यह लेख एक ऊतक प्रत्यारोपण तकनीक है कि संकेतन और craniofacial विकास के दौरान सतह मस्तक का बाह्य त्वक स्तर के patterning के गुण परीक्षण के लिए डिजाइन किया गया था का वर्णन करता है.
Abstract
एवियन भ्रूण की पहुंच में मदद मिली है प्रयोगात्मक embryologists विकास और ऊतक कि बातचीत patterning और रीढ़ की morphogenesis (उदाहरण के लिए, 1, 2, 3, 4) को विनियमित करने की भूमिका के दौरान कोशिकाओं के भाग्य को समझते हैं. यहाँ, हम एक तरीका है कि इस पहुंच का लाभ उठाते चेहरे विकास के दौरान संकेतन और बहिर्जनस्तरीय ऊतकों के patterning के गुणों का परीक्षण वर्णन. इन प्रयोगों में, हम सतह मस्तक का बाह्य त्वक स्तर है कि या तो एक ही क्षेत्र या लड़की भ्रूण की एक अस्थानिक क्षेत्र पर बटेर या माउस से ऊपरी जबड़े शामिल रोपाई से 5 बटेर – लड़की या माउस लड़की 6 chimeras बनाएँ. दाता ऊतक के रूप में बटेर की लड़कियों में प्रत्यारोपण के लिए उपयोग करने के लिए एक nucleolar बटेर में मौजूद कोशिकाओं लेकिन लड़की नहीं मार्कर का लाभ ले, इस प्रकार जांचकर्ताओं मेजबान और दाता ऊतकों 7 भेद करने के लिए अनुमति देता है विकसित किया गया था. इसी तरह, एक दोहराव तत्व माउस जीनोम में मौजूद है और सर्वत्र व्यक्त है, जो हमें लड़की माउस 8 chimeras में मेजबान और दाता के ऊतकों को भेद करने के लिए अनुमति देता है. दाता ऊतक के रूप में माउस बाह्य त्वक स्तर का उपयोग बहुत इन ऊतकों बातचीत की हमारी समझ का विस्तार होगा, क्योंकि यह हमें परीक्षण करने के लिए बाह्य त्वक स्तर के संकेत गुणों विभिन्न उत्परिवर्ती भ्रूण से निकाली गई की अनुमति देगा.
Protocol
1. दाता ऊतक की तैयारी संस्कृति मीडिया तैयार, कांच पिन पैनापन, टंगस्टन सुइयों पैनापन. खोल से भ्रूण ले लीजिए, बर्फ की ठंड पीबीएस में धो लो. 10 एमएल सिरिंज और एक 18 गेज सुई का प्रयोग अंडा खोल के अ?…
Discussion
इस प्रत्यारोपण पद्धति का उपयोग करके हमें निर्धारित करने के लिए कि बाह्य त्वक स्तर संकेत जानकारी है कि dorsoventral polarity और ऊपरी जबड़े के proximodistal विस्तार को नियंत्रित करने के लिए अनुमति दी गई है. जब बटेर या माउस बाह?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम R01-DE018234 और R01-DE019638 द्वारा वित्त पोषित किया गया था.
Hu, D., Marcucio, R. S. Assessing Signaling Properties of Ectodermal Epithelia During Craniofacial Development. J. Vis. Exp. (49), e2557, doi:10.3791/2557 (2011).