पुरानी relapsing के महंगाई भत्ते चूहों में प्रयोगात्मक autoimmune Encephalomyelitis: यह वीडियो एकाधिक काठिन्य के एक पशु मॉडल की प्रेरण और नैदानिक स्कोरिंग को दर्शाता है. रोग, एक पूरे चूहे रीढ़ की हड्डी और पूरा है Freund सहायक युक्त पायसन के साथ immunizing चूहों द्वारा प्रेरित, नैदानिक लक्षण मानव रोग जैसी प्रस्तुत करता है.
Abstract
एकाधिक काठिन्य (एमएस) केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (CNS) प्रणाली है कि आमतौर पर युवा वयस्कों को प्रभावित करता है एक जीर्ण सूजन की बीमारी है. यह demyelination और मस्तिष्क और रीढ़ की हड्डी में फैलाया क्षेत्रों में glial डरा द्वारा विशेषता है. इन घावों तंत्रिका प्रवाहकत्त्व बदलने और अक्षम न्यूरोलॉजिकल घाटा है कि CNS (जैसे paraparesis, पक्षाघात, असंयम अंधापन,) में demyelinated सजीले टुकड़े के स्थान के साथ बदलती प्रेरित.
प्रायोगिक autoimmune Encephalomyelitis (EAE) एमएस के लिए एक मॉडल है. EAE पहली बार मानव में रेबीज के खिलाफ टीकाकरण के दौरान गलती से, प्रेरित खरगोश स्पाइनल तार पर हो वायरस का उपयोग करते हुए. निष्क्रिय वायरस के साथ रीढ़ की हड्डी में इंजेक्शन के Residues सीएनएस रोग प्रेरित किया. इन टिप्पणियों के बाद, EAE पहला मॉडल की एक गैर मानव प्राइमेट नदियों द्वारा homogenate और 1935 में Schwenther सीएनएस के साथ प्रतिरक्षित में वर्णित किया गया था. EAE के बाद प्रजाति की एक किस्म में उत्पन्न किया गया और विभिन्न प्रजातियों / तनाव पर निर्भर करता है और प्रतिजन इस्तेमाल किया immunizing पाठ्यक्रम का पालन कर सकते हैं. उदाहरण के लिए, सहायक के साथ पायसन में माइलिन बुनियादी प्रोटीन के साथ लुईस चूहों immunizing EAE के एक तीव्र मॉडल लाती है, जबकि एक ही प्रतिजन गिनी सूअरों में एक पुरानी बीमारी लाती है.
EAE मॉडल यहाँ वर्णित डीए चूहे रीढ़ की हड्डी के खिलाफ पूरा है Freund सहायक में पायस में डीए चूहों immunizing से प्रेरित है. चूहे 7-14 के बाद टीकाकरण दिनों के भीतर एक आरोही झूलता हुआ पक्षाघात का विकास. नैदानिक लक्षण कई सप्ताह से अधिक relapsing-remitting के पाठ्यक्रम का पालन करें. पैथोलॉजी सीएनएस और demyelination सजीले टुकड़े में बड़े प्रतिरक्षा पैठ से पता चलता है. EAE के साथ जानवरों के लिए देखभाल करने के लिए विशेष कारणों से वीडियो के अंत में वर्णित हैं.
Protocol
प्रेरण और जीर्ण – relapsing EAE के निगरानी पायस पूरक पूरा Freund सहायक जोडी जलीय समाधान में प्रतिजन की एक 1:1 मिश्रण है. यह बहुत महत्वपूर्ण है और दूसरे दौर की तरह नहीं सहायक प्रतिजन जोड़ने! वहाँ कच…
Discussion
इस प्रोटोकॉल के लिए कुछ महत्वपूर्ण विचार कर रहे हैं.
डीए चूहों के जेनेटिक्स थोड़ा ब्रीडर जो वे से खरीदे जाते हैं पर निर्भर करता है अलग होगा. इन मतभेदों को बढ़ाने या चूहों की संवेदनशीलता के प्रेरण EAE कम हो सकती…
Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Induction and Clinical Scoring of Chronic-Relapsing Experimental Autoimmune Encephalomyelitis. J. Vis. Exp. (5), e224, doi:10.3791/224 (2007).