Targeting di strutture cerebrali profonde con microiniezioni di consegna dei farmaci, vettori virali, o trapianti di cellule
Summary
In questo articolo, mostriamo un metodo per fare gli aghi capillare di vetro con un 50-micron lumen. Questa tecnica riduce in modo significativo il danno al cervello, riduce al minimo la diffusione passiva di farmaci e permette una mira precisa nel cervello dei roditori.
Abstract
Microiniezioni nel parenchima cerebrale sono importanti procedure per la fornitura di farmaci, vettori virali o trapianti di cellule. La lesione del cervello che produce l'iniezione di un ago durante la sua traiettoria è una delle principali preoccupazioni soprattutto nel cervello di topo non solo per il cervello è piccolo, ma a volte anche iniezioni multiple sono necessari. Mostriamo qui un metodo per produrre aghi capillare di vetro con un 50-micron lume che riduce significativamente i danni cerebrali e permette una mira precisa nel cervello dei roditori. Questo metodo permette una consegna di piccoli volumi (da 20 a 100 Nl), riduce i rischi di sanguinamento, e riduce al minimo la diffusione passiva dei farmaci nel parenchima cerebrale. Usando diverse dimensioni di tubi di vetro capillari, o cambiando il lume ago, diversi tipi di sostanze e cellule possono essere iniettato. Microiniezioni con un tubo capillare di vetro rappresentano un significativo miglioramento nelle tecniche di iniezione e cerebrale profonda targeting con danni collaterali minimi in piccoli roditori.
Protocol
Discussion
Il metodo mostrato in questo video è molto utile per fornire la maggior parte dei farmaci o vettori virali in luoghi molto preciso nel cervello. Alcuni dei principali vantaggi di questa tecnica sono l'affidabilità del punto di misura, l'accuratezza delle iniezioni e le piccole dimensioni della lesione cerebrale e danni tratto 1, 2, 5, 6. Una volta che la tecnica è standardizzata la gamma di mistargeting deve 50 micron o meno 1, 2. Trapianti di cellule può essere effettuata anche utilizz…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
OG-P è stato sostenuto da CONACyT s borsa (CB-2008-101476) e FRABA (686/10). AQ-H supportati dal National Institute of Health, l'Howard Hughes Medical Institute, la Robert Wood Johnson Foundation e della Fondazione cellule staminali Maryland.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Capillary glass tube | Wiretrol I | 5-000-1001 | ||
| Micropipette puller | Kopf | Model 730 | ||
| Microforge | World Precision Instruments | Model 48000 | ||
| Mineral oil | MSDS | M7700 | ||
| High-vacuum grease | Dow Corning | 05054-AB | ||
| Anesthesia: 2.5% Avertin | 2,2,2-tribromoethanol + tert-amyl alcohol, 1:1 w/v | |||
| Heater pad | Mastex | Model 900 | ||
| Stereotactic device | Kopf | Model Kopf-900 | ||
| Surgical scalpel blade # 15 | Medi-Cut | |||
| Micro driller | Ideal Micro Drill | 67-1000 | ||
| Fine forceps | Fine Scientific Tools | |||
| 1-μL Micropipette | Rainin | |||
| Parafilm M. | ||||
| Surgical microscope | Zeiss | Vasiorkop with Contraves system | ||
| Microinjector | Narishige | Model MO-10 |
References
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