التأين electrospray الليزر التذرية (LAESI) هي مصدر الضغط الجوي ايون لقياس الطيف الكتلي. في وضع التصوير ، ومجسات ليزر تحت الحمراء في منتصف توزيع الجزيئات عبر الباب أو الأنسجة بيوفيلم ملف. هذا الأسلوب يقدم نهجا جديدا للدراسات bioanalytical المتنوعة التي تنفذ في ظل الظروف التجريبية الأصلية.
الطرق المحيطة التأين مطياف الكتلة في السماح تنفيذ التحقيقات التحليلية مباشرة على النسيج أو بيوفيلم تحت ظروف تشبه الأم التجريبية. التأين electrospray الليزر التذرية (LAESI) هو أحد هذه التنمية ، وخاصة مناسبة تماما للتحقيق في المياه المحتوية على العينات. LAESI تستخدم شعاع ليزر تحت الحمراء منتصف (2.94 ميكرون الطول الموجي) لإثارة جزيئات الماء من العينة. عندما يتم تجاوز عتبة فلوينس التذرية ، وطردت مادة العينة في شكل جسيمات وهذه المقذوفات السفر لعشرات ملليمتر فوق سطح العينة. في LAESI ، يتم اعتراضها من قبل هذه السحابة قطرات الاجتثاث مشحونة لالتقاط جزء من مادة العينة طرد وتحويل مكوناتها الكيميائية في المرحلة أيونات الغاز. يعمل مطياف الكتلة مجهزة واجهة الغلاف الجوي الأيوني مصدر ضغط على تحليل وتسجيل تكوين أيونات سراح القادمة من منطقة بحث (بكسل) من العينة. استجواب المنهجي على مجموعة من بكسل يفتح الطريق أمام التصوير الجزيئي في تحليل وضع مسبار مجهري. ومن الجوانب الفريدة للتصوير الطيفي الشامل LAESI هو التنميط عمق ذلك ، بالاشتراك مع التصوير الجانبي ، وتمكن ثلاثي الأبعاد (3D) التصوير الجزيئي. مع القرارات الحالية الوحشي وعمق ميكرومتر 100 ~ ~ 40 ميكرون و، على التوالي ، LAESI التصوير الطيفي الشامل يساعد على استكشاف التركيب الجزيئي للالأنسجة البيولوجية. هنا ، علينا إعادة النظر في العناصر الرئيسية للنظام LAESI وتوفير مبادئ توجيهية لإجراء تجربة ناجحة التصوير.
أنواع الأنسجة المختلفة المعرض متفاوتة المحتوى المائي وقوة الشد ، والتي ، بدورها ، يمكن أن تؤثر على الخصائص الاجتثاث من العينات. 9 وللتخفيف من هذه الآثار ، من المرغوب فيه أن يعاد النظر في فلوينس الليزر ، والتعامل مع العينة ، وتحليل بروتوكولات عند تغيير بين أنواع الأنسجة الرئيسية.
لخلية واحدة أو التحقيقات أعلى القرار ، يمكن أن يقترن ضوء الأشعة تحت الحمراء في منتصف الألياف البصرية بدلا من شحذ عدسة التركيز. 10 من خلال تحديد المواقع غيض من الألياف مقربة من الخلايا المحددة في الأنسجة ، يمكن إجراء تحليل على LAESI مستوى وحيدة الخلية.
كتسمية خالية من مصدر لايون المحيطة التأين مطياف الكتلة ، فقد أظهرت 11 LAESI امكانات كبيرة للتحقيق في العمليات الكيميائية الحيوية في الأنسجة. مع فوائد إضافية من التحليل المباشر ، والتصوير الأفقي و 3D ، LAESI أداة الناشئة عن التنميط bioanalytical فضلا عن تطبيقات التصوير.
The authors have nothing to disclose.
المؤلفون ممتنون للدعم المالي لهذا العمل من قبل مؤسسة العلوم الوطنية الأميركية تحت رقم 0719232 غرانت ، من قبل وزارة الطاقة الأميركية (DEFG02 – 01ER15129) ، والتي بروتي ، وشركة العلوم البيولوجية (مورغانتاون ، WV) فإن الكتاب بالشكر أيضا إلى جيسيكا ألف Stolee لمساعدتها خلال تصوير بالفيديو للبروتوكول.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Mass spectrometer | Waters Co. (Milford, MA) | Q-TOF Premier | ||
Mid-IR laser | Opotek Inc. (Carlsbad, CA) | Vibrant IR |