توضح هذه المقالة تقنية زرع الانسجة التي تم تصميمها لاختبار الإشارات وخصائص الزخرفة من الأديم الظاهر سطح الرأس أثناء تطوير القحفي.
Abstract
وقد ساعدت سهولة الحصول على أجنة الطيور علم الجنين التجريبي فهم مصائر الخلايا أثناء التطور ودور الأنسجة التي تنظم التفاعلات الزخرفة والتشكل من الفقاريات (على سبيل المثال ، 1 ، 2 ، 3 ، 4). هنا ، نحن لتوضيح أسلوب الذي يستغل هذا الوصول لاختبار الإشارات وخصائص الزخرفة الأدمة من أنسجة الوجه أثناء تطوير. في هذه التجارب ، فإننا نخلق السمان ، فرخ 5 أو الماوس الفرخ 6 من زرع الوهم في الأديم الظاهر السطحي الذي يغطي الرأس والفك العلوي من السمان أو الماوس على المنطقة إما نفسه أو في منطقة خارج الرحم لافراخ الدجاج. وقد تم تطوير استخدام السمان والأنسجة المانحة للزرع في الدجاج للاستفادة من علامة موجودة في نويي السمان ولكن الخلايا لا الفرخ ، وبالتالي السماح للمحققين تميز المضيفة والمانحة الأنسجة 7. وبالمثل ، وهو عنصر المتكررة موجودة في جينوم الفأر ، ويعبر بتواجد مطلق ، والذي يسمح لنا أن نميز بين المضيفة والمانحة في الأنسجة الفرخ الفأر الوهم 8. سيتم استخدام الماوس كما الأديم الظاهر تمديد الأنسجة المانحة إلى حد كبير فهمنا لهذه التفاعلات الأنسجة ، وذلك لأن هذا سوف يسمح لنا لاختبار خصائص الإشارات من الأديم الظاهر المستمدة من أجنة متحولة مختلفة.
Protocol
1. إعداد الأنسجة المانحة تعد وسائل الإعلام والثقافة ، وصقل الزجاج الدبابيس ، وشحذ الإبر التنغستن. جمع الجنين من قذيفة ، ويغسل في الجليد الباردة برنامج تلفزيوني. <ol class="lalpha" style=";text-align:right;direction…
Discussion
باستخدام هذا الأسلوب زرع سمح لنا لتحديد الأديم الظاهر أن يحتوي على معلومات يشير إلى أن ينظم قطبية ظهري بطني والإرشاد proximodistal من الفك العلوي. التشابه في النتائج عند استخدام الماوس السمان أو الأديم الظاهر ، والحفاظ على الاشارات الجزيئية في هذا النسيج من بين العديد من ا…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وقد تم تمويل هذا العمل من قبل DE018234 – R01 R01 وDE019638.
Hu, D., Marcucio, R. S. Assessing Signaling Properties of Ectodermal Epithelia During Craniofacial Development. J. Vis. Exp. (49), e2557, doi:10.3791/2557 (2011).