וידאו זה מדגים את הניקוד אינדוקציה קליני במודל חיה של טרשת נפוצה: כרוני, relapsing Encephalomyelitis אוטואימונית ניסיונית התובע חולדות. המחלה, הנגרמת על ידי חולדות מחסנת עם תחליב המכיל חוט השדרה שלם חולדה adjuvant פרוינד של שלמה, מציג סימנים קליניים דומים מחלות אנושיות.
Abstract
טרשת נפוצה (MS) היא מחלה דלקתית כרונית של מערכת העצבים המרכזית (CNS), כי בדרך כלל משפיע על אנשים צעירים. הוא מאופיין על ידי demyelination ו מפחיד גלייה באזורי המופץ במוח ובחוט השדרה. נגעים אלה לשנות הולכה עצבית ו להשרות את הגירעונות נוירולוגיות השבתת המשתנות בהתאם למיקום של הפלאק demyelinated את מערכת העצבים המרכזית (למשל, paraparesis שיתוק, עיוורון, אי שליטה).
Encephalomyelitis אוטואימונית ניסויית (EAE) הוא המודל של טרשת נפוצה. EAE הושרה first בטעות במהלך חיסון נגד מחלת הכלבת בבני אדם, באמצעות וירוסים גדל על מיתרי השדרה ארנב. שאריות של השדרה מוזרק עם נגיף מומת המושרה המחלה במערכת העצבים המרכזית. בעקבות תצפיות אלה, המודל הראשון של EAE תוארה פרימטים שאינם בני אדם שחוסנו עם CNS homogenate על ידי נהרות Schwenther בשנת 1935. EAE מאז שנוצר במגוון המינים יכולים לעקוב אחר קורסים שונים בהתאם המין / זן ו מחסנת אנטיגן בשימוש. לדוגמה, מחסנת חולדות לואיס עם חלבון המיאלין הבסיסי תחליב עם גורם משלים מודל חריפה של EAE, בעוד אנטיגן אותו גורם מחלה כרונית שרקנים.
המודל EAE המתואר כאן הוא המושרה על ידי מחסנת חולדות התובע כנגד חוט השדרה עכברוש התובע אמולסיה ב adjuvant פרוינד של שלמה. החולדות לפתח שיתוק רפה עולה תוך 7-14 ימים לאחר החיסון. סימנים קליניים בעקבות קורס בשלב ההתקפי במשך מספר שבועות. פתולוגיה מראה מחלחל החיסונית גדולים CNS ושלטים demyelination. שיקולים מיוחדים בטיפול בבעלי חיים עם EAE מתוארים בסוף הוידאו.
Protocol
אינדוקציה וניטור של EAE-כרונית ההתקפי התחליב הוא תערובת 01:01 של אנטיגן בתמיסה מימית להוסיף בתוספת adjuvant המלא של פרוינד. חשוב מאוד להוסיף את אנטיגן כדי adjuvant ולא להיפך! יש הרבה פסולת בעת ביצוע והזרק?…
Discussion
ישנם כמה שיקולים חשובים עבור פרוטוקול זה.
גנטיקה של חולדות התובע יהיה שונה מעט בהתאם מגדל הם קנו. הבדלים אלה עשויים להגדיל או להקטין את הרגישות של חולדות EAE אינדוקציה. אם חולדות שלך רגישים יותר EAE אתה רוצה לצמצם את כוחו של חיסון באמצעות אי – בתוספת adjuvant המ…
Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Induction and Clinical Scoring of Chronic-Relapsing Experimental Autoimmune Encephalomyelitis. J. Vis. Exp. (5), e224, doi:10.3791/224 (2007).