ब्रेन स्लाइस एक microfluidic नेटवर्क और मानक परफ्यूज़न चैंबर का प्रयोग उत्तेजना
Summary
हम एक सरल microfluidic युक्ति है कि मानक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी setups के साथ एकीकृत किया जा सकता है अलग न्यूरोट्रांसमीटर के लिए एक अच्छी तरह से नियंत्रित तरीके से एक मस्तिष्क टुकड़ा का microscale सतहों बेनकाब के निर्माण प्रदर्शित करता है.
Abstract
हम एक दो स्तर microfluidic डिवाइस है कि आसानी से मौजूदा इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी setups के साथ एकीकृत किया जा सकता के निर्माण दिखा दिया है. दो स्तर microfluidic डिवाइस एक दो कदम नकारात्मक विरोध लिथोग्राफी प्रक्रिया एक मानक का उपयोग कर गढ़े है. प्रथम स्तर के प्रत्येक के अंत में Inlet और आउटलेट बंदरगाहों के साथ microchannels हैं. दूसरे स्तर microscale परिपत्र चैनल लंबाई के रास्ते के मध्य में स्थित है और चैनल चौड़ाई के साथ केंद्रित छेद होते हैं. निष्क्रिय पम्पिंग विधि इनलेट पोर्ट से आउटलेट बंदरगाह 2 के लिए तरल पदार्थ पंप करने के लिए प्रयोग किया जाता है. microfluidic युक्ति बंद-the-शेल्फ छिड़काव कक्षों के साथ एकीकृत है और इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी सेटअप के साथ सहज एकीकरण की अनुमति देता है. तरल पदार्थ के आउटलेट बंदरगाहों की ओर microchannels के माध्यम से प्रवेश बंदरगाहों प्रवाह पर शुरू और भी परिपत्र छिड़काव के स्नान में microchannels के शीर्ष पर स्थित के उद्घाटन के माध्यम से बच. इस प्रकार मस्तिष्क छिड़काव कक्ष स्नान में और microfluidic डिवाइस के ऊपर रखा टुकड़ा के नीचे सतह अलग न्यूरोट्रांसमीटर के साथ उजागर किया जा सकता है. microfluidic युक्ति और सामग्री के पारदर्शी प्रकृति के microscale मोटाई [coverslip कांच और PDMS (polydimethylsiloxane)] microfluidic युक्ति बनाने की अनुमति मस्तिष्क टुकड़ा का माइक्रोस्कोपी करने के लिए इस्तेमाल किया. microfluidic युक्ति रासायनिक मस्तिष्क टुकड़ा microenvironments शुरू उत्तेजनाओं के मॉडुलन (स्थानिक और लौकिक दोनों) की अनुमति देता है.
Protocol
Discussion
मौजूदा macroscale या microscale मस्तिष्क टुकड़ा छिड़काव कक्षों स्थानिक संकल्प वे न्यूरोट्रांसमीटर के साथ मस्तिष्क स्लाइसें को बेनकाब प्रदान के संदर्भ में सीमित कर रहे हैं. microfluidic युक्ति यहाँ प्रदर्शन प्रौद्योगिकी के इस स…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
अनुदान NIH महाराष्ट्र ६४,६११ और NARSAD युवा अन्वेषक पुरस्कार द्वारा प्रदान की गई थी. लेखकों को भी उनके तकनीकी सहायता के लिए एडम Beagley, मार्क Dikopf, और बेन स्मिथ स्वीकार करते हैं करना चाहते हैं.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| RC-26GPL | Tool | Warner Instruments | W2-64-0236 | Low Profile Large Bath RC-26GLP Recording Chamber |
| SHD-26GH/10 | Tool | Warner Instruments | W2-64-0253 | Stainless steel slice hold-down for RC-26G, 1.0 mm thread spacing |
| PDMS (polydimethylsiloxane) | Reagent | Dow Corning | Sylgard 184 | Silicone Elastomer Kit |
| Plasma Preen-II 862 | Tool | Plasmatic Systems, Inc. | Microwave plasma system | |
| Model P-1 | Tool | Warner Instruments | W2-64-0277 | Series 20 Plain Platform, Model P-1 |
| SA-NIK | Tool | Warner Instruments | W2-64-0291 | Adapter for Nikon Diaphot/TE200/TE2000, SA-NIK |
| Oxygenated, heated ACSF (Artificial cerebro-spinal fluid) | Reagent | Exact composition will vary with application |
References
- Blake, A. J., Pearce, T. M., Rao, N. S., Johnson, S. M., Williams, J. C. Multilayer PDMS microfluidic chamber for controlling brain slice microenvironment. Lab on a Chip. 7, 842-849 (2007).
- Walker, G. M., Beebe, D. J. A passive pumping method for microfluidic devices. Lab on a Chip. 2, 131-134 (2002).
