Nous démontrons la fabrication d'un dispositif simple microfluidique qui peuvent être intégrés avec les configurations standard de l'électrophysiologie pour exposer les surfaces micro d'une tranche du cerveau d'une manière bien contrôlée pour différents neurotransmetteurs.
Abstract
Nous avons démontré la fabrication d'un dispositif à deux niveaux microfluidique qui peuvent être facilement intégrés avec les configurations existantes électrophysiologie. Le dispositif à deux niveaux microfluidique est fabriqué en utilisant une norme en deux étapes négative résister à une processus de lithographie. Le premier niveau contient des microcanaux avec des orifices d'entrée et de sortie à chaque extrémité. Le deuxième niveau contient micro trous circulaires situées à mi-chemin de la longueur de canal et centré le long avec une largeur de canal. Passif méthode de pompage est utilisée pour pomper des liquides à partir du port d'entrée au port de sortie 2. Le dispositif microfluidique est intégré à off-the-shelf chambres de perfusion et permet une intégration transparente avec l'installation d'électrophysiologie. Les fluides introduits à l'entrée des ports le débit à travers les microcanaux vers les ports de sortie et aussi s'échapper à travers les ouvertures circulaires situées sur le dessus des microcanaux dans le bain de la perfusion. Ainsi, la surface inférieure de la tranche de cerveau placé dans le bain et la chambre de perfusion au-dessus du dispositif microfluidique peut être exposé à différents neurotransmetteurs. L'épaisseur microscopique du dispositif microfluidique et la nature des matériaux transparents [verre lamelle et PDMS (polydiméthylsiloxane)] utilisé pour rendre le dispositif microfluidique permet de microscopie de la tranche de cerveau. Le dispositif microfluidique permet une modulation (à la fois spatiale et temporelle) des stimuli chimiques introduits à l'microenvironnements tranche de cerveau.
Protocol
SU-8 de fabrication du moule Préparation de Maître Le maître SU-8 sur le substrat de plaquette de silicium est préparé en utilisant une norme en deux étapes de lithographie processus négatif résister. Les marques d'alignement sur la plaquette de silicium sont enlevés à l'aide d'une lame de rasoir que la hauteur de ces structures (situé le long de la périphérie extérieure de la plaquette) est plus que les structures périphérique réel. L…
Discussion
Existants macroscopique ou microscopique chambres du cerveau tranche de perfusion sont limitées en termes de la résolution spatiale qu'ils fournissent pour exposer des tranches de cerveau avec des neurotransmetteurs. La technologie dispositif microfluidique démontré ici surmonte cette limitation en utilisant des techniques simples de bioMEMS. Il est prévu que la simplicité dans la fabrication du dispositif microfluidique et de la facilité de son intégration avec les configurations existantes électrophysiologie permettra l'a…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Le financement a été fourni par le NIH et le MH-64611 NARSAD Young Investigator Award. Les auteurs tiennent également à remercier Adam Beagley, Mark Dikopf, et Ben Smith pour leur assistance technique.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
RC-26GPL
Tool
Warner Instruments
W2-64-0236
Low Profile Large Bath RC-26GLP Recording Chamber
SHD-26GH/10
Tool
Warner Instruments
W2-64-0253
Stainless steel slice hold-down for RC-26G, 1.0 mm thread spacing
Shaikh Mohammed, J., Caicedo, H., Fall, C. P., Eddington, D. T. Brain Slice Stimulation Using a Microfluidic Network and Standard Perfusion Chamber. J. Vis. Exp. (8), e302, doi:10.3791/302 (2007).