Este artigo descreve uma técnica de transplante de tecido que foi projetado para testar a sinalização e padronização das propriedades ectoderma de superfície cefálica durante o desenvolvimento craniofacial.
A acessibilidade dos embriões aviária ajudou embriologistas experimental entender o destino das células durante o desenvolvimento eo papel das interações tecido que regulam padronização e morfogênese de vertebrados (eg, 1, 2, 3, 4). Aqui, nós ilustrar um método que explora essa acessibilidade para testar a sinalização e as propriedades padrões dos tecidos durante o desenvolvimento ectodérmico facial. Nesses experimentos, nós criamos codornas-chick 5 ou 6 do mouse grão-de-quimeras transplantando o ectoderma cefálica que cobre a mandíbula superior de codorniz ou o mouse para qualquer região do mesmo ou uma região ectópica de embriões de galinha. O uso de codorna como tecido do doador para o transplante em pintos foi desenvolvido para tirar vantagem de um marcador nucleolar presente em codornas mas não células de bico, permitindo assim que os pesquisadores a distinguir host e tecidos de doadores 7. Da mesma forma, um elemento repetitivo está presente no genoma do rato e é expressa ubiquitously, que nos permite distinguir host e tecidos de doadores em grão-de-rato quimeras 8. O uso de ectoderma mouse como tecido do doador será extremamente estender nossa compreensão dessas interações tecido, porque isso irá permitir-nos testar as propriedades de sinalização do ectoderma derivado de vários embriões mutantes.
Usando este método de transplante nos permitiu determinar que o ectoderma contém informações de sinalização que regula a polaridade dorsoventral e extensão proximodistal do maxilar superior. A similaridade de resultados quando se utiliza codorniz ou ectoderma mouse, ea conservação dos sinais moleculares neste tecido entre muitas espécies 6,11 indica que este é um centro altamente conservada entre os vertebrados de sinalização. Além disso, outros pesquisadores usaram técnicas semelhantes para te…
The authors have nothing to disclose.
Este trabalho foi financiado pelo R01-R01-DE018234 e DE019638.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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1x PBS | TEK | TEKZR114 | ||
DMEM | UCSF | CCFDA003 | ||
BSA | SIGMA | A7906 | ||
Dispase | GIBCO | 17105-041 | ||
35×10 mm Petri dish | Falcon | 1008 | ||
No. 5 Dumont forceps | Fine Science Tools | 11252-20 | ||
Scissors | Fine Science Tools | 14058-11 | ||
Spring Scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
Needle holder | Fine Science Tools | 26016-12 | ||
Tungsten Needle | Fine Science Tools | 26000 | ||
Microcapillary tube | Drummond Scientific Company | 3-000-225-G | ||
Pasteur Pipets | Fisher | 13-678-6B | ||
Spring scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
Blade holder | Fine Science Tools | 10052-11 | ||
Razor blade | Fine Science Tools | 10050-00 |