Den här artikeln beskriver en teknik vävnadstransplantation som var utformat för att testa signalsystemet och egenskaper mönstring av ytor cefaliska ektoderm under kraniofaciala utveckling.
Tillgängligheten av aviär embryon har hjälpt experimentell embryologer förstå öden celler under utveckling och roll vävnad interaktioner som reglerar mönstring och morfogenes av ryggradsdjur (t.ex. 1, 2, 3, 4). Här visar vi en metod som utnyttjar denna tillgänglighet för att testa signalering och egenskaper mönstring av ektodermal vävnader vid ansikts utveckling. I dessa försök skapar vi vaktel-chick 5 eller mus-chick 6 chimärer genom att transplantera ytan cefaliska ektoderm som täcker den övre käken från vaktel eller musen på antingen samma region eller en ektopisk region kycklingembryon. Användningen av vaktlar som givare vävnad för transplantation till kycklingar har utvecklats för att dra fördel av en nucleolar markör som finns i vaktlar men inte kycklingembryoceller, vilket gör utredare att skilja värd och vävnader donator 7. Likaså är ett återkommande inslag som finns i musens arvsmassa och uttrycks ubiquitously, som tillåter oss att skilja värd och vävnader givare mus-chick chimärer 8. Att använda musen ektoderm som givare vävnad kommer kraftigt att utöka vår förståelse för dessa vävnad interaktioner, eftersom detta ger oss möjlighet att testa signalering egenskaper ektoderm härleds från olika mutant embryon.
Med denna transplantation metoden har vi kunnat fastställa att ektoderm innehåller signalering information som reglerar dorsoventral polaritet och proximodistal förlängning av överkäken. Likheten mellan resultat vid användning av vaktel eller musen ektoderm, och bevarandet av molekylära signaler i denna vävnad bland många arter 6,11 indikerar att detta är ett starkt konservativa signalering centrum bland ryggradsdjuren. Dessutom har andra forskare använt liknande tekniker för att testa signalerin…
The authors have nothing to disclose.
Detta arbete har finansierats av R01-DE018234 och R01-DE019638.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
1x PBS | TEK | TEKZR114 | ||
DMEM | UCSF | CCFDA003 | ||
BSA | SIGMA | A7906 | ||
Dispase | GIBCO | 17105-041 | ||
35×10 mm Petri dish | Falcon | 1008 | ||
No. 5 Dumont forceps | Fine Science Tools | 11252-20 | ||
Scissors | Fine Science Tools | 14058-11 | ||
Spring Scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
Needle holder | Fine Science Tools | 26016-12 | ||
Tungsten Needle | Fine Science Tools | 26000 | ||
Microcapillary tube | Drummond Scientific Company | 3-000-225-G | ||
Pasteur Pipets | Fisher | 13-678-6B | ||
Spring scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
Blade holder | Fine Science Tools | 10052-11 | ||
Razor blade | Fine Science Tools | 10050-00 |