruppen (P < 0,0001). Dette funnet tyder på at Tuina kan forbedre skulderleddfunksjonen betydelig hos FS-rotter.

I tillegg kan H &E farging og Masson farging ytterligere demonstrere effekten av Tuina i å bevare strukturen og redusere fibrose i kapsel. For å lette observasjonen ble kapselen i glenohumeralleddet brukt til histologiske funn. Skulderleddkapselen består av synoviale og fibrøse lag19. H&E-farging viste synoviocyttproliferasjon, flate synovialfolder, erytrocytstase og vaskulær proliferasjon i M-gruppen, som er typiske trekk ved FS (figur 8A,B). Disse trekkene ble til en viss grad redusert etter behandling med tubina og peroral deksametason (figur 8C,D). Sammenlignet med MT-gruppen viste MO-gruppen også mye synovialceller. Massonfarging viste arrangementet av fiberbunter i hver gruppe (gule piler). Kapselen består av et løst nettverk av retikulære fibre med fiberbunter arrangert i pen retning (figur 8E). I M-gruppen var fiberbuntene ordnet uordnet, noe som indikerer kapselfibrose (figur 8F). Kapslene til rotter i MT-gruppen viste at fiberbuntene er pent og tydelig stratifisert, men forblir litt uordnet i MO-gruppen (figur 8G,H).

Figure 1
Figur 1: Protokoll for etablering av FS-modellen og Tuina-intervensjon. Rottene var på adaptiv fôring i 7 dager, FS modelletablering i 21 dager, og Tuinabehandling ble utført daglig i 14 dager. På dag 36 ble alle rotter ofret. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 2
Figur 2: Støpt immobilisering for etablering av en rottemodell av FS. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 3
Figur 3: Kvantitativ kontroll av manipulasjon . (A) Intelligent massasjeteknikk parameterbestemmelsessystem. (B) Tre krefter kan måles som parallell kraft langs X-retningen, langsgående kraft langs Y-retningen og vertikal kraft langs Z-retningen. (C) Styrken av rotatorisk eltemetode. Den røde kurven representerer den stabiliserte vertikale kraften (0,5 kg). Den oransje kurven representerer den vanlige parallelle kraften. Den hvite kurven representerer den vanlige langsgående kraften. (D) Styrken av punktpressemetoden. Den røde kurven representerer den vertikale kraften (0,5 kg). Oransje og hvite kurver representerer ikke-parallelle og langsgående krefter. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 4
Figur 4: Manipulasjon brukt i Tuina-terapi. (AC) Elt muskler i høyre skuldre, forben og rygg. (VG Nett) Pek på LI15, SI11, HT01 og LI11. (VG Nett) Strekk forbenet i adduksjons-, bortførings-, fremre forlengelses- og bakre forlengelsesposisjoner. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 5
Figur 5: Anatomiske posisjoner for LI15, SI11, HT01 og LI11 hos rotter. ● Lateral overflate, ○ Medial overflate. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 6
Figur 6: Måling av glenohumeral ROM. En tynn tråd er festet til en injeksjonsnål satt inn i humeralakselen og trukket i den andre enden med en 5 g kraft for å gjøre den parallell med humeralakselen. Vinkelen mellom den nedre kanten av scapulaen og humeralskaftet måles som glenohumeral ROM. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 7
Figur 7: Glenohumeral ROM over tre grupper av rotter. Verdier er midler ± S.D., n = 5. Signifikante forskjeller er indikert med enveis ANOVA (a P < 0,001 og bP < 0,0001). Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 8
Figur 8 Histologiske funn av skulderkapselen. (A,E) Kontrollgruppen inneholder en normal kapselstruktur (H&E og Masson farging). (B,F) FS-modellgruppen illustrerer endringer i kapselens struktur på følgende måte: flate synovialfolder, kapselfibrose og forstyrrede fiberbunter (H&E og Masson-farging). (C,G). FS-modellen kombinert med Tuina-gruppen illustrerer at kapselens struktur er nær normal, og fibrose er ikke opplagt (H&E og Masson-farging). (D,H) FS-modellen kombinert med peroral deksametason viser at kapselstrukturen er tilnærmet normal, og fibrose er tydelig (H&E- og Massonfarging). Skala bar = 100 μm. HH: leder av humerus; svart pil: synovial folder; rød pil: erytrocytstasis og vaskulær proliferasjon; Gul pil: fiberbunter. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Discussion

Det første kritiske trinnet er modellvalg. På grunn av vanskeligheten med å implementere den primære FS-modellen, brukes støpt immobilisering og kirurgisk intern fiksering ofte til å etablere FS rottemodeller 9,12. Den mest alvorlige begrensningen av skuldermobilitet og fibrose av kapselen ble observert i FS-modellen etablert ved støpt immobilisering i 3 uker12,20. I denne studien var suksessraten for FS-modellen utmerket, med 100% suksess.

Det andre kritiske trinnet er manipulasjonene som brukes i denne protokollen. Tre manipulasjoner (elting, pressing og strekking) ble brukt i denne studien. Bløtvevets eltemanipulasjon ble påført skulder, scapula og overarm for å slappe av musklene. Trykkmanipulasjon ble utført ved å trykke på akupunkter som LI15, SI11, HT01 og LI11, som er mest brukt i klinisk praksis for FS 5,21. LI15, SI11 og HT01 er plassert i posisjoner rundt skulderkapselen og kan være effektive for å forbedre ROM- og skulderfunksjon22. LI11 brukes ofte til motorisk funksjonsnedsettelse i øvre ekstremiteter og ligger i samme meridian som LI15. Denne akupunktmatchingsmetoden bidrar til å forbedre effekten av LI1523. Etter full avslapning ble det brukt strekkteknikker for å gjenopprette funksjonelle aktiviteter.

Det mulige problemet i denne protokollen er at rotter viser intens motstand under Tuina, noe som kan være forårsaket av frykt i stedet for å overskride toleransen til rotter. På dette tidspunktet bør manipulasjonene stoppes til rottene roer seg (strøk i 10 s beroliger rotter). I tillegg bør omfanget av strekk justeres i henhold til symptomene på rotter. I utgangspunktet var begrensningen av skulderleddet åpenbar, og strekkamplituden var liten. Sammen med intervensjonen ble rotternes skulderleddfunksjon gradvis gjenopprettet og amplituden til strekningen økte gradvis. Standarden er at rotter kan akseptere strekkmetoden uten motstand. Endelig har rotter en viss grad av aggresjon, og Tuina krever langvarig kontakt med rotter, så det er viktig å bruke personlig verneutstyr.

Den kvantitative kontrollen av manipulasjon er den vanskeligste i Tuina-eksperimenter. Mens en massasjemanipulasjonssimulator kan brukes til å kontrollere styrken og frekvensen av en enkelt manipulasjon, er denne metoden begrenset når flere manipulasjoner og behandlingssteder er involvert24,25. I klinisk praksis utføres Tuina vanligvis direkte av utøvere, og i denne studien var det vanskelig å gripe inn med medisinsk utstyr. For å kontrollere stimuleringen kan det intelligente massasjeteknikken parameterbestemmelsessystem brukes til å standardisere treningen av Tuina. Etter trening kan etterforskeren til en viss grad bruke samme kraft på hver rotte. Den største begrensningen i denne protokollen er at manipulasjoner ikke kan kontrolleres fullstendig.

TCM Tuina-terapi har en rik historie med bruk over hele Kina, med ulike leger på sykehus som bruker forskjellige manipulasjons- og behandlingsstedkombinasjoner. Derfor er det viktig å etablere replikerbare og effektive protokoller for både dyreforsøk og kliniske studier. I denne studien var manipulasjonene og akupunktene som ble brukt basert på en tidligere studie av teamet vårt, som kombinerte vår kliniske erfaring med egenskapene til FS dyremodell21. Denne studien demonstrerte effektiviteten av den utviklede Tuina-protokollen for å forbedre skulderleddfunksjonen og redusere kapselfibrose hos FS-rotter. Disse funnene gir grunnlag for videre undersøkelser av mekanismene som ligger til grunn for Tuina-behandling. Videre kan protokollen være nyttig for forskere som er interessert i å utforske effekten av alternative medisinske behandlinger for FS.

En tidligere studie fant at mekanismen for Tuina-intervensjon på fibrose kan være relatert til nedregulering av TGF-β og CTGF mens man regulerer balansen mellom MMP-1 / TIMP-1, og dermed lindrer produksjonen av ekstracellulær matrise (ECM) 26. Effekten av Tuina på fibrose av skulderkapselen kan oppnås gjennom regulering av ulike mekanismer. Imidlertid er det nødvendig med ytterligere forskning for å forstå mekanismene som er involvert i denne forbedringen fullt ut.

Disclosures

Forfatterne har ingenting å avsløre.

Acknowledgments

Dette arbeidet ble støttet av 2020 Science and Technology Development Plan i Jinan City (tilskuddsnummer 202019059), Traditional Chinese Medicine Science and Technology Project of Shandong Province (tilskuddsnummer 2021Q080), og Qilu School of Traditional Chinese Medicine Inherit Project (tilskuddsnummer [2022]93).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
4% paraformaldehyde Solarbio P1110
Embedding machine Changzhou Paisijie Medical Equipment Co., Ltd BM450A
Ethylene Diamine Tetraacetic Acid (EDTA) Solarbio E1171
Hematoxylin eosin (HE) staining kit Sparkjade EE0012
Intelligent-massage technique parameter determination system Shanghai Dukang Intrument Equipment Co. Ltd ZTC-Equation 1
Microtome Leica 531CM-Y43

Modified Masson Trichrome Staining Solution
Shanghai yuanye Bio-Technology Co., Ltd R20381-8 Bouin 50 mL;
lapis lazuli blue dye 50 mL;
Hematoxylin (Mayer) 50 mL;
acidic ethanol differentiation solution 50 mL;
ponceau magenta dye solution 50 mL;
phosphomolybdic acid solution 50 mL;
aniline blue staining solution 50 mL;
 weak acid 50 mL
Tribromoethanol Macklin T903147-5

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Li, W., LU, N. Z., Xu, H. L., Wang, H. F., Huang, J. Case control study of risk factors for frozen shoulder in China. International Journal of Rheumatic Diseases. 18 (5), 508-513 (2015).
  2. Degreef, I., Steeno, P., De Smet, L. A survey of clinical manifestations and risk factors in women with Dupuytren's disease. Acta Orthopaedica Belgica. 74 (4), 456-460 (2008).
  3. Tighe, C. B., Oakley, W. S. Jr. The prevalence of a diabetic condition and adhesive capsulitis of the shoulder. Southern Medical Journal. 101 (6), 591-595 (2008).
  4. Cho, C. H., Bae, K. C., Kim, D. H. Treatment strategy for frozen shoulder. Clinics in Orthopedic Surgery. 11 (3), 249-257 (2019).
  5. Liu, M., et al. Effects of massage and acupuncture on the range of motion and daily living ability of patients with frozen shoulder complicated with cervical spondylosis. American Journal of Translational Research. 13 (4), 2804-2812 (2021).
  6. Ai, J., Dong, Y. K., Tian, Q. D., Wang, C. L., Fang, M. Tuina for periarthritis of shoulder: A systematic review protocol. Medicine. 99 (11), e19332 (2020).
  7. Norlin, R., Hoe-Hansen, C., Oquist, G., Hildebrand, C. Shoulder region of the rat: anatomy and fiber composition of some suprascapular nerve branches. The Anatomical Record. 239 (3), 332-342 (1994).
  8. Okajima, S. M., et al. Rat model of adhesive capsulitis of the shoulder. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (139), 58335 (2018).
  9. Zhao, H. K., et al. Tetrandrine inhibits the occurrence and development of frozen shoulder by inhibiting inflammation, angiogenesis, and fibrosis. Biomedicine & Pharmacotherapy. 140, 111700 (2021).
  10. nar, B. M., Battal, V. E., Bal, N., Güler, ÜÖ, Beyaz, S. Comparison of efficacy of oral versus intra-articular corticosteroid application in the treatment of frozen shoulder: An experimental study in rats. Acta Orthopaedica et Traumatologica Turcica. 56 (1), 64-70 (2022).
  11. Dias, Q. M., Rossaneis, A. C., Fais, R. S., Prado, W. A. An improved experimental model for peripheral neuropathy in rats. Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 46 (3), 253-256 (2013).
  12. Kim, D. H., et al. Characterization of a frozen shoulder model using immobilization in rats. Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 11 (1), 160 (2016).
  13. Feusi, O., et al. Platelet-rich plasma as a potential prophylactic measure against frozen shoulder in an in vivo shoulder contracture model. Archives of Orthopaedic and Trauma Surgery. 142 (3), 363-372 (2022).
  14. Yin, C. S., et al. A proposed transpositional acupoint system in a mouse and rat model. Research in Veterinary Science. 84 (2), 159-165 (2008).
  15. Guo, X. R., et al. Study on the regulatory mechanism of electroacupuncture based on thyroid pathway for mammary gland hyperplasia rats. Zhongguo Zhen Jiu. 38 (8), 857-863 (2018).
  16. Feldman, A. T., Wolfe, D. Tissue processing and hematoxylin and eosin staining. Methods in Molecular Biology. 1180, 31-43 (2014).
  17. Taguchi, H., et al. A rat model of frozen shoulder demonstrating the effect of transcatheter arterial embolization on angiography, histopathology, and physical activity. Journal of Vascular and Interventional Radiology: JVIR. 32 (3), 376-383 (2021).
  18. Oki, S., et al. Generation and characterization of a novel shoulder contracture mouse model. Journal of Orthopaedic Research. 33 (11), 1732-1738 (2015).
  19. Kubo, H., et al. Histologic examination of the shoulder capsule shows new layer of elastic fibres between synovial and fibrous membrane. Journal of Orthopaedics. 22, 251-255 (2020).
  20. Cho, C. H., Lho, Y. M., Hwang, I., Kim, D. H. Role of matrix metalloproteinases 2 and 9 in the development of frozen shoulder: human data and experimental analysis in a rat contracture model. Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 28 (7), 1265-1272 (2019).
  21. Wang, J. M., et al. Efficacy and safety of Tuina and intermediate frequency electrotherapy for frozen shoulder: MRI-based observation evidence. American Journal of Translation Research. 15 (3), 1766-1778 (2023).
  22. Ben-Arie, E., et al. The effectiveness of acupuncture in the treatment of frozen shoulder: A systematic review and meta-analysis. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2020, 9790470 (2020).
  23. Zou, F., et al. The impact of electroacupuncture at hegu, shousanli, and quchi based on the theory "Treating flaccid paralysis by Yangming alone" on stroke patients' EEG: A pilot study. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2020, 8839491 (2020).
  24. Lv, T. T., et al. Using RNA-Seq to explore the repair mechanism of the three methods and three-acupoint technique on DRGs in sciatic nerve injured rats. Pain research & Management. 2020, 7531409 (2020).
  25. Niu, F., et al. Spinal tuina improves cognitive impairment in cerebral palsy rats through inhibiting pyroptosis induced by NLRP3 and Caspase-1. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2021, 1028909 (2021).
  26. Na, Z., et al. The combination of electroacupuncture and massage therapy alleviates myofibroblast transdifferentiation and extracellular matrix production in blunt trauma-induced skeletal muscle fibrosis. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2021, 5543468 (2021).

Tags

Tuinaterapi Frossen skulder Rottemodell Protokoll Tradisjonell kinesisk medisin Tuinabehandling Oral behandling Glenohumeralt bevegelsesområde histologiske funn kapselstruktur
Tuina i en frossen skulderrottemodell: En effektiv og reproduserbar protokoll
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Qiao, Y., Yang, Y., Wang, J., Li,More

Qiao, Y., Yang, Y., Wang, J., Li, M., Zheng, L., Li, H., Zhang, S. Tuina in a Frozen Shoulder Rat Model: An Efficient and Reproducible Protocol. J. Vis. Exp. (197), e65440, doi:10.3791/65440 (2023).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter