Zebrafish Brain Disissection: Een techniek van vis neurobiologie

Abstract

Bron: Lopez-Ramirez M. A. et. al., Isolation and Culture of Adult Zebrafish Brain-rived Neurospheres. J.Vis. Exp. (2016).

Deze video beschrijft de techniek van microdissection van de hersenen van een volwassen zebravis. Deze methode helpt bij het verkrijgen van hele hersenen afgeleide neuorospheres die verder kunnen worden bestudeerd.

Protocol

1. Dissectie van het volwassen zebravisbrein

1. Bereid een dissectiebed voor door een petrischaal van 100 mm x 15 mm te vullen met gelijsverpakkingen. Plaats vervolgens het deksel op de petrischaal en incubeer bij -20 °C totdat de gel bevriest. Plaats bovenop het deksel een vierkant schoon filterpapier en wikkel zowel het filterpapier als de petrischaal in plastic folie.
2. Reinig en steriliseer alle microdissectie-instrumenten met 70% ethanol of warmte voor elk gebruik. Plaats alle gesteriliseerde dissectie-instrumenten in de buurt van de ontledingsmicroscoop en plaats vlak voor euthanasie het dissectiebed onder de microscoop met optische vezelverlichti....

Results

Figuur 1: Differentiatie van zebravissen hersenen-afgeleide neurosferen. (A-C, E) Fasecontrastbeelden van hele hersen-afgeleide neurosferen gekweekt in het Z-differentiatiemedium gedurende 1 (A, DiVd1), 3 (B, DiVd3) en 4 (C en D, DiVd4) dagen. (E) Dorsale weergave van het hele brein van e.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
DMEM/F12 1x 	Life Technologies	 11330-032
Penicillin-streptomycin  	Life Technologies	15140-122
Tricaine MS-222   	Sigma	A5040	stock solution of 4 mg/ml