Summary
कृन्तकों पर Stereotaxic सर्जरी दवाओं या बिजली की उत्तेजना और जाग में रिकॉर्डिंग, जानवरों के बर्ताव के लक्षित प्रशासन के लिए अनुमति देता है. इस वीडियो प्रस्तुति में हम हाल ही में प्रक्रियात्मक शोधन यह लंबे समय से चली आ रही प्रक्रिया है कि सफलतापूर्वक जीवित रहने की दर में सुधार और कम वजन हानि शल्य चिकित्सा के बाद करने के लिए प्रदर्शन करेंगे.
Abstract
विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्रों में cannulae का आरोपण के लिए Stereotaxic सर्जरी कई दशकों के लिए एक बहुत ही सफल प्रयोगात्मक तकनीक के लिए स्थानीय स्तर पर छेड़छाड़ और जाग, बर्ताव पशुओं में neurotransmitter रास्ते संकेतन के प्रभाव की जांच किया गया है. इसके अलावा, electrophysiological उत्तेजना और रिकॉर्डिंग के अध्ययन के लिए इलेक्ट्रोड का stereotaxic आरोपण neuroplasticity और पशुओं बर्ताव में मस्तिष्क नेटवर्क के हमारे वर्तमान को समझने के लिए महत्वपूर्ण भूमिका निभाई है. 1-4 कृन्तकों, जनता में जागरूकता के विषय में पशु कल्याण के मुद्दों और कड़े कानून (जैसे, 2010 प्रयोगशाला पशुओं का उपयोग 5 पर यूरोपीय संघ के निर्देशक) में शल्य चिकित्सा तकनीक के अनुकूलन के बारे में बढ़ती ज्ञान हमें इन शल्यचिकित्सा की प्रक्रियाओं को परिष्कृत करने के लिए सम्मान के साथ, विशेष रूप से प्रेरित सर्जरी के दौरान ऑक्सीजन पूरकता के लिए नई प्रक्रिया और रक्त oxygenation और हृदय की दर के स्तर की सतत निगरानी को लागू करने के रूप में अच्छी तरह के रूप मेंशल्य चिकित्सा के बाद की देखभाल के लिए एक मानकीकृत प्रोटोकॉल शुरू. हमारे टिप्पणियों से संकेत मिलता है कि इन संशोधनों को एक जीवित रहने की दर में वृद्धि और सर्जरी के बाद पशुओं की सामान्य स्थिति है (उदाहरण के कम वजन घटाने और एक और अधिक सक्रिय जानवर) में सुधार के परिणामस्वरूप है. यह वीडियो प्रस्तुति सामान्य प्रक्रियाओं हमारे कई संशोधनों के लिए विशेष ध्यान के साथ stereotaxic सर्जरी के इस प्रकार में शामिल दिखाएगा. हम चूहों में इन शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं का उदाहरण देकर स्पष्ट करने के लिए, लेकिन यह भी संभव है चूहों या अन्य छोटे प्रयोगशाला पशुओं में stereotaxic 6 तंत्र के लिए विशेष adapters का उपयोग करके इस प्रकार की सर्जरी प्रदर्शन है.
Protocol
नोट: एंटीसेप्टिक तकनीक पूरी प्रक्रिया के दौरान नियोजित किया जाना चाहिए. सभी उपकरणों और सामग्री (कपास इत्तला दे दी swabs, धुंध, आदि) है कि सर्जरी के दौरान इस्तेमाल किया जाएगा वाष्पदावी विसंक्रण द्वारा निष्फल होना चाहिए. एक सर्जिकल मास्क, बाल बोनट और बाँझ दस्ताने पहना होना चाहिए. क्षेत्र में काम कर रहे और stereotaxic तंत्र पूरी तरह साफ होना चाहिए, और एक 70% इथेनॉल समाधान के साथ कीटाणुरहित.
1. पूर्व शल्यचिकित्सा की प्रक्रियाओं
- Stereotaxic उपकरण और सभी आवश्यक सामग्री सेट. पूर्व गर्म हीटिंग पैड.
- अपने समर्थन में प्रवेशनी प्लेस और जांच अगर यह सीधे है.
- गैस सिस्टम पर मुड़ें - परिवेशी वायु और ऑक्सीजन का मिश्रण (कुल प्रवाह के 30-35% ऑक्सीजन होना चाहिए).
- चूहे के वजन और चतनाशून्य करनेवाली औषधि प्रशासन. हम subcutaneously इंजेक्शन ketamine (37.5 मिलीग्राम / किग्रा) और dexmedetomidine (0.25 मिलीग्राम / किग्रा) के एक मिश्रण का उपयोग कर रहे हैं. अलग संज्ञाहरण प्रोटोकॉल के लिए, 4 Flecknell और Hellebreker देखेंएट अल. 7.
- बाद चूहे चेतना खो दिया है, कान से बस एक बिजली के रेजर के साथ आंखों के बीच में जा रहा सिर क्षेत्र दाढ़ी.
- हीटिंग पैड पर चूहा हवा टयूबिंग के सामने अपनी नाक के साथ, प्लेस. एक oximeter उपयोग करने के लिए सुनिश्चित करें कि चूहे एक पर्याप्त रक्त oxygenation स्तर (<90% ड्रॉप नहीं किया जाना चाहिए) है. कृपया उपकरणों के समुचित उपयोग के लिए निर्माता के निर्देशों का पालन करें.
- दोनों corneas पर आँख क्रीम (Duratears जेड, Alcon) लागू करने के लिए निर्जलीकरण से बचने के.
- चूहे की सजगता (पूंछ पलटा या पैर के अंगूठे चुटकी प्रतिवर्त के रूप में Walantus एट अल 8. प्रदर्शन) की जाँच करने के लिए सुनिश्चित करें कि यह पर्याप्त रूप से anesthetized है. यदि चूहे को मजबूत सजगता दिखाने के लिए जारी है, संज्ञाहरण की पूरकता की जरूरत हो सकता है.
- यदि कोई पैर के अंगूठे चुटकी पलटा हुआ दिखाया गया है, stereotaxic तंत्र में चूहे जगह है, कान सलाखों समायोजित इतना है कि यह दोनों पक्षों पर बराबर पढ़ने से पता चलता है, और फिर जगह जानवर के सामने हवा टयूबिंगयह नाक पट्टी के साथ फिक्सिंग से. फिर से जाँच करें अगर चूहे 90% या अधिक की एक रक्त oxygenation स्तर से पता चलता है. यदि नहीं, तो या तो टयूबिंग समायोजित, यह नाक को करीब लाने, या ऑक्सीजन का प्रवाह बढ़ाने के. रक्त oxygenation और सर्जरी भर में हृदय की दर के स्तर मॉनिटर.
- लगातार मलाशय थर्मामीटर (preferentially एक हीटिंग पैड से जुड़ा है) के साथ चूहे तापमान की निगरानी और रिकॉर्ड और शल्य चिकित्सा की शुरुआत और अंत में मान. हीटिंग पैड को समायोजित या एक कंबल का उपयोग करने के लिए 38,5 37,5 का एक शरीर का तापमान बनाए रखने के डिग्री सेल्सियस
2. सर्जरी
- एनाल्जेसिक इंजेक्षन. हम carprofen (4.0-5.0 मिलीग्राम / किलो, subcutaneously) के एक एकल पेरी - ऑपरेटिव प्रशासन का उपयोग कर रहे हैं. विभिन्न एनाल्जेसिक प्रोटोकॉल के लिए, Hellebrekers एट 7 अल देखें.
- साफ टी के मुंडा क्षेत्रवह बालों परिधि एक निस्संक्रामक (जैसे, chlorhexidine 0.5%) के साथ तीन बार और स्थानीय स्तर पर स्थानीय संज्ञाहरण और vasoconstriction के लिए (20 मिलीग्राम / एमएल) lidocaine और एड्रेनालाईन (5 मिग्रा / मिली) का एक मिश्रण इंजेक्षन (को रोकने के लिए केंद्र से त्वचा अत्यधिक रक्तस्राव).
- खोपड़ी के midline पर के बारे में 2.5 सेमी की एक चीरा पूर्वकाल पीछे, कान के पीछे जब तक आंखों के बीच से जा रहे हैं बनाओ. 4-6 बुलडॉग clamps के प्रयोग के लिए रवाना त्वचा चुटकी और चीरा खुला रखने के लिए. एक रंग और या कपास swabs / और खोपड़ी की सतह को बेनकाब करने के लिए क्षेत्र को साफ के साथ किसी भी संयुक्त ऊतक निकालें.
- अगर सिर स्तर है की जाँच करें: प्रथम, Lambda खोजने के और वास्तव में इस स्थान पर गाइड प्रवेशनी जगह, खोपड़ी को छू. Dorso - वेंट्रल समन्वय रिकार्ड. अगले ब्रैग्मा अधिक बिल्कुल गाइड प्रवेशनी जगह, खोपड़ी छू, और अपने dorso - वेंट्रल समन्वय रिकॉर्ड. इन दो निर्देशांक समान होना चाहिए. यदि फर्क> 0.3 मिमी है, नाक पट्टी को समायोजित करने के लिए यह सही है.
- एमake खोपड़ी निष्फल हाथ ड्रिल (लगभग 5 मिमी एक गोलार्द्धों में प्रवेशनी स्थान और अन्य 5 मिमी contralateral गोलार्द्ध में प्रवेशनी स्थान पर पीछे पूर्वकाल) का उपयोग शिकंजा फिक्सिंग के लिए दो छोटे छेद. जब तक वे पूरी तरह से खोपड़ी में डाला जा रहा है बिना कसकर anchored रहे हैं, इन छेद में दो बाँझ शिकंजा प्लेस.
- गाइड प्रवेशनी के साथ बिल्कुल शीर्षस्थान पर रखा है, पूर्वकाल पीछे और पार्श्व निर्देशांक का रिकॉर्ड है. प्रत्येक मस्तिष्क क्षेत्र के लिए गाइड प्रवेशनी नियुक्ति के सही स्थान जोड़ने या ब्रैग्मा से घटाकर एक stereotaxic 9-11 एटलस की सहायता के साथ, के द्वारा गणना की जा सकती है.
- अपने सही स्थान में गाइड प्रवेशनी स्थिति, थोड़ा खोपड़ी छू. Dorso - वेंट्रल समन्वय रिकार्ड. द्विपक्षीय प्रवेशनी प्लेसमेंट के लिए, अगले अन्य गोलार्द्ध में प्रवेशनी स्थान मिल जाए, और फिर से dorso - वेंट्रल समन्वय रिकॉर्ड. दोनों निर्देशांक समान होना चाहिए (या अलग <0.3 मिमी).
- एक बाँझ पेंसिल के साथ खोपड़ी पर प्रवेशनी स्थानों को चिह्नित और हाथ बरमे वाला के साथ गड़गड़ाहट छेद करने के लिए, आकार और गाइड प्रवेशनी की सहायता से सही स्थान की जाँच. एक बार छेद बना रहे हैं, एक बाँझ सुई का उपयोग करने के लिए धीरे meninges पंच प्रवेशनी के unobstructed प्रविष्टि के लिए अनुमति देने के.
- पहली छेद में प्रवेशनी प्लेस और इसे ध्यान से कम जब तक यह अंतिम वेंट्रल समन्वय तक पहुँचता है. दंत सीमेंट तैयार है और उदारता से यह प्रवेशनी और एक या दोनों शिकंजा आसपास लागू क्रम में प्रवेशनी ठीक है. रुको जब तक सीमेंट पूरी तरह से सूख गया है. बाद में, ध्यान से प्रवेशनी समर्थन dorso वेंट्रल पट्टी ऊपर मोड़ से हटा दें.
- समर्थन में दूसरा प्रवेशनी प्लेस और अन्य गोलार्द्ध में प्रवेशनी स्थान पर जाओ. छेद में प्रवेशनी प्लेस और पिछले चरण दोहराएँ. शिकंजा और सीमेंट के साथ cannulas के एक बड़े सतह को कवर, और पहले सीमेंट सूखा है, त्वचा से किसी भी अधिशेष हटायें.
- सुई गर्म (~ 37 डिग्री सेल्सियस) बाँझ खारा (~ 10 मिलीग्राम / किलो, सुप्रीम कोर्ट) पुनर्जलीकरण सुनिश्चित करने के लिए.
- बाद सीमेंट पूरी तरह से सूख गया है, प्रवेशनी समर्थन को हटा दें और प्रत्येक के लिए बाधा को रोकने के प्रवेशनी में एक बाँझ पिन जगह है.
- बाँझ खारा के साथ घाव क्षेत्र को साफ और सामने और घाव के पीछे सीवन.
- Stereotaxic तंत्र से पशु निकालें, अपनी नाक के सामने में गैस टयूबिंग की जगह. ऑक्सीजन संतृप्ति स्तर और शरीर के तापमान की निगरानी जारी रखें.
- यदि dexmedetomidine के साथ एक इंजेक्शन संवेदनाहारी प्रयोग किया जाता है, अपने प्रतिपक्षी atipamezole इंजेक्षन (0.25 मिलीग्राम / किग्रा, अनुसूचित जाति) और इंतजार जब तक जानवर जाग (लगभग 5 मिनट).
- एक वसूली पिंजरे में चूहे रखें. हाइपोथर्मिया से बचने के लिए, एक जगह है जहाँ आप कम से कम एक घंटे के लिए पशु पालन कर सकते हैं में एक मशीन में 28 डिग्री सेल्सियस या एक हीटिंग पैड पर पिंजरे मत्स्यालय कमरे में लौटने से पहले, जगह.
3. शल्य चिकित्सा के बाद की देखभाल
- दौरान सर्जरी के बाद पहले 4 दिनों के लिए, वजन और अन्य प्रयोगशाला logbooks या "पशु कल्याण डायरी" में पशु की हालत से संबंधित टिप्पणियों के दैनिक रिकॉर्ड रखने करके चूहे की वसूली की निगरानी.
- पशु कि बीमारी, संक्रमण, घाव, हानि, शरीर के वजन या अच्छी तरह से किया जा रहा है कम से गुजरना चाहिए विशेष देखभाल के अन्य लक्षण के प्रकट लक्षण दिखाने जैसे दर्दनाशक दवाओं की एक अतिरिक्त खुराक के लिए पोस्ट ऑपरेटिव दर्द, पाउडर भोजन और पानी के एक मिश्रण को कम करने मानक चाउ के अलावा चूहे की भूख, और / या खारा के चमड़े के नीचे इंजेक्शन के लिए पुनर्जलीकरण समर्थन को प्रोत्साहित करने के लिए.
- यदि चूहे इन उपायों के बाद किसी भी सुधार, या शरीर के वजन के नुकसान को प्रदर्शित नहीं करता है> 15% (पूर्व सर्जरी के वजन की तुलना में), बलिदान संवेदनाहारी की एक ज्यादा (मानवीय अंत बिंदु) के साथ पशु.
- चूहे आम तौर पर व्यवहार प्रयोगों के प्रारंभ से पहले कम से कम 7 दिनों के लिए ठीक करने की जरूरत है.
4. प्रतिनिधि परिणाम
jove_content "> करने के लिए निर्धारित करें कि क्या हमारे शल्य प्रक्रिया के लिए विभिन्न संशोधनों के, ऑक्सीजन अनुपूरण और रक्त oxygenation स्तर, हृदय की दर और शरीर के तापमान की सतत निगरानी करने के लिए सम्मान के साथ विशेष रूप से, जानवर के अस्तित्व बढ़ाया और सर्जरी के बाद अपनी सामान्य स्थिति में सुधार, हम की तुलना में गैर अस्तित्व जानवरों है कि सर्जरी के बाद हम 24 (20 चूहों प्रत्येक) साथियों मानक प्रोटोकॉल के साथ संचालित गैर अस्तित्व की दर के साथ इन संशोधनों को कार्यान्वित (20 चूहों के प्रत्येक निर्वाचकगण). 20 साथियों की दर के रूप में चित्र 1a में दिखाया गया है गैर - अस्तित्व की दर काफी साथियों का नमूना है कि संशोधित प्रोटोकॉल (पी <0.05, मान व्हिटनी यू परीक्षण, दो पूंछ) के साथ संचालित किया गया था में कम हो गया था इसके अलावा, के रूप में शल्य चिकित्सा के बाद, वजन हानि चित्रा 1b में दिखाया गया है. संशोधित प्रोटोकॉल के साथ संचालित चूहों की भी काफी कम हो गया था के रूप में है कि चूहों के मानक प्रक्रिया (पोस्ट ऑपरेटिव 1 दिन के साथ संचालित करने के लिए तुलना: पी0.05, पोस्ट ऑपरेटिव 2 दिन: पी <0.01, पोस्ट ऑपरेटिव 3 दिन: पी 0.17 =; विद्यार्थी का t-परीक्षण).
चित्रा 1 गैर जीवित रहने की दर और शल्य चिकित्सा के बाद वजन घटाने पर सर्जिकल संशोधनों के प्रभाव. (ए) संशोधित प्रोटोकॉल के साथ संचालित चूहों की गैर अस्तित्व की दर के रूप में मानक प्रोटोकॉल के साथ संचालित की है कि चूहों की तुलना में. 20 चूहों, कि सर्जरी जीवित नहीं किया काउहोट के अनुसार, गैर अस्तित्व दर (औसत ± अन्तःचतुर्थक पर्वतमाला) चूहों के प्रतिशत के रूप में गणना की गई. * पी <0.05, मान व्हिटनी यू परीक्षण दो पूंछ (n = संशोधित और मानक प्रोटोकॉल के लिए प्रोटोकॉल के 24 साथियों के लिए 20 साथियों ). (बी) पहली (POD1), (POD2) दूसरे और तीसरे दिन (POD3) पोस्ट ऑपरेटिव के दौरान वजन घटाने (पूर्व सर्जरी के वजन के प्रतिशत के रूप में ± SEM मतलब). * पी <0.05, ** पी <0.01, विद्यार्थी का t-परीक्षण (एन = समूह प्रति 60).
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Discussion
इस वीडियो प्रस्तुति का मुख्य उद्देश्य stereotaxic सर्जरी के बुनियादी सिद्धांतों के साथ व्यवहार neuroscientists परिचित है. शोधकर्ताओं ने पहले ही stereotaxic सर्जरी प्रदर्शन कर रहे हैं इस वीडियो से भी लाभ हो सकता है और अपने स्वयं के प्रयोगशाला में उपयोग के लिए प्रक्रियात्मक शोधन के कुछ विचार. शल्य चिकित्सा तकनीक 1-3 अनुकूलन के बारे में एक बढ़ती ज्ञान, मानव और पशु चिकित्सा दवा 4,12, जनता में जागरूकता के विषय में पशु कल्याण के मुद्दों और कड़े कानून (जैसे, 2010 पर यूरोपीय संघ निर्देशक में उपयोग के लिए नए anesthetics और दर्दनाशक दवाओं के विकास प्रयोगशाला 5 पशुओं के उपयोग) हमें ऑक्सीजन अनुपूरण और सर्जरी के दौरान रक्त और oxygenation दिल की दर के स्तर की सतत निगरानी के लिए नई प्रक्रिया को लागू करने के लिए प्रेरित किया. हम ने कहा, के रूप में पशुओं के एक प्रतिनिधि नमूने, एक समग्र वृद्धि की जीवित रहने की दर और एक काफी कम वजन शल्य चिकित्सा के बाद नुकसान के लिए दिखाया गया है.इस तरह के एक कम वजन शल्य चिकित्सा के बाद नुकसान जानवर पर एक शल्य प्रक्रिया के छोटे बोझ और, फलस्वरूप, सर्जरी के तत्काल बाद में एक और अधिक सक्रिय पशुओं में परिणाम को प्रतिबिंबित हो सकता है. क्या यह भी अपनी दीर्घकालिक स्वास्थ्य पर लाभकारी प्रभाव है स्पष्ट नहीं है. हालांकि, एक उल्लेखनीय अवलोकन किया गया था कि ऑक्सीजन की आपूर्ति को हटाने को अस्थायी रूप से रक्त ऑक्सीजन संतृप्ति स्तर में एक उल्लेखनीय और विश्वसनीय कमी है, जो भी 50% से नीचे ड्रॉप (एक प्रदर्शन करण के लिए वीडियो प्रस्तुति देखें) करने के लिए नेतृत्व. यह बोधगम्य है कि सर्जरी के दौरान किसी भी ऑक्सीजन अनुपूरण के साथ प्रदान नहीं पशुओं में होने वाली के रूप में लंबे समय तक ऑक्सीजन की अपर्याप्त रक्त स्तर, संभवतः, दीर्घकालिक व्यवहार परिणामों के साथ hypoxia में परिणाम और भी नकारात्मक परिणाम और / या व्यवहार प्रयोग के गुणवत्ता को प्रभावित हो सकता है. हम नहीं जानते कि सर्जरी के दौरान इस तरह के ऑक्सीजन रक्त की आपूर्ति की एक अवसाद संवेदनाहारी हमारी प्रयोगशाला में इस्तेमाल किया प्रोटोकॉल (यानी, ketami का एक मिश्रण के लिए विशिष्ट हैपूर्वोत्तर और dexmedetomidine) या यह है कि क्या एक अधिक सामान्य घटना इंजेक्शन anesthetics के साथ जुड़े है. अभिश्वसन संज्ञाहरण का उपयोग, परिवेशी वायु और ऑक्सीजन का एक मिश्रण के साथ, रक्त ऑक्सीजन का स्तर के अवसाद से उबरने के लिए एक वैकल्पिक तरीका हो सकता है है.
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Disclosures
लेखकों खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.
Acknowledgments
लेखकों वीडियो में इस्तेमाल किया चित्र के लिए डॉ. पीटर Gerrits धन्यवाद.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Alcohol 70% | VWR international | ||
| Antisedan (atipamezole) | Orion | ||
| Atropine sulfate 0,5 | Teva Pharmachemie | ||
| Bulldog haemostatic clamp | Aesculap | ||
| Cannulas | Component Supply Co. | ||
| Chlorhexidine 0.5% | APP Pharmaceuticals | ||
| Cleaning powder | Alconox, Inc. | ||
| Cotton sticks | Hartmann BV | ||
| Dexdomitor (dexmedetomidine) | Orion | ||
| Drill | Dremel | ||
| Duratears Z | Alcon | ||
| Durogrip Naaldv–rder converse 130mm | Aesculap | ||
| Durotip Fijne schaar ret.sp/st 110 mm | Aesculap | ||
| Gauze | Medicomp (5x5) | ||
| Heating pad | Harvard Apparatus | ||
| Insect pins (stylets) | Entosphinx (Czech Republik) | ||
| Ketamine 10% (ketamine) | Alfasan | ||
| Micro-halsted straight tip | Aesculap | ||
| Molinea | Hartmann BV | ||
| NaCl 0,9% | Baxter Internationl Inc. | ||
| Needles (25G) | Terumo Medical Corp. | ||
| Oximeter | Edan Instruments, Inc. | ||
| Pentobarbital | Pharmacy of the UMCG | ||
| Rimadyl | Pfizer Pharma GmbH | ||
| Scalpel blade No. 23 | Swann-Morton | ||
| Scalpelholder NR. 4 133 mm | Aesculap | ||
| Screw driver | Any Supplier | ||
| Simplex Rapid (dental cement) | Kemdent | ||
| Skull screws | Component Supply Co. | ||
| Spatula | VWR international | ||
| Spongestan special | Johnson & Johnson | ||
| Stereotacts | Kopf Instruments | ||
| Surgical forceps 100mm | Aesculap | ||
| Suture material Safil 5/0 | Aesculap | ||
| Syringe 10 ml | Omnifix | ||
| Syringe 1ml | Terumo Medical Corp. | ||
| Syringe 5ml | Omnifix | ||
| Xylocaine (lidocaine/adrenaline) | AstraZeneca |
References
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- Richardson, C. A., Flecknell, P. A. Anaesthesia and post-operative analgesia following experimental surgery in laboratory rodents: are we making progress? Altern. Lab Anim. 33, 119-127 (2005).
- Stokes, E. L., Flecknell, P. A., Richardson, C. A. Reported analgesic and anaesthetic administration to rodents undergoing experimental surgical procedures. Lab Anim. 43, 149-154 (2009).
- Flecknell, P. A. Laboratory Animal Anaesthesia - A Practical Introduction for Research Workers and Technicians. , Academic Press. (2009).
- DIRECTIVE 2010/63/EU OF THE EUROPEAN PARLIAMENT AND OF THE COUNCIL of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes. Official Journal of the European Union. , (2010).
- Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents. J. Vis. Exp. (20), e880-e880 (2008).
- Hellebrekers, L. J., Booij, L. H. D. J., Flecknell, P. A. Anaesthesia, analgesia and euthanasia. Principles of Laboratory Animal Science. Van Zutphen, L. F. M., Baumans, V., Beynen, A. C. , Elsevier Science B.V. 277-311 (2001).
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- Swanson, L. W. Brain Maps: Structure of the Rat Brain. , Elsevier. (1992).
