परमाणु शक्ति माइक्रोस्कोपी इमेजिंग के लिए बैक्टीरियल स्थिरीकरण
Summary
लाइव ग्राम नकारात्मक और ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया जिलेटिन लेपित अभ्रक पर immobilized जा सकता है और तरल में imaged परमाणु शक्ति माइक्रोस्कोपी (AFM) का उपयोग.
Abstract
AFM (एनएम पैमाने) इमेजिंग उपकरण है कि यंत्रवत् जांच एक सतह उच्च संकल्प है. यह छवि कोशिकाओं और biomolecules करने की क्षमता है, एक तरल वातावरण में रासायनिक नमूना इलाज की जरूरत के बिना. आदेश में इस लक्ष्य को पूरा करने के लिए, नमूना पर्याप्त बढ़ते सतह पालन स्कैनिंग AFM ब्रैकट टिप द्वारा exerted बलों द्वारा हटाने को रोकने के. कई उदाहरणों में, सफल इमेजिंग नमूना के बढ़ते सतह स्थिरीकरण पर निर्भर करता है. बेहतर, स्थिरीकरण न्यूनतम ऐसी है कि चयापचय प्रक्रियाओं और कार्यात्मक विशेषताओं समझौता नहीं कर रहे हैं नमूना के लिए आक्रामक होना चाहिए. कोटिंग हौसले cleaved सुअर जिलेटिन (सुअर) के साथ अभ्रक सतहों करके, नकारात्मक आरोप लगाया बैक्टीरिया की सतह पर immobilized किया जा सकता है और AFM द्वारा तरल में imaged. जिलेटिन लेपित अभ्रक पर बैक्टीरियल कोशिकाओं के स्थिरीकरण सबसे नकारात्मक आरोप लगाया बैक्टीरिया और सकारात्मक आरोप लगाया जिलेटिन के बीच electrostatic बातचीत के लिए कारण संभावना है. कई कारकों तरल जिसमें बैक्टीरिया निलंबित कर रहे हैं, जिलेटिन लेपित अभ्रक, बैक्टीरियल तनाव और माध्यम है जिसमें बैक्टीरिया imaged हैं की सतह विशेषताओं पर जीवाणुओं के ऊष्मायन समय के रासायनिक घटकों सहित बैक्टीरियल स्थिरीकरण, के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं. कुल मिलाकर, जिलेटिन – लेपित अभ्रक का उपयोग इमेजिंग माइक्रोबियल कोशिकाओं के लिए आम तौर पर लागू हो पाया है.
Protocol
Discussion
विभिन्न कारकों माइक्रोबियल बढ़ते AFM और सेल इमेजिंग को प्रभावित कर सकते हैं. जिलेटिन है कि कोटिंग के लिए प्रयोग किया जाता है अभ्रक महत्वपूर्ण है. वाणिज्यिक जिलेटिन मछली, गाय और सूअर सहित रीढ़ की संख्या स…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस शोध जैविक और पर्यावरण अनुसंधान, अमेरिका के ऊर्जा विभाग के कार्यालय द्वारा और वर्जीनिया कॉमनवेल्थ स्वास्थ्य अनुसंधान बोर्ड से अनुदान धन द्वारा प्रायोजित है. ओक रिज नेशनल लेबोरेटरी अमेरिकी ऊर्जा विभाग के लिए अनुबंध सं. डे – AC05 – 00OR22725 के तहत केन्द्र शासित प्रदेशों-Battelle, LLC द्वारा प्रबंधित किया जाता है.
Materials
| Name | Company | Catalogue number |
| Gelatin | Sigma, St. Louis, MO | G6144, G2625 or G2500 |
| PicoPlus Atomic Force Microscope | Agilent Technologies, Tempe, AZ | |
| AFM cantilevers | Veeco, Santa Barbara, CA | MLCT-AUHW |
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