We hebben een basis van collageen<em> In vitro</em> Test die de proliferatie en de invasie bevordert uit monsters van alle subtypen borstkanker. Optische Projectie Tomografie, een driedimensionale microscopie-techniek werd gebruikt om te visualiseren en te kwantificeren tumor expansie. Deze test kan worden gebruikt om drugs reactie van de individuele tumor monsters te kwantificeren.
Borstkanker is een belangrijke oorzaak van sterfte in de Westerse wereld. Het staat vast dat de verspreiding van borstkanker eerst lokaal en later distaal, is een belangrijke factor in de patiënt prognose. Experimentele systemen van borstkanker vertrouwen op cellijnen meestal afgeleid van de primaire tumoren of pleurale effusie. Twee belangrijke obstakels verhinderen dit onderzoek: (i) een aantal bekende sub-types van borstkanker (met name een slechte prognose luminale B tumoren) zijn niet vertegenwoordigd binnen de huidige regel collecties, (ii) de invloed van de tumor micro-omgeving is doorgaans niet in aanmerking genomen.
We tonen een techniek om cultuur primaire borstkanker exemplaren van alle sub-types. Dit wordt bereikt door gebruik te maken driedimensionale (3D) cultuur systeem waarin kleine stukjes van de tumor zijn ingebed in zachte rat collageen I kussens. Binnen 2-3 weken, de tumorcellen zich in de collageen en vorm verschillende structuren vergelijkbaar met die waargenomen in de menselijke tumours1. Levensvatbare adipocyten, epitheelcellen en fibroblasten in de oorspronkelijke kern waren duidelijk op histologie. Kwaadaardige epitheliale cellen met squamoid morfologie werden gedemonstreerd binnendringen in het omliggende collageen. Nucleaire pleomorfisme was duidelijk in deze cellen, samen met mitotische figuren en apoptotische lichamen.
We hebben in dienst optische projectie Tomografie (OPT), een 3D-imaging technologie, om de omvang van de tumor zich in de cultuur te kwantificeren. We hebben OPT gebruikt om het grootste deel volume van de tumor cultuur te meten, een parameter routinematig gemeten tijdens de neo-adjuvante behandeling van patiënten met borstkanker om de respons op behandeling met geneesmiddelen te beoordelen.
Hier presenteren we een kans om cultuur borsttumoren bij de mens zonder sub-type bias en kwantificeren van de verspreiding van die ex vivo. Deze methode kan worden gebruikt in de toekomst van drugs gevoeligheid in de oorspronkelijke tumor te kwantificeren. Dit kan zorgen voor een meer voorspellend model dan de momenteel gebruikte cellijnen.
Op basis van collageen assays om het gedrag van kanker cellijnen studie zijn nu op grote schaal gebruikt 6,7,8. Toch hebben deze testen niet terug te vinden in volle de complexiteit van de tumor en zijn omgeving. In deze studie hebben we laten zien dat de menselijke borstkanker materialen kunnen worden gebruikt op een vergelijkbare manier, ex vivo. Verder OPT is een nuttig hulpmiddel om de 3D-uitbreiding van borstkanker te karakteriseren. We vonden dat de belangrijkste beperking van deze techniek is de beschikbaarheid van de tumor materialen (een single core biopsie is voldoende voor 4-6 assays). Een andere beperkende factor is dat structurele invasie komt alleen voor bij ongeveer 40% van de testen. Om dit, wij regelmatig toe te voegen elke gewenste behandeling rond dag 7 tot alle testen met zichtbare groei.
Het gebruik van OPT zou kunnen worden uitgebreid in de toekomst ook te detecteren bulk veranderingen, ex vivo, als gevolg van behandeling met geneesmiddelen. Dit op zijn beurt zou kunnen vergemakkelijken, meer geïndividualiseerde behandeling van kanker, onafhankelijk van diermodellen. We zijn momenteel het verkennen van de reactie van ER + tumoren aan tamoxifen ex vivo.
The authors have nothing to disclose.
Wij danken Lorna Renshaw (Edinburgh Breast Unit) voor haar onschatbare hulp bij het verkrijgen van klinische monsters.
Gebruik van tumor materiaal werd goedgekeurd door de Lothian Research Ethics Committee (08/S1101/41) en behaalde onder de auspiciën van Experimenteel Kankeronderzoek Medicine Centre-programma (Edinburgh).
Dit werk wordt ondersteund door de Schotse Funding Council. ADL is een Miss Margaret Butters Reekie Trust klinische kerel.
Name of Reagent | Company | Catalogue No. |
MEGM Complete | Lonza | CC-3150 |
DMEM/F12 | Sigma-Aldrich | D8900 10X1L |
β-oestradiol | Sigma-Aldrich | E8875-250MG |
Rabbit anti-cytokeratin | Dako | Z0622 |
Goat anti-rabbit Alexa555 | Invitrogen | A21422 |
All other standard reagents were obtained from Sigma-Aldrich.