Мы разработали коллагена основе<em> В пробирке</em> Анализ, который способствует пролиферации и вторжения из образцов всех подтипов рака молочной железы. Оптическая томография Проектирование, трехмерной микроскопии техника была использована для визуализации и количественной оценки опухолевого роста. Этот анализ может быть использован для количественного наркотиков реакция отдельных образцов опухоли.
Рак молочной железы является одной из ведущих причин смертности в западном мире. Хорошо известно, что распространение рака молочной железы, в первую локально, а затем дистально, является основным фактором пациента прогноз. Экспериментальные системы рака молочной железы зависят от клеточных линий обычно выводятся из первичных опухолей или плевральный выпот. Два основных проблем, препятствующих этого исследования: (I) некоторые известные подтипы рака молочной железы (в частности, плохой прогноз просвета опухолей B) не представлены в рамках существующих коллекций линии; (II) влияния микроокружения опухоли обычно не принимается во внимание.
Мы показываем технику к культуре первичный рак молочной железы образцов всех подтипов. Это достигается с помощью трехмерной (3D) системе культуры, в которой небольшие кусочки опухоли, внедренных в мягкой коллагена крысы я подушки. В течение 2-3 недель, раковые клетки распространились на коллаген и образуют различные структуры, подобные тем, которые наблюдаются в человеческом tumours1. Жизнеспособных адипоцитов, эпителиальные клетки и фибробласты в первоначальное ядро было видно на гистологию. Злокачественные эпителиальные клетки с squamoid морфологии были продемонстрированы вторжение в окружающие коллагена. Ядерная плеоморфизм было очевидно внутри этих клеток, наряду с фигурами митоза и апоптоза органов.
Мы использовали оптический томограф Projection (ОПТ), 3D-технологии обработки изображений, для того, чтобы количественно степень распространения опухоли в культуре. Мы использовали OPT для измерения объемной объема опухоли культуры, параметр обычно измеряется в нео-адъювантной терапии больных раком молочной железы для оценки ответа на лекарственную терапию.
Здесь мы представляем возможность культуры опухолей человеческой груди без подтип смещения и количественно распространения этих бывших естественных условиях. Этот метод может быть использован в будущем для количественного лекарственной чувствительности в оригинальной опухоли. Это может обеспечить более прогнозной модели, чем в настоящее время используются клеточные линии.
Коллаген основе анализов для изучения поведения линий раковых клеток в настоящее время широко использовали 6,7,8. Тем не менее, эти тесты не отражены в полной сложности опухоли и ее окружения. В этом исследовании мы показали, что человеческий материалов рака молочной железы могут быть использованы аналогичным образом, экс естественных условиях. Кроме того, ОПТ является полезным инструментом для описания 3D расширение рака молочной железы. Мы обнаружили, что основным ограничением этого метода является наличие опухоли материалов (одноядерный биопсии достаточно для 4-6 анализов). Другим сдерживающим фактором является то, что структурные вторжения происходит только в 40% проб. Чтобы преодолеть это, мы регулярно добавлять любое желаемое лечение около 7-й день, чтобы все анализы с видимым ростом.
Использование ОПТ может быть продлен в будущем также обнаружить массовые изменения, экс живом организме, в результате медикаментозного лечения. Это, в свою очередь, может способствовать более индивидуализированные терапии рака, независимо от животных моделях. Настоящее время мы изучаем реакцию ER + опухолей естественных тамоксифен отл.
The authors have nothing to disclose.
Мы благодарим Лорна Реншоу (Эдинбург груди Unit) за неоценимую помощь в получении клинических образцов.
Использование опухоли материал был одобрен Лотиан исследования Комитета по этике (08/S1101/41) и получил под эгидой Экспериментальной медицины Рак центр программы (Эдинбург).
Эта работа проводится при поддержке Совета шотландского финансирования. ADL является мисс Маргарет Баттерс Reekie целевой клинической парень.
Name of Reagent | Company | Catalogue No. |
MEGM Complete | Lonza | CC-3150 |
DMEM/F12 | Sigma-Aldrich | D8900 10X1L |
β-oestradiol | Sigma-Aldrich | E8875-250MG |
Rabbit anti-cytokeratin | Dako | Z0622 |
Goat anti-rabbit Alexa555 | Invitrogen | A21422 |
All other standard reagents were obtained from Sigma-Aldrich.