Évaluation des propriétés de signalisation ectodermique épithéliums au cours du développement cranio-facial
Summary
Cet article décrit une technique de transplantation de tissus qui a été conçu pour tester les propriétés de signalisation et de structuration de la surface ectoderme céphalique au cours du développement cranio-facial.
Abstract
L'accessibilité des embryons aviaires a aidé à comprendre les embryologistes expérimentale du sort des cellules pendant le développement et le rôle des interactions tissus qui régulent la structuration et la morphogenèse des vertébrés (par exemple, 1, 2, 3, 4). Ici, nous illustrons une méthode qui exploite cette accessibilité pour tester les propriétés de signalisation et de structuration des tissus ectodermiques lors de l'élaboration du visage. Dans ces expériences, nous créons de caille-chiches 5 ou 6 souris chimères chiches en transplantant l'ectoderme de surface céphalique qui recouvre la mâchoire supérieure de caille ou de la souris sur soit la même région ou d'une région extra-utérine d'embryons de poulet. L'utilisation de la caille en tissu du donneur pour une transplantation dans les poussins a été développé pour tirer parti d'un marqueur nucléolaire présente dans les cellules de caille, mais pas chiches, permettant ainsi aux enquêteurs d'hôte et de distinguer les tissus des donneurs 7. De même, un élément répétitif est présent dans le génome de la souris et est exprimée de façon ubiquitaire, ce qui nous permet de distinguer les tissus hôtes et les donateurs dans les souris chimères chiches 8. L'utilisation de la souris comme ectoderme tissu du donneur va augmenter considérablement notre compréhension de ces interactions tissulaires, parce que cela va nous permettre de tester les propriétés de signalisation des issues de différentes ectoderme embryons mutants.
Protocol
Discussion
En utilisant cette méthode de transplantation nous a permis de déterminer que l'ectoderme contient des informations de signalisation qui régule la polarité dorso-ventrale et l'extension proximodistal de la mâchoire supérieure. La similitude des résultats lors de l'utilisation de caille ou ectoderme de la souris, et la conservation des signaux moléculaires dans ce tissu parmi les nombreuses espèces 6,11 indique qu'il s'agit d'un centre de signalisation hautement conservée chez…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été financé par R01 et R01-DE018234-DE019638.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 1x PBS | TEK | TEKZR114 | ||
| DMEM | UCSF | CCFDA003 | ||
| BSA | SIGMA | A7906 | ||
| Dispase | GIBCO | 17105-041 | ||
| 35×10 mm Petri dish | Falcon | 1008 | ||
| No. 5 Dumont forceps | Fine Science Tools | 11252-20 | ||
| Scissors | Fine Science Tools | 14058-11 | ||
| Spring Scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
| Needle holder | Fine Science Tools | 26016-12 | ||
| Tungsten Needle | Fine Science Tools | 26000 | ||
| Microcapillary tube | Drummond Scientific Company | 3-000-225-G | ||
| Pasteur Pipets | Fisher | 13-678-6B | ||
| Spring scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
| Blade holder | Fine Science Tools | 10052-11 | ||
| Razor blade | Fine Science Tools | 10050-00 |
References
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