Summary
Denne protokol skitserer trinnene til justering af in vivo optisk kohærenstomografi i synligt lys (vis-OCTF) billeder med ex vivo konfokale billeder af samme musenethinde med det formål at verificere den observerede retinale ganglioncelleaxonbundtmorfologi i in vivo-billederne.
Abstract
I de senere år er in vivo retinal billeddannelse, som giver ikke-invasiv, realtid og langsgående information om biologiske systemer og processer, i stigende grad blevet anvendt til at opnå en objektiv vurdering af neurale skader i øjensygdomme. Ex vivo konfokal billeddannelse af den samme nethinden er ofte nødvendig for at validere in vivo fund, især i dyreforsøg. I denne undersøgelse demonstrerede vi en metode til at justere et ex vivo konfokal billede af musens nethinde med dets in vivo-billeder . En ny klinisk klar billeddannelsesteknologi kaldet synligt lys optisk kohærenstomografi fibergrafi (vis-OCTF) blev anvendt til at erhverve in vivo-billeder af musens nethinden. Vi udførte derefter den konfokale billeddannelse af den samme nethinde som "guldstandarden" for at validere in vivo vis-OCTF-billederne. Denne undersøgelse muliggør ikke kun yderligere undersøgelse af de molekylære og cellulære mekanismer, men etablerer også et fundament for en følsom og objektiv evaluering af neurale skader in vivo.
Introduction
Retinale ganglionceller (RGC'er) spiller en kritisk rolle i visuel informationsbehandling, modtager synaptiske input gennem deres dendritiske træer i det indre plexiformlag (IPL) og transmitterer informationen via deres axoner i retinale nervefiberlag (RNFL) til hjernen 1,2,3,4. Ved syge tilstande som glaukom kan tidlig RGC-degeneration resultere i subtile ændringer i RNFL, ganglioncellelaget (GCL), IPL og synsnerven hos både patienter og gnavermodeller 5,6,7,8,9. Tidlig påvisning af disse morfologiske ændringer i RGC'er er derfor afgørende for rettidig indgriben for at forhindre RGC og synstab.
Vi har for nylig udviklet en ny klinisk klar billeddannelsesteknologi kaldet synligt lys optisk kohærenstomografi (vis-OCT) for at tilfredsstille behovet for in vivo-overvågning af RGC-skader. Vis-OCT forbedrede den aksiale opløsning og nåede 1,3 μm i nethinden10,11, hvilket muliggør visualisering af individuelle RGC-axonbundter i RNFL. Derefter blev vis-OCT-fibergrafi (vis-OCTF) etableret for at spore og kvantificere RGC-skader på enkeltaxonbundtniveau hos mus11,12,13. Imidlertid er ex vivo konfokal billeddannelse af den samme nethinden som guldstandarden ofte nødvendig for at validere in vivo-resultaterne. Derfor vil denne undersøgelse demonstrere, hvordan man tilpasser in vivo-billeder erhvervet af vis-OCTF med ex vivo-konfokale billeder af den samme musenethinde. Protokollen har til formål at validere in vivo-resultaterne ved ex vivo konfokal billeddannelse og etablere et grundlag for at undersøge de molekylære og cellulære ændringer, der ligger til grund for RGC-skader under syge tilstande.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyreforsøg blev godkendt af Institutional Animal Care and Use Committee ved University of Virginia og i overensstemmelse med retningslinjen om brug af dyr fra National Institute of Health (NIH). Se materialefortegnelsen for detaljer vedrørende alle materialer, reagenser og instrumenter, der anvendes i denne protokol.
1. In vivo i forhold til OLT-billeddannelse
- Forholdet mellem de oversøiske lande og territorier (OLT)
- Tag billeder af musenes øjne ved hjælp af et lille dyr i forhold til OCT-systemet, der bruger en superkontinuumlyskilde, som leverer synlig lysbelysning mellem 480 nm og 650 nm. Sørg for, at effektindslaget på hornhinden er 1 mW, og brug en A-linjehastighed på 25 kHz og en integrationstid på 39,3 μs pr. A-linje.
- Sørg for, at spektrometerets spektrale detektionsområde er mellem 508 nm og 613 nm, hvilket giver en aksial opløsning på 1,3 μm i nethinden. Den samlede billedvolumen er ca. 700 μm (x) x 700 μm (y) x 1.500 μm (z). Den laterale opløsning er mellem 4,5 μm i midten af synsfeltet og 8,7 μm ved 350 μm fra centrum11,13.
- Musbedøvelse
- Bedøv mus med C57BL/6 baggrund og enten køn med en intraperitoneal injektion af ketamin (114 mg/kg) og xylazin (17 mg/kg) cocktail og udvid deres pupiller ved hjælp af 1% tropicamid dråber. Bekræft tilstrækkelig bedøvelse ved tab af pedalrefleks efter en fast tåklemme.
- Under billeddannelse skal du holde musen varm ved hjælp af en infrarød varmelampe. Efter hver billedoptagelse skal du anvende kunstige tårer for at forhindre hornhindedehydrering.
- Placering af musen til billeddannelse
- Placer den bedøvede mus på dyreholderen og hold musen på plads ved hjælp af to velcrobånd.
BEMÆRK: Dyreholderen tillader bevægelse i tre dimensioner (lodret justering, fin vandret justering samt justering af tonehøjde og krøje) for at placere laseren i musens øje.
- Placer den bedøvede mus på dyreholderen og hold musen på plads ved hjælp af to velcrobånd.
- Justering af billedparametre
- Tænd computeren, og åbn den refererede software, som automatisk tænder laseren.
- Juster dyreholderen, indtil laseren er stabil og centreret i musens øje. Visualiser den bageste del af øjet gennem en En Face-forhåndsvisning i softwaregrænsefladen, synsfeltet (FOV) for den overfladiske vaskulære plexus og en B-scanning, tværsnittet af nethinden i FOV.
- Få en vis-OCT-diskenhed ved at klikke på knappen Hent på softwaregrænsefladen efter at have udført mindre justeringer af det optiske fokus, som består af 512 A-linjer/B-scanning og 512 B-scanninger/volumen.
BEMÆRK: Denne proces tager ~ 10.5 s. Billedoptagelse styres af en indbygget kvalitetsindeksestimator (QI) for at sikre, at billeder under en forudbestemt tærskel (QI < 45) ikke medtages.- For hver mus erhverves fire vis-OCT-volumener fra det samme øje. Juster synsnervehovedet (ONH) i hvert af de fire hjørner i synsfeltet for at dække forskellige områder af nethinden.
BEMÆRK: En sådan placering minimerer retinal krumning, hvilket maksimerer RNFL-reflektionsevnen i hele FOV. Det tager ~ 1 min at flytte øjet mellem hver erhvervelse (figur 1A, B).
- For hver mus erhverves fire vis-OCT-volumener fra det samme øje. Juster synsnervehovedet (ONH) i hvert af de fire hjørner i synsfeltet for at dække forskellige områder af nethinden.
- Analyse i forhold til OLTF
BEMÆRK: MATLAB bruges til at udføre billedanalyse.- For at generere vis-OCT-fibergrammer fra vis-OCT-volumenet skal du bruge en intensitetsbaseret tærskelmetode (MATLAB-kodelinje 808) til at detektere overfladen af nethinden.
BEMÆRK: Disse linjer bruger imadjust-funktionen til at justere intensitetsværdierne for bscan. Argumentet [0,0087 0,08], der overføres til imjustering , angiver det intensitetsområde, der skal knyttes til outputbilledets fulde dynamiske område. - Beskær RNFL ved at vælge den første ~ 16 μm i dybden. Se Matlab-kodelinje 782.
BEMÆRK: Den typiske in vivo RNFL-tykkelse i en voksen vildtype C57BL/6-mus er ~14 μm og kan variere mellem forskellige segmenteringsmetoder13. - Skift stierne til RAW-filen (linje 9), Filer til genopbygning (linje 11) og filnavnet (linje 15), klik på Kør, og vent på, at OCT-billedet analyseres af MATLAB-koden. Beregn middelintensitetsprojektionen langs den aksiale (z) retning (MATLAB-kodelinjer 905-908) for at generere fibergrambilledet sammensat af RGC-axonbundter og omgivende vaskulatur. Montage de fire billeder efter fibergrambehandling for hver FOV ved at justere blodkarrene med en grafisk editor efter eget valg, der dækker ~ 1,2 x 1,2 mm i alt. RAW-filerne gemmes normalt i mappen: Halo Data, under datoen for OCT-billeddannelse (f.eks. 0606 Opticent).
BEMÆRK: MATLAB-koderne er tilgængelige i supplerende fil 1.
- For at generere vis-OCT-fibergrammer fra vis-OCT-volumenet skal du bruge en intensitetsbaseret tærskelmetode (MATLAB-kodelinje 808) til at detektere overfladen af nethinden.
2. Ex vivo konfokal billeddannelse
- Mus eutanasi
- Efter at have indhentet vis-OCT-data, aflives musene med en blanding af pentobarbitalnatrium (390 mg/ml) og phenytoinnatrium (50 mg/ml). Phenytoinnatrium fungerer ved at forstærke virkningerne af pentobarbitalnatrium, som er blevet anvendt i vid udstrækning i gnaverdødshjælp14,15. Til hver mus anvendes 0,2 ml/20 g af den fortyndede blanding (156 mg/ml) og perfuseres med 20 ml fosfatbufret saltvand (PBS) og derefter 20 ml 4 % paraformaldehyd (PFA) i PBS16,17.
- Øjendissektion og orientering
- Enucleate øjnene og mærke på den tidsmæssige side for at indikere orienteringen.
- Efter forsigtig fjernelse af det forreste kammer, øjenlinsen, glaslegemet, og fastgør øjenkopperne i PFA i 30 min.
- Vask øjenkopperne med PBS i 30 min, og udskift PBS-opløsningen 3x under vasken. Vask derefter med 0,5% Triton X-100 i PBS (pH 7,5) i 30 min.
- Inkuber øjenkopperne i blokerende buffer (5% æselserum med 2,5% bovin serumalbumin og 0,5% Triton X-100 i Tris-bufret saltvand [pH 7,5]) i 2 timer ved stuetemperatur.
- Immunfarvning
BEMÆRK: Øjenkopperne er nu klar til at blive farvet med de primære antistoffer fra museanti-Tuj1 til påvisning af RGC-axonbundter og rotteanti-ICAM-2 til påvisning af blodkar.- Inkuber øjenkopperne natten over med de primære antistoffer, museanti-Tuj1 (1:200 i blokerende buffer) og rotte-anti-ICAM-2 (1:500 i blokerende buffer), ved 4 °C.
- Vask øjenkopperne 3-5x i 1 time hver gang med en fosfatbufret saltopløsning indeholdende 0,5% Triton X-100 (PBST) for at minimere baggrunden og fjerne eventuelle ubundne antistoffer.
- Efter vask inkuberes øjenkopperne natten over med de sekundære antistoffer, æselanti-mus immunglobulin G konjugeret med Alexa Fluor 488-farvestof (grøn fluorescens) og æselantirotte IgG konjugeret med Alexa Fluor 594-farvestof (rød fluorescens), alle fortyndet 1:1000 i blokerende buffer ved 4 °C.
- Den følgende dag vaskes øjenkopperne 3-5x i 1 time hver med PBST for at minimere baggrunden og fjerne ubundet antistof.
- Overfør øjenkopperne til en petriskål med PBS før den flade montering.
- Fladmonteret nethinden
- Efter immunfarvningsprocessen isoleres nethinden fra øjenkopperne under mikroskopet.
- Skær nethinderne i fire blade og fladmonter dem med RGC-laget opad. Efterlad mærket på den tidsmæssige side, der er fastgjort til nethinden for at angive orientering.
- Dæksel nethinderne med monteringsmedium13,18. Forsegl diasene med neglelak13,18,19.
- Konfokal billeddannelse
BEMÆRK: Billedbehandlingen af konfokale billeder blev udført ved hjælp af ZEN Microscopy Software.- Tænd for det konfokale mikroskop, og find området af interesse ved hjælp af mikroskopets okular under lokaliseringstilstand.
- Under anskaffelsestilstand skal du konfigurere felter til at dække hele nethinden og z-stack-udsnittene for at dække alle lag af information. Afbild mindst 25 felter på tværs af hele nethinden for at dække den samlede volumen på 5,99 mm (x) x 5,88 mm (y) x 30 μm (z) ved en pixelstørrelse på 1,24 μm/pixel.
- Projicer Z-stack-skiverne for at skabe todimensionelle konfokalmikroskopibilleder (figur 1C,D)11,13,19,20,21.
3. Justering af in vivo- og ex vivo-billeder
- Efter behandling af fibergrammet skal du oprette et sammensat billede, der indeholder de fire billeder, der er erhvervet fra hver mus ved at justere alle blodkarrene med en grafisk editor efter eget valg.
BEMÆRK: I gennemsnit er det endelige sammensatte billede ca. 1,2 mm (x) x 1,2 mm (y), som vist i figur 1B. - Brug synsnervehovedet (ONH) og mønsteret af blodkar som landemærker til at justere det sammensatte fibergram. Få in vivo- og ex vivo-justeringen ved at overlappe blodkarmønsteret for de sammensatte OCT-billeder med de konfokale billeder af den samme nethinden farvet med ICAM-2.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Det sammensatte vis-OCT-fibergram sammenlignes med det tilsvarende konfokale billede af fladmonteret nethindeimmunfarvet med Tuj-1 for RGC-axoner (figur 1D, toppanel). Axonbundter afbildet af vis-OCTF kan matches med de Tu-j1-mærkede axonbundter på det konfokale billede. Blodkar udviser normalt skelnelige forgreningsstrukturer sammenlignet med omgivende axonbundter i fibergrambilleder, som kan matches med ICAM-2-mærkede blodkar på det konfokale billede (figur 1D, bundpanel).
Side-by-side sammenligning mellem ex vivo konfokal mikroskopi og in vivo vis-OCT afslørede identiske RGC axon bundle netværk og omgivende retinal vaskulatur. Bemærk, at det konfokale billede muligvis ikke passer perfekt til in vivo-billederne , især i det perifere område; Dette skyldes, at nethinden er blevet fladmonteret på diaset. Samlet set validerer disse resultater vis-OCT-fibergrafiens evne til at løse to tilstødende RGC-axonbundter med forskellige størrelser in vivo.
Figur 1: Skematisk illustration af in vivo-billedets justering med ex vivo-billedet af samme musenethinde. A) skematisk oversigt over små dyr i forhold til OLT-systemet billeddannelse af et museøje (B) Justering af de fire billeder, der er erhvervet fra det samme øje, med synsnervehovedet placeret i synsfeltets fire hjørner; (C) Skematisk repræsentation af retinadissektion (venstre), nethinden fladmonteret med sporet orientering (midten) og nethinden, der afbildes ved konfokal mikroskopi (højre); (D) Sammenligning af vis-OCT fibergrafi og konfokal mikroskopi RGC axon bundle billeder (øverste panel), og in vivo En-Face med ex vivo konfokal mikroskopi billede af immunfarvede til blodkar (nederste panel). De fire billeder er fra samme øje. Gule skalabjælker = 100 μm. Tal (1-11) i panel D repræsenterer hver blodkar. Forkortelser: ONH = optisk nervehoved; vis-OCTF = optisk kohærenstomografi i synligt lys fibergrafi; RGC = retinal ganglioncelle; S = overlegen; I = ringere; T = tidsmæssig; N = nasal. Klik her for at se en større version af denne figur.
Supplerende fil 1: MATLAB-koder til billedanalyse. Klik her for at downloade denne fil.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Der er to trin i denne protokol, der kræver opmærksomhed. For det første er det nødvendigt at sikre, at dyret er under dyb anæstesi, og at deres øjne er fuldt udvidede inden vis-OCT-billeddannelse. Hvis musene ikke bedøves tilstrækkeligt, kan deres hurtige vejrtrækning føre til ustabile bevægelser af ansigtsbillederne , hvilket kan påvirke fibergrammets kvalitet negativt. Desuden kan utilstrækkelig udvidelse også have en negativ indvirkning på billedkvaliteten, da iris kan blokere lyset og forhindre det i at nå nethinden. For det andet er det vigtigt at markere venstre eller højre øje såvel som den tidsmæssige side af øjet efter perfusion, men før du fjerner øjeæblet fra musens øjenhule. Da den fladmonterede nethinden vender opad med RNFL på det overfladiske lag, vil markering af den tidsmæssige side muliggøre korrekt orientering af den fladmonterede nethinde.
En af fordelene er, at protokollen kan anvendes på forskellige musemodeller af øjensygdomme, såsom retinal iskæmi og diabetisk retinopati, så længe de forreste øjne er klare til optisk billeddannelse. En begrænsning af denne metode er imidlertid, at selvom nethinden er korrekt fastgjort til immunfarvning og konfokal billeddannelse, kan axonbundtmorfologien ændre sig. Dette sker på grund af fejloperationer under retina dissektion, hvilket kan forårsage brud i axonbundterne. Derudover, mens nethinden er buede skålformede strukturer, når de er afbildet in vivo, er de fladt på dias til konfokal billeddannelse. Som følge heraf kan der være ufuldstændig overlapning mellem in vivo vis-OLT-billeder og ex vivo-konfokale billeder af den perifere nethinde.
Til fejlfinding: Denne teknik indeholder hovedsageligt to dele. For det første kan kvaliteten af museøjet for vis-OLT-delen i høj grad påvirke succesen med at erhverve klare fibergrammer. Derfor blev kunstige tårer konstant påført musens øje for at holde det fugtigt og lyst. Musens kropsposition blev også finjusteret for at få laseren til at skinne så vinkelret på nethinden som muligt. Disse foranstaltninger sikrede tilsammen billedkvaliteten. For det andet fandt vi for retina-dissektionsdelen, at afskæring af scleraen, der omgiver nethinden, snarere end at rive den af, var afgørende for at opretholde integriteten af ONH-strukturen. Når sclera blev flået af med tang, fremstod ONH som et mørkt hul i rimelig størrelse under konfokal mikroskopi, hvor nethindevævet manglede fra midten. Opretholdelse af en komplet ONH-struktur er afgørende for in vivo- og ex vivo-justeringer .
Sammenfattende har vi etableret vis-OCTF for direkte at kvantificere og spore ændringer på enkeltaxonbundtniveauet in vivo11,12,13. Denne protokol indeholder instruktioner til justering af in vivo vis-OCTF og ex vivo konfokal billeddannelse af de samme nethinder. Disse undersøgelser danner grundlag for at etablere en objektiv evaluering af neurale skader hos mennesker, hvilket kan forbedre glaukom diagnose og behandling betydeligt i fremtiden.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Chang, S., Ingen; Xu, W., Ingen; Fan, W., Ingen; McDaniel, J.A., Ingen; D.A. Miller, Ingen; M. Grannonico, Ingen; M. Liu, Ingen; X. Liu, Ingen; H.F. Zhang har økonomiske interesser i Opticent Health, som ikke støttede dette arbejde.
Acknowledgments
Denne undersøgelse er støttet af Glaucoma Research Foundation Shaffer Grant, 4-CA Cavalier Collaborative Award, R01EY029121, R01EY035088 og Knights Templar Eye Foundation.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Equipment | |||
| Halo 100 | Opticent Health, Evanston, IL | ||
| Zeiss LSM800 microscope | Carl Zeiss | ||
| Drugs and antibodies | |||
| 4% paraformaldehyde (PFA) | Santz Cruz Biotechnology, SC-281692 | 1-2 drops | |
| Bovine serum albumin powder | Fisher Scientific, BP9706-100 | 1:10 | |
| Donkey anti Mouse Alexa Fluor 488 dye | Thermo Fisher Scientific, Cat# A-21202 | 1:1,000 | |
| Donkey anti rat Alexa Fluor 594 dye | Thermo Fisher Scientific, Cat# A-21209 | 1:1,000 | |
| Euthasol (a mixture of pentobarbital sodium (390 mg/mL) and phenytoin sodium (50 mg/mL)) | Covetrus, NDC 11695-4860-1 | 15.6 mg/mL | |
| Ketamine | Covetrus, NADA043304 | 114 mg/kg | |
| Mouse anti-Tuj1 | A gift from Anthony J. Spano, University of Virginia | 1:200 | |
| Normal donkey serum(NDS) | Millipore Sigma, S30-100 mL | 1:100 | |
| Phosphate-buffered saline (PBS, 10x), pH 7.4 (Contains 1370 mM NaCl, 27 mM KCl, 80 mM Na2HPO4, and 20 mM KH2PO4) |
Thermo Fisher Scientific, Cat# J62036.K3 | 1:10 | |
| Rat anti-ICAM-2 | BD Pharmingen, Cat#553325 | 1:500 | |
| Tropicamide drops | Covetrus, NDC17478-102-12 | ||
| Triton X-100 (Reagent Grade) |
VWR, CAS: 9002-93-1 | 1:20 | |
| Vectashield mounting medium | Vector Laboratories Inc. H2000-10 | ||
| Xylazine | Covetrus, NDC59399-110-20 | 17 mg/kg |
References
- Sernagor, E., Eglen, S. J., Wong, R. O. Development of retinal ganglion cell structure and function. Progress in Retinal and Eye Research. 20 (2), 139-174 (2001).
- Sanes, J. R., Masland, R. H. The types of retinal ganglion cells: current status and implications for neuronal classification. Annual Review of Neuroscience. 38, 221-246 (2015).
- Seabrook, T. A., Burbridge, T. J., Crair, M. C., Huberman, A. D. Architecture, function, and assembly of the mouse visual system. Annual Review of Neuroscience. 40, 499-538 (2017).
- Cang, J., Savier, E., Barchini, J., Liu, X. Visual function, organization, and development of the mouse superior colliculus. Annual Review of Vision Science. 4, 239-262 (2018).
- Quigley, H. A. Understanding glaucomatous optic neuropathy: the synergy between clinical observation and investigation. Annual Review of Vision Science. 2, 235-254 (2016).
- Whitmore, A. V., Libby, R. T., John, S. W. Glaucoma: thinking in new ways-a role for autonomous axonal self-destruction and other compartmentalised processes. Progress in Retinal and Eye Research. 24 (6), 639-662 (2005).
- Syc-Mazurek, S. B., Libby, R. T. Axon injury signaling and compartmentalized injury response in glaucoma. Progress in Retinal and Eye Research. 73, 100769 (2019).
- Puyang, Z., Chen, H., Liu, X. Subtype-dependent morphological and functional degeneration of retinal ganglion cells in mouse models of experimental glaucoma. Journal of Nature and Science. 1 (5), (2015).
- Tatham, A. J., Medeiros, F. A. Detecting structural progression in glaucoma with optical coherence tomography. Ophthalmology. 124, S57-S65 (2017).
- Shu, X., Beckmann, L., Zhang, H. Visible-light optical coherence tomography: a review. Journal of Biomedical Optics. 22 (12), 1-14 (2017).
- Miller, D. A., et al. Visible-light optical coherence tomography fibergraphy for quantitative imaging of retinal ganglion cell axon bundles. Translational Vision Science and Technology. 9 (11), (2020).
- Beckmann, L., et al. In vivo imaging of the inner retinal layer structure in mice after eye-opening using visible-light optical coherence tomography. Experimental Eye Research. 211, 108756 (2021).
- Grannonico, M., et al. Global and regional damages in retinal ganglion cell axon bundles monitored non-invasively by visible-light optical coherence tomography fibergraphy. Journal of Neuroscience. 41 (49), 10179-10193 (2021).
- Allen-Worthington, K. H., Brice, A. K., Marx, J. O., Hankenson, F. C. Intraperitoneal Injection of Ethanol for the Euthanasia of Laboratory Mice (Mus musculus) and Rats (Rattus norvegicus). J Am Assoc Lab Anim Sci. 54 (6), 769-778 (2015).
- Boivin, G. P., Bottomley, M. A., Schiml, P. A., Goss, L., Grobe, N. Physiologic, Behavioral, and Histologic Responses to Various Euthanasia Methods in C57BL/6NTac Male Mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 56 (1), 69-78 (2017).
- Chen, H., et al. Progressive degeneration of retinal and superior collicular functions in mice with sustained ocular hypertension. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (3), 1971-1984 (2015).
- Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. A laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension to characterize visual defects. Journal of Visualized Experiments: JoVE. 78 (78), (2013).
- Gao, J., et al. Differential effects of experimental glaucoma on intrinsically photosensitive retinal ganglion cells in mice. Journal of Comparative Neurology. 530 (9), 1494-1506 (2022).
- Thomson, B. R., et al. Angiopoietin-1 knockout mice as a genetic model of open-angle glaucoma. Translational Vision Science and Technology. 9 (4), (2020).
- Feng, L., et al. Sustained ocular hypertension induces dendritic degeneration of mouse retinal ganglion cells that depends on cell type and location. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 54 (2), 1106-1117 (2013).
- Grannonico, M., et al. Longitudinal analysis of retinal ganglion cell damage at individual axon bundle level in mice using visible-light optical coherence tomography fibergraphy. Translational Vision Science and Technology. 12 (5), (2023).
